| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-33页 |
| ·肠出血性大肠杆菌（EHEC）的微生物学特性 | 第12-13页 |
| ·肠出血性大肠杆菌的流行病学 | 第13-14页 |
| ·肠出血性大肠杆菌的致病机理 | 第14-16页 |
| ·志贺样毒素( Stxs) | 第16-19页 |
| ·志贺样毒素分子生物学特性 | 第16页 |
| ·志贺样毒素的致病作用 | 第16-18页 |
| ·志贺样毒素的表达调控 | 第18-19页 |
| ·肠出血性大肠杆菌的LEE 致病岛 | 第19-22页 |
| ·LEE 毒力岛基因 | 第19-20页 |
| ·Ⅲ型分泌系统 | 第20页 |
| ·粘附素(Intimin）及其受体蛋白 | 第20-21页 |
| ·其他分泌效应蛋白 | 第21页 |
| ·LEE 的调控 | 第21-22页 |
| ·肠出血性大肠杆菌潜在毒力因子 | 第22-26页 |
| ·EHEC 0157:H7 的粘附因子 | 第23-25页 |
| ·其他毒素 | 第25页 |
| ·非LEE 编码的效应蛋白 | 第25页 |
| ·其他潜在毒力因子 | 第25-26页 |
| ·肠出血性大肠杆菌的基因组 | 第26-30页 |
| ·EHEC 0157:H7 基因研究 | 第26-29页 |
| ·EHEC 0157:H7 基因敲除研究 | 第29-30页 |
| ·肠出血性大肠杆菌的感染模型 | 第30-31页 |
| ·EHEC 0157:H7 感染的体外模型（In vitro models） | 第30-31页 |
| ·EHEC 0157:H7 感染的动物模型 | 第31页 |
| ·论文研究目标及设计思路 | 第31-33页 |
| 第二章 vt2 基因突变菌株的构建 | 第33-56页 |
| ·材料与方法 | 第33-47页 |
| ·质粒载体、菌株及细胞系 | 第33-36页 |
| ·酶及主要试剂 | 第36页 |
| ·仪器设备 | 第36页 |
| ·引物设计与合成 | 第36-37页 |
| ·PCR 扩增同源臂序列 | 第37-38页 |
| ·vt2 基因敲除盒子质粒pCR2.1-B-Gm-A 构建策略 | 第38-45页 |
| ·EHEC 0157:H7 细胞毒素vt2 基因敲除 | 第45页 |
| ·VT2-phage 缺失菌株的诱导筛选 | 第45-46页 |
| ·突变菌株vt2 基因互补菌株的构建 | 第46-47页 |
| ·Vero 细胞检测菌株产毒素试验 | 第47页 |
| ·结果 | 第47-53页 |
| ·pCR2.1-B-Gm-A 构建过程序列、重组质粒的PCR 鉴定 | 第47-50页 |
| ·Stx2 基因敲除突变子 | 第50-51页 |
| ·VT2-phage 缺失菌株 | 第51-52页 |
| ·Vt2 基因互补菌株鉴定 | 第52页 |
| ·Vero 细胞毒素检测结果 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53-56页 |
| 第三章 肠出血性大肠杆菌细胞模型体外感染研究 | 第56-67页 |
| ·材料与方法 | 第56-58页 |
| ·菌株和细胞系 | 第56页 |
| ·主要试剂 | 第56-57页 |
| ·仪器设备 | 第57页 |
| ·真核细胞系的活化、传代与液氮保存 | 第57-58页 |
| ·细菌与不同细胞系的黏附实验 | 第58页 |
| ·黏附试验的半定量计数 | 第58页 |
| ·结果 | 第58-65页 |
| ·不同EHEC 菌株与IPEC-J2 细胞系的粘附 | 第58-61页 |
| ·不同EHEC 菌株与HEp-2 细胞系的粘附 | 第61-63页 |
| ·不同EHEC 菌株与CaCo-2 细胞系的粘附 | 第63-65页 |
| ·讨论 | 第65-67页 |
| 第四章 VT2 毒素对真核细胞粘附因子的表达影响 | 第67-77页 |
| ·材料与方法 | 第68-71页 |
| ·菌株和细胞系 | 第68-69页 |
| ·主要试剂 | 第69页 |
| ·仪器设备 | 第69页 |
| ·不同EHEC 与IPEC-J2 感染处理 | 第69页 |
| ·IPEC-J2 细胞RNA 的提取 | 第69-70页 |
| ·IPEC-J2 细胞基因反转录PCR | 第70页 |
| ·IPEC-J2 细胞基因实时定量PCR | 第70-71页 |
| ·结果 | 第71-75页 |
| ·检测真核细胞系核仁素、整合素β1 和受体G63 的转录表达 | 第71-73页 |
| ·vt2 基因删除对IPEC-J2 细胞系中nucleolin、β1-integrin 和 G63 合成的影响 | 第73-75页 |
| ·讨论 | 第75-77页 |
| 第五章 结论与创新点 | 第77-80页 |
| ·结论 | 第77-78页 |
| ·创新点 | 第78-80页 |
| 参考文献 | 第80-95页 |
| 附录 | 第95-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
| 作者简介 | 第103页 |
