| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 英文缩略词 | 第8-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-16页 |
| 1、支气管哮喘介绍 | 第11页 |
| 2、miRNA介绍 | 第11-12页 |
| 3、SNP的介绍 | 第12-13页 |
| 4、AKT蛋白 | 第13-14页 |
| 5、结论 | 第14-15页 |
| 6、实验流程 | 第15-16页 |
| 第二章 材料与方法 | 第16-29页 |
| 2.1 材料： | 第16-19页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第16-17页 |
| 2.1.2 主要设备 ： | 第17-18页 |
| 2.1.3 主要配置的试剂 | 第18-19页 |
| 2.2 方法 | 第19-29页 |
| 2.2.1 人体DNA抽提 参照TAKARA全血DNA抽提试剂盒说明书 | 第19-20页 |
| 2.2.2 将PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳后纯化回收 | 第20-21页 |
| 2.2.3 将纯化回收的PCR产物经SacⅠ和HindⅢ 双酶切酶切反应 | 第21页 |
| 2.2.4 pMIR-Report质粒与pRL-SV40转化、扩增及冻存 | 第21页 |
| 2.2.5 质粒抽提 | 第21-22页 |
| 2.2.6 将提取的pMIR-Report质粒进行SacⅠ和HindⅢ 双酶切 | 第22-23页 |
| 2.2.7 pMIR-AKT2重组载体构建 | 第23页 |
| 2.2.8 将克隆成功的pMIR-AKT2重组载体PCR、双酶切及测序鉴定 | 第23-24页 |
| 2.2.9 定点突变 | 第24-26页 |
| 2.2.10 细胞复苏、换液、传代及冻存 | 第26-27页 |
| 2.2.11 16HBE、HEK-293T细胞株及A549细胞株转染 | 第27-28页 |
| 2.2.12 双荧光素酶活性检测 | 第28页 |
| 2.2.13 统计学分析 | 第28-29页 |
| 第三章 结果 | 第29-37页 |
| 3.1 miRNA-625与AKT2基因互补配对序列的预测 | 第29页 |
| 3.2 AKT23’-UTR野生型与突变型质粒鉴定 | 第29-34页 |
| 3.3 转染后荧光素酶活性检测 | 第34-37页 |
| 第四章 讨论 | 第37-40页 |
| 第五章 结论与展望 | 第40-41页 |
| 第六章 参考文献 | 第41-46页 |
| 第七章 综述 | 第46-68页 |
| 1.miRNA概述 | 第47-49页 |
| 2.miRNA在支气管哮喘中的研究 | 第49-58页 |
| 3.结论 | 第58页 |
| 4.参考文献 | 第58-68页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
