摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
英文缩略表 | 第11-12页 |
第一章 引言 | 第12-19页 |
1.1 口蹄疫及口蹄疫病毒 | 第12-13页 |
1.2 口蹄疫的流行及疫苗研究现状 | 第13-15页 |
1.2.1 口蹄疫的流行现状 | 第13-14页 |
1.2.2 口蹄疫的疫苗研究现状 | 第14-15页 |
1.3 口蹄疫病毒的pH稳定性研究进展 | 第15-18页 |
1.3.1 口蹄疫病毒酸敏感性的原因 | 第16页 |
1.3.2 口蹄疫病毒的pH稳定性研究进展 | 第16-18页 |
1.4 研究内容 | 第18-19页 |
第二章 耐酸性O型FMDV基因工程突变株的拯救及鉴定 | 第19-30页 |
2.1 材料 | 第19-20页 |
2.1.1 质粒、病毒与细胞 | 第19页 |
2.1.2 主要试剂 | 第19页 |
2.1.3 主要仪器 | 第19-20页 |
2.2 方法 | 第20-26页 |
2.2.1 点突变引物的设计 | 第20页 |
2.2.2 PCR | 第20-21页 |
2.2.3 PCR产物回收 | 第21页 |
2.2.4 半长质粒pOZK-K123与扩增DNA片段的酶切 | 第21-22页 |
2.2.5 连接 | 第22页 |
2.2.6 转化、挑斑和摇菌 | 第22页 |
2.2.7 提取质粒 | 第22-23页 |
2.2.8 质粒的鉴定 | 第23页 |
2.2.9 含有突变位点的全长质粒构建 | 第23-24页 |
2.2.10 连接和转化 | 第24页 |
2.2.11 挑斑、摇菌和提质粒 | 第24页 |
2.2.12 重组全长质粒的鉴定 | 第24页 |
2.2.13 转染 | 第24-25页 |
2.2.14 拯救病毒的鉴定 | 第25-26页 |
2.3 结果 | 第26-28页 |
2.3.1 半长质粒的鉴定 | 第26-27页 |
2.3.2 全长质粒的鉴定 | 第27页 |
2.3.3 拯救病毒的鉴定 | 第27-28页 |
2.4 讨论 | 第28-30页 |
第三章 拯救病毒的生物学特性及物理化学性质的分析 | 第30-45页 |
3.1 材料 | 第30页 |
3.1.1 乳鼠、细胞和病毒 | 第30页 |
3.1.2 主要试剂和耗材 | 第30页 |
3.1.3 仪器 | 第30页 |
3.2 方法 | 第30-34页 |
3.2.1 拯救病毒的蚀斑表型 | 第30-31页 |
3.2.2 一步法生长曲线的测定 | 第31页 |
3.2.3 乳鼠致病力实验 | 第31-32页 |
3.2.4 病毒中和实验 | 第32页 |
3.2.5 同源模建分析 | 第32-33页 |
3.2.6 酸诱导的失活实验 | 第33页 |
3.2.7 酸诱导的解聚实验 | 第33页 |
3.2.8 热诱导的失活实验 | 第33-34页 |
3.2.9 碱诱导的失活实验 | 第34页 |
3.2.10 不同离子强度下酸诱导的失活实验 | 第34页 |
3.3 结果 | 第34-44页 |
3.3.1 拯救病毒的蚀斑形态 | 第34-35页 |
3.3.2 拯救病毒的一步生长曲线分析 | 第35-36页 |
3.3.3 乳鼠致病力结果 | 第36-37页 |
3.3.4 病毒中和实验结果 | 第37-38页 |
3.3.5 同源模建分析 | 第38-39页 |
3.3.6 酸诱导的失活结果 | 第39-40页 |
3.3.7 酸诱导的解聚结果 | 第40-41页 |
3.3.8 热诱导的失活结果 | 第41-42页 |
3.3.9 碱诱导的失活结果 | 第42-43页 |
3.3.10 不同离子强度下酸诱导的失活结果 | 第43-44页 |
3.4 讨论 | 第44-45页 |
第四章 全文讨论 | 第45-47页 |
第五章 全文结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
作者简历 | 第55页 |