| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 目录 | 第10-14页 |
| 绪论 | 第14-22页 |
| ·选题意义 | 第14页 |
| ·β-葡萄糖苷酶来源及分类 | 第14-16页 |
| ·β-葡萄糖苷酶来源 | 第14-15页 |
| ·β-葡萄糖苷酶分类 | 第15-16页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的结构及催化机理 | 第16-17页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的分子量大小 | 第16页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的结构 | 第16-17页 |
| ·β-葡萄糖苷酶作用机理 | 第17页 |
| ·β-葡萄糖苷酶基因克隆表达的国内外研究进展 | 第17-19页 |
| ·β-葡萄糖苷酶基因在大肠杆菌中的表达 | 第17-18页 |
| ·β-葡萄糖苷酶基因在毕赤酵母中的表达 | 第18页 |
| ·β-葡萄糖苷酶基因在枯草芽孢杆菌中的表达 | 第18-19页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的应用及前景展望 | 第19-21页 |
| ·β-葡萄糖苷酶在医学领域 | 第19页 |
| ·低聚龙胆糖生产 | 第19页 |
| ·水解纤维素 | 第19-20页 |
| ·作为风味酶 | 第20页 |
| ·在其它应用 | 第20-21页 |
| ·本研究的目的和内容 | 第21-22页 |
| ·研究目的 | 第21页 |
| ·研究内容 | 第21-22页 |
| 第二章 葡枝根霉cDNA文库的构建及β-葡萄糖苷酶基因的分离 | 第22-46页 |
| ·实验材料 | 第22-25页 |
| ·菌种及载体 | 第22页 |
| ·培养基 | 第22-23页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·器材与仪器 | 第23-25页 |
| ·实验方法 | 第25-33页 |
| ·菌丝体预处理 | 第25页 |
| ·mRNA提取及纯度鉴定 | 第25-26页 |
| ·cDNA双链全长合成 | 第26-27页 |
| ·接头连接 | 第27-28页 |
| ·NotⅠ酶切 | 第28页 |
| ·去除短链cDNA | 第28-29页 |
| ·pPIC9K原核宿主菌的培养及质粒pPIC9K提取 | 第29-30页 |
| ·质粒双酶切 | 第30页 |
| ·表达质粒pPIC9K-cDNA的构建 | 第30-31页 |
| ·毕赤酵母GS115感受态制备 | 第31页 |
| ·转化毕赤酵母GS115 | 第31-32页 |
| ·阳性克隆的筛选及序列分析 | 第32页 |
| ·发酵性能的测定 | 第32-33页 |
| ·发酵液纯化及SDS-PAGE | 第33页 |
| ·实验结果 | 第33-41页 |
| ·pPI9K质粒的提取 | 第33-35页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第35页 |
| ·测序及序列分析 | 第35-37页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第37-38页 |
| ·葡萄糖标准曲线的绘制 | 第38-40页 |
| ·β-葡萄糖苷酶酶活测定 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41-46页 |
| ·小结 | 第41页 |
| ·表达重组β-葡萄糖苷酶的Pichia pastoris表达系统评析 | 第41-46页 |
| 第三章 bgl1在枯草芽孢杆菌中的克隆及表达 | 第46-58页 |
| ·实验材料 | 第46-47页 |
| ·菌种及载体 | 第46页 |
| ·培养基 | 第46页 |
| ·主要试剂 | 第46-47页 |
| ·器材与仪器 | 第47页 |
| ·实验方法 | 第47-50页 |
| ·Bgl1基因克隆 | 第47-48页 |
| ·DNA的回收、纯化 | 第48-49页 |
| ·对目的基因和质粒酶切 | 第49页 |
| ·重组质粒bgl1-pMA5的构建 | 第49页 |
| ·WB600感受态的制备 | 第49-50页 |
| ·重组质粒转化 | 第50页 |
| ·阳性重组子的酶切验证 | 第50页 |
| ·重组菌WB600/pMA5-bgl1发酵性能 | 第50页 |
| ·实验结果 | 第50-57页 |
| ·bgl1基因克隆 | 第50-51页 |
| ·双酶切验证 | 第51-52页 |
| ·重组菌WB600/pMA5-bgl1发酵性能 | 第52-57页 |
| ·重组菌WB600/pMA5-bgl1发酵条件的优化 | 第52-57页 |
| ·纤维二糖浓度对重组菌WB600/pMA5-bgl1发酵的影响 | 第52-53页 |
| ·氮源对重组菌WB600/pMA5-bgl1发酵的影响 | 第53-55页 |
| ·无机盐对重组菌WB600/pMA5-bgl1发酵的影响 | 第55-57页 |
| ·讨论 | 第57-58页 |
| ·小结 | 第57页 |
| ·对枯草芽孢杆菌表达系统发酵的评价 | 第57-58页 |
| 第四章 结论与展望 | 第58-60页 |
| 结论 | 第58页 |
| 展望 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-69页 |
| 本人在攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
