| 中文摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 英汉缩写语言名词对照 | 第5-11页 |
| 第一章引言 | 第11-21页 |
| 1.1 ATP-binding cassette(ABC)转运蛋白 | 第11-17页 |
| 1.1.1 跨膜结构域 | 第13页 |
| 1.1.2 核酸结合域 | 第13-14页 |
| 1.1.3.底物结合结构域 | 第14-15页 |
| 1.1.4 ABC转运蛋白的机制 | 第15-17页 |
| 1.2 ABC转运蛋白的分类及与配体的结合机制 | 第17-21页 |
| 1.2.1 通过类型一转运蛋白从细胞质进行的外排 | 第17-18页 |
| 1.2.2 类型三ABC转运蛋白 | 第18-19页 |
| 1.2.3 类型二的ABC转运蛋白 | 第19-20页 |
| 1.2.4 底物结合结构域（BPs）与底物的作用 | 第20-21页 |
| 第二章 材料和方法 | 第21-35页 |
| 2.1 菌株 | 第21页 |
| 2.2 质粒 | 第21-23页 |
| 2.3 工具酶及DNA，蛋白质分子量Marker | 第23页 |
| 2.4 试剂盒 | 第23-24页 |
| 2.5 主要化学试剂及耗材 | 第24-25页 |
| 2.6 主要仪器及设备 | 第25-26页 |
| 2.7 COG1732的生物信息学分析 | 第26页 |
| 2.8 引物的设计与合成 | 第26-27页 |
| 2.9 COG1732编码序列的扩增及回收 | 第27-28页 |
| 2.9.1 序列的扩增 | 第27-28页 |
| 2.9.2 PCR产物回收 | 第28页 |
| 2.10 PCR产物及载体质粒的酶切 | 第28页 |
| 2.11 连接 | 第28页 |
| 2.12 重组质粒的构建 | 第28-29页 |
| 2.13 COG1732重组蛋白的诱导表达及鉴定 | 第29页 |
| 2.14 COG1732重组蛋白的纯化 | 第29-31页 |
| 2.14.1 镍柱纯化 | 第29-30页 |
| 2.14.2 离子交换纯化 | 第30-31页 |
| 2.14.3 AKAT分子筛纯化 | 第31页 |
| 2.15 BCA法测定蛋白浓度 | 第31-32页 |
| 2.16 蛋白荧光淬灭 | 第32页 |
| 2.17 COG1732重组蛋白的晶体培养 | 第32-35页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第35-57页 |
| 3.1 COG1732重组蛋白的生物信息学分析 | 第35-38页 |
| 3.2 COG1732重组蛋白PCR扩增结果和表达载体的构建 | 第38-40页 |
| 3.3 COG1732重组蛋白的诱导表达 | 第40-41页 |
| 3.4 COG1732重组蛋白的纯化 | 第41-45页 |
| 3.4.1 NI柱亲和层析纯化 | 第41-42页 |
| 3.4.2 离子交换层析 | 第42-43页 |
| 3.4.3 分子筛 | 第43-44页 |
| 3.4.4 COG1732重组蛋白纯化过程总结 | 第44-45页 |
| 3.5 COG1732蛋白与底物的结合 | 第45-48页 |
| 3.6 COG1732重组蛋白晶体生长条件的筛选 | 第48-57页 |
| 3.6.1 晶体生长条件的筛选和优化 | 第48-55页 |
| 3.6.2 蛋白质结晶讨论 | 第55-57页 |
| 第四章 结论与展望 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-66页 |
| 在学期间的研究成果 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 附件 | 第68-74页 |