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Gα抑制性亚基Gαi1和Gαi3在睫状神经生长因子激活Akt-mTORC1通路中的作用

中文摘要第4-6页
abstract第6-7页
引言第10-12页
材料与方法第12-29页
    1.1 主要试剂第12-14页
    1.2 实验耗材第14页
    1.3 实验仪器设备第14-15页
    1.4 细胞株第15页
    1.5 溶液配制第15-21页
        1.5.1 10%FBS DMEM培养基:第15-16页
        1.5.2 1%FBS DMEM培养基第16页
        1.5.3 MTT配制(5mg/ml)第16页
        1.5.4 10% SDS溶液:第16-17页
        1.5.5 10% APS溶液第17页
        1.5.6 5X SDS-PAGE sample buffer第17页
        1.5.7 1.5M Tris-HCL(PH8.8)第17页
        1.5.8 0.5M Tris-HCL(PH6.8)第17-18页
        1.5.9 10% 丙烯酰氨凝胶电泳分离胶 15ml (for 2gels)第18页
        1.5.10 5% 丙烯酰氨凝胶电泳浓缩胶 6ml(for 2gels)第18页
        1.5.11 10% 丙烯酰氨凝胶电泳分离胶 30ml(for 4gels)第18页
        1.5.12 5% 丙烯酰氨凝胶电泳浓缩胶 12ml(for 4gels)第18-19页
        1.5.13 12% 丙烯酰氨凝胶电泳分离胶 15ml (for 2gels)第19页
        1.5.14 5X stripping buffer第19页
        1.5.15 10XRnning Buffer第19页
        1.5.16 1x Transfer Buffer第19-20页
        1.5.17 10X磷酸盐缓冲液(PBS)第20页
        1.5.18 PBST第20页
        1.5.19 10%脱脂奶粉封闭液第20页
        1.5.20 10X 丽春红染液第20-21页
    1.6 实验方法第21-28页
        1.6.1 细胞复苏第21页
        1.6.2 细胞传代第21页
        1.6.3 细胞冻存第21-22页
        1.6.4 睫状神经生长因子(CNTF)以时间梯度处理细胞(以课题中的CNTF处理WT MEFs、DKO MEFs为例)第22-23页
        1.6.5 Western blotting实验第23-26页
        1.6.6 MTT法检测细胞活性第26-27页
        1.6.7 以慢病毒为载体shRNA干扰Gαi1和Gαi3基因表达第27-28页
    1.7 统计学方法第28-29页
实验结果第29-42页
    1.GΑI蛋白亚型GΑI1和GΑI3在CNTF激活AKT-MTORC1通路,上调GSK-3Β、GAB1及ERK信号蛋白磷酸化水平中具有重要作用第29-34页
    2.GAB1参与CNTF激活AKT-MTORC1、ERK信号通路及磷酸化抑制GSK-3Β 功能第34-36页
    3.CNTF对鱼藤酮处理的SK-N-SH有较弱的保护作用第36-42页
        3.1 CNTF对SK-N-SH细胞的保护作用第36-37页
        3.2 干扰Gαi1或Gαi3的表达对CNTF对SK-N-SH细胞保护作用的影响第37-38页
        3.3 干扰Gαi1和Gαi3表达对鱼藤酮细胞内MAPK及AMPK通路的改变第38-42页
讨论第42-45页
结论第45-46页
参考文献第46-52页
综述第52-63页
    参考文献第56-63页
中英文缩略词表第63-64页
攻读硕士学位期间公开发表的论文第64-65页
致谢第65-67页

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