| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第1章 引言 | 第9-22页 |
| ·头孢菌素类抗生素 | 第9-12页 |
| ·概述 | 第9页 |
| ·头孢菌素类的结构 | 第9-10页 |
| ·头孢菌素类抗生素的抗菌机理 | 第10页 |
| ·头孢菌素C的合成途径 | 第10-11页 |
| ·头孢菌素类抗生素的市场现状和发展趋势 | 第11-12页 |
| ·生产菌种顶头孢霉 | 第12-13页 |
| ·概述 | 第12页 |
| ·分子水平育种现状 | 第12-13页 |
| ·氧气对发酵过程的影响 | 第13页 |
| ·透明颤菌血红蛋白 | 第13-19页 |
| ·概述 | 第13-14页 |
| ·透明颤菌血红蛋白(VHb)的结构 | 第14-15页 |
| ·透明颤菌血红蛋白的作用机制与功能 | 第15-16页 |
| ·透明颤菌血红蛋白基因(Vitreoscilla globin gene,vgb)的克隆、表达及调控 | 第16-17页 |
| ·透明颤菌血红蛋白的应用 | 第17-19页 |
| ·丝状真菌转化系统 | 第19-21页 |
| ·常用的转化方法 | 第20-21页 |
| ·丝状真菌转化系统的抗性选择标记 | 第21页 |
| ·本课题的目的和意义 | 第21-22页 |
| 第2章 材料与方法 | 第22-34页 |
| ·试验材料 | 第22-24页 |
| ·菌种与质粒 | 第22页 |
| ·培养基 | 第22页 |
| ·主要用酶 | 第22-23页 |
| ·溶液与试剂 | 第23-24页 |
| ·主要仪器设备 | 第24页 |
| ·试验方法 | 第24-34页 |
| ·顶头孢霉菌株HC-4耐药性试验 | 第24页 |
| ·重组质粒载体pUCATPH-LV的构建 | 第24-28页 |
| ·重组质粒pUCATPH-LV在大肠杆菌中的表达 | 第28-30页 |
| ·顶头孢霉菌株的原生质体转化 | 第30-31页 |
| ·顶头孢霉重组子的诱导表达和检测 | 第31页 |
| ·pCAMBIA1301-LV的构建 | 第31-33页 |
| ·重组质粒pCAMBIA1301-LV转化农杆菌LBA4404 | 第33-34页 |
| 第3章 结果与分析 | 第34-43页 |
| ·抗生素对顶头孢霉菌株的影响测定 | 第34页 |
| ·潮霉素抗性菌株的验证 | 第34-35页 |
| ·pUCATPH-LV的构建 | 第35-38页 |
| ·vgb片段的克隆 | 第35-36页 |
| ·重组质粒pUCATPH-LV筛选及其鉴定 | 第36-37页 |
| ·vgb基因在大肠杆菌中的诱导表达 | 第37-38页 |
| ·pUCATPH-LV转化顶头孢霉原生质体 | 第38-41页 |
| ·顶头孢霉原生质体的制备 | 第38-39页 |
| ·顶头孢霉转化子的筛选 | 第39页 |
| ·顶头孢霉转化子的SDS-PAGE检测VHb蛋白表达 | 第39-40页 |
| ·CO差光谱法分析转化子的VHb表达活性 | 第40-41页 |
| ·pCAMBIA1301-LV的构建 | 第41-43页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定 | 第42页 |
| ·序列的测定与分析 | 第42页 |
| ·重组质粒pCAMBIA1301-LV转化农杆菌LBA4404 | 第42-43页 |
| 第4章 讨论 | 第43-45页 |
| 第5章 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 附录 | 第50-52页 |
| 附录A pUCATPH-LV序列 | 第50页 |
| 附录B pCAMBIA1301-LV序列 | 第50-52页 |
| 硕士期间发表论文 | 第52-53页 |
| 作者简历 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 附录 | 第55-61页 |
