致谢 | 第4-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
1 文献综述 | 第8-19页 |
1.1 昆虫病毒简介 | 第8页 |
1.2 昆虫病毒研究的现实意义 | 第8-9页 |
1.2.1 害虫防治 | 第8-9页 |
1.2.2 外源基因表达载体 | 第9页 |
1.3 昆虫病毒的分类 | 第9-10页 |
1.4 杆状病毒科 | 第10-19页 |
1.4.1 杆状病毒的分类 | 第10页 |
1.4.2 杆状病毒的结构 | 第10-12页 |
1.4.3 杆状病毒的基因组 | 第12页 |
1.4.4 杆状病毒表达载体系统的研究 | 第12-13页 |
1.4.5 杆状病毒作为杀虫剂的优缺点及解决方向 | 第13-14页 |
1.4.6 围食膜的结构及研究进展 | 第14-15页 |
1.4.7 蛋白质组学研究进展 | 第15-16页 |
1.4.8 增效蛋白简介 | 第16页 |
1.4.9 增效蛋白的特征及作用机制 | 第16-17页 |
1.4.10 增效蛋白的应用及研究展望 | 第17-19页 |
2 引言 | 第19-20页 |
3 材料与方法 | 第20-32页 |
3.1 材料 | 第20-22页 |
3.1.1 菌株、质粒、病毒、细胞系和昆虫 | 第20页 |
3.1.2 酶和其他试剂 | 第20页 |
3.1.3 溶液及培养基 | 第20-21页 |
3.1.4 耗材与仪器 | 第21-22页 |
3.1.5 引物合成和测序 | 第22页 |
3.2 实验方法 | 第22-32页 |
3.2.1 AsGV-En、AsGV-En-2679真核表达载体构建 | 第22-26页 |
3.2.2 细胞贴壁培养 | 第26-27页 |
3.2.3 细胞悬浮培养 | 第27-28页 |
3.2.4 AsGV-En/2679的真核表达 | 第28-29页 |
3.2.5 TnGV-En、TnGV-En-GFP真核表达及纯化 | 第29-30页 |
3.2.6 棉铃虫中肠围食膜的提取 | 第30-31页 |
3.2.7 棉铃虫中肠围食膜蛋白质的分离和鉴定 | 第31-32页 |
4 结果与分析 | 第32-52页 |
4.1 AsGV-En/2679的真核表达 | 第32-35页 |
4.1.1 重组克隆载体pFastBacHT-En/2679的构建 | 第32-33页 |
4.1.2 重组穿梭质粒Bacmid-2679/En的构建 | 第33页 |
4.1.3 AsGV-En/2679的真核表达 | 第33-35页 |
4.2 TnGV-En、TnGV-En-GFP的表达 | 第35-38页 |
4.2.1 TnGV-En、TnGV-En-GFP转染 | 第35页 |
4.2.2 TnGV-En、TnGV-En-GFP的大量表达 | 第35-36页 |
4.2.3 TnGV-En-GFP纯化 | 第36-38页 |
4.3 棉铃虫围食膜蛋白质鉴定结果 | 第38-52页 |
5 结论与讨论 | 第52-54页 |
5.1 讨论 | 第52-53页 |
5.2 结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-61页 |
ABSTRACT | 第61-62页 |