中文摘要 | 第8-13页 |
英文摘要 | 第13-18页 |
符号说明 | 第19-20页 |
前言 | 第20-24页 |
材料与方法 | 第24-51页 |
材料 | 第24-27页 |
1. 菌株与质粒 | 第24页 |
2. 细胞与细胞培养 | 第24页 |
3. 主要试剂和试剂盒 | 第24-25页 |
4. 主要试剂的配制 | 第25-26页 |
5. 仪器设备 | 第26-27页 |
方法 | 第27-51页 |
1. 细胞培养和转染实验 | 第27-29页 |
2. RNA抽提、反转录和PCR | 第29-32页 |
3. 蛋白质抽提、浓度测量和Western Blot | 第32-35页 |
4. Transwell实验 | 第35-36页 |
5. 细胞划痕实验 | 第36-37页 |
6. 细胞增殖实验 | 第37页 |
7. 细胞集落形成实验 | 第37-38页 |
8. 质粒DNA的制备与鉴定 | 第38-41页 |
9. 构建TAZ 3’UTR的T载体重组质粒 | 第41-46页 |
10. 构建野生型pGL3-promoter-TAZ-3’UTR重组质粒 | 第46-48页 |
11. 构建突变型pGL3-promoter-TAZ-3’UTR重组质粒 | 第48-51页 |
12. 荧光素酶报告基因实验 | 第51页 |
结果 | 第51-71页 |
一. HBV编码蛋白preS2通过抑制miR-338-3p促进TAZ表达 | 第51-64页 |
1. TAZ在多种肝癌细胞系表达 | 第52页 |
2. HBV编码蛋白HBx和preS2在转录后水平上调TAZ表达 | 第52-55页 |
3. preS2通过抑制miR-338-3p促进TAZ表达 | 第55-64页 |
二. TAZ促进肝癌细胞增殖 | 第64-71页 |
1. 筛选获得特异性抑制TAZ表达的siRNA | 第64-65页 |
2. 干扰TAZ表达显著抑制肝癌细胞的生长及集落形成能力 | 第65-66页 |
3. preS2通过TAZ促进肝癌细胞的增殖和转移 | 第66-71页 |
讨论 | 第71-73页 |
参考文献 | 第73-84页 |
综述 | 第84-98页 |
参考文献 | 第90-98页 |
致谢 | 第98-99页 |
英文文章 | 第99-128页 |
附件 | 第128页 |