| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 第1章 引言 | 第10-12页 |
| 第2章 CHAF1B基因对肝癌细胞侵袭、迁移、增殖能力以及细胞周期的影响 | 第12-26页 |
| 2.1 实验材料 | 第12-14页 |
| 2.1.1 实验对象 | 第12页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第12-13页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第13页 |
| 2.1.4 主要溶液配制 | 第13-14页 |
| 2.2 HUH-7 细胞培养 | 第14-15页 |
| 2.2.1 HUH-7 细胞的复苏 | 第14页 |
| 2.2.2 HUH-7 细胞的传代培养 | 第14页 |
| 2.2.3 HUH-7 细胞的冻存 | 第14-15页 |
| 2.3 HUH-7 转染慢病毒 | 第15页 |
| 2.4 QRT-PCR技术检测CHAF1B基因mRNA水平的表达 | 第15-18页 |
| 2.4.1 细胞RNA提取 | 第15页 |
| 2.4.2 逆转录 | 第15-16页 |
| 2.4.3 梯度PCR及电泳 | 第16-17页 |
| 2.4.4 CHAF1B引物的Q-PCR | 第17-18页 |
| 2.5 Transwell体外侵袭实验 | 第18页 |
| 2.6 CHAF1B对HUH-7 细胞迁移能力的影响 | 第18-19页 |
| 2.7 CHAF1B对HUH-7 细胞增殖能力的影响 | 第19页 |
| 2.8 细胞克隆（软琼脂克隆形成实验） | 第19-20页 |
| 2.9 流式细胞术检测CHAF1B对HUH-7 细胞周期的影响 | 第20-21页 |
| 2.10 沉默CHAF1B基因对肿瘤的影响 | 第21-22页 |
| 2.10.1 动物造模实验 | 第21页 |
| 2.10.2 肿瘤HE染色 | 第21-22页 |
| 2.11 实验结果 | 第22-26页 |
| 2.11.1 HUH-7 细胞转染CHAF1B沉默慢病毒 | 第22页 |
| 2.11.2 HUH-7 细胞侵袭结果 | 第22-23页 |
| 2.11.3 HUH-7 细胞迁移和克隆实验结果 | 第23页 |
| 2.11.4 沉默CHAF1B基因对HUH-7 细胞增殖能力影响 | 第23-24页 |
| 2.11.5 流式细胞仪检测细胞周期 | 第24页 |
| 2.11.6 动物造模实验结果 | 第24-26页 |
| 第3章 沉默CHAF1B基因对肝癌细胞中下游基因的影响 | 第26-36页 |
| 3.1 材料与方法 | 第26-27页 |
| 3.1.1 实验对象 | 第26页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第26页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第26-27页 |
| 3.2 实验方法 | 第27-36页 |
| 3.2.1 细胞蛋白质的提取 | 第27页 |
| 3.2.2 蛋白印记以及内参调整 | 第27-28页 |
| 3.2.3 目的蛋白印记 | 第28-30页 |
| 3.2.4 细胞RNA提取 | 第30页 |
| 3.2.5 逆转录 | 第30-31页 |
| 3.2.7 梯度PCR | 第31-32页 |
| 3.2.8 电泳 | 第32-33页 |
| 3.2.9 TMEM259、TWF2、SBNO1、DNAJB1、DDX3X引物的Q-PCR | 第33-34页 |
| 3.2.10 实验结果 | 第34-35页 |
| 3.2.11 统计方法 | 第35-36页 |
| 第4章 讨论 | 第36-39页 |
| 第5章 结论 | 第39-40页 |
| 致谢 | 第40页 |
| 参考文献 | 第40-43页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第43-44页 |
| 综述 | 第44-49页 |
| 参考文献 | 第48-49页 |
