| 致谢 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-9页 |
| Abstract | 第9页 |
| 第一章 植物抗病性中的蛋白激酶及信号传导途径:文献综述与本研究的背景 | 第19-46页 |
| 1.1 引言 | 第19-20页 |
| 1.2 植物的诱导抗性及其信号传导途径 | 第20-28页 |
| 1.2.1 激活植物SAR的生物因子及化学诱导因子 | 第21-23页 |
| 1.2.2 涉及植物诱导抗性的信号传导途径 | 第23-28页 |
| 1.3 植物抗病性中的MAPK级联信号传递链 | 第28-37页 |
| 1.3.1 植物MAPK蛋白激酶的种类 | 第30-33页 |
| 1.3.2 MAPK传递链在植物逆境反应中的作用 | 第33-34页 |
| 1.3.3 MAPK传递链在植物激素调控中的作用 | 第34-35页 |
| 1.3.4 抗病基因(R基因)介导的MAPK传递链 | 第35-36页 |
| 1.3.5 化学诱导剂激活的MAPK传递链 | 第36页 |
| 1.3.6 生物胁迫因子诱导的MAPK传递链 | 第36-37页 |
| 1.4 植物抗病性中的受体蛋白激酶 | 第37-41页 |
| 1.4.1 植物RLKs的种类和结构 | 第38-39页 |
| 1.4.2 植物抗病基因编码的LRR-RLKs | 第39-40页 |
| 1.4.3 植物体细胞胚胎形成受体激酶(SERK) | 第40-41页 |
| 1.5 本研究的目的意义和主要研究内容 | 第41-46页 |
| 1.5.1 选题依据及研究的目的和意义 | 第41页 |
| 1.5.2 主要研究内容 | 第41-42页 |
| 1.5.3 研究的技术路线 | 第42-46页 |
| 第二章 水稻OsBIMK2基因全长cDNA的克隆与功能鉴定 | 第46-71页 |
| 2.1 引言 | 第46-49页 |
| 2.2 材料与方法 | 第49-54页 |
| 2.2.1 供试水稻、病菌菌株、诱导处理及病菌接种 | 第49-50页 |
| 2.2.2 水稻促分裂原活化蛋白激酶基因OsBIMK2 cDNA的克隆 | 第50-51页 |
| 2.2.2.1 水稻OsBIMK2基因cDNA5’-端缺失序列的PCR扩增 | 第50-51页 |
| 2.2.2.2 水稻OsBIMK2基因cDNA3’-端缺失序列的PCR扩增 | 第51页 |
| 2.2.2.3 水稻OsBIMK2基因全长ORF序列的PCR扩增 | 第51页 |
| 2.2.3 水稻OsBIMK2基因cDNA序列的测序及序列分析 | 第51-52页 |
| 2.2.4 OsBIMK2重组表达载体的构建与重组蛋白的纯化 | 第52-53页 |
| 2.2.5 OsBIMK2重组融合蛋白的自身磷酸化活性测定 | 第53页 |
| 2.2.6 水稻总RNA提取 | 第53页 |
| 2.2.7 RNA的反转录及RT-PCR反应 | 第53-54页 |
| 2.2.8 Northern杂交 | 第54页 |
| 2.3 结果与分析 | 第54-59页 |
| 2.3.1 OsBIMK2是水稻中的一个新的MAPK基因 | 第54-56页 |
| 2.3.2 OsBIMK2重组蛋白在体外能够自我磷酸化 | 第56-57页 |
| 2.3.3 OsBIMK2基因在水稻抗病反应中的差别表达 | 第57-59页 |
| 2.3.3.1 BTH诱导处理能迅速激活OsBIMK2基因的表达 | 第57-58页 |
| 2.3.3.2 稻瘟病菌侵染能迅速激活OsBIMK2基因的表达 | 第58页 |
| 2.3.3.3 OsBIMK2基因在水稻-稻瘟病菌之间非亲和性互作中的差别表达 | 第58-59页 |
| 2.4 讨论 | 第59-71页 |
| 第三章 水稻OsBIMK2基因结构及其启动子的克隆鉴定 | 第71-94页 |
| 3.1 引言 | 第71-73页 |
| 3.2 材料与方法 | 第73-77页 |
| 3.2.1 植物种植与样品采集 | 第73页 |
| 3.2.2 水稻基因组DNA的提取 | 第73-74页 |
| 3.2.3 水稻OsBIMK2基因组及其启动子序列的克隆 | 第74页 |
| 3.2.4 水稻OsBIMK2基因的Southern blot分析 | 第74-75页 |
| 3.2.5 OsBIMK2基因启动子区域5’-端序列的缺失构建 | 第75-76页 |
| 3.2.6 农杆菌介导的烟草瞬间表达分析OsBIMK2基因启动子的活性 | 第76-77页 |
| 3.3 结果与分析 | 第77-80页 |
| 3.3.1 水稻OsBIMK2基因组DNA的克隆鉴定 | 第77页 |
| 3.3.2 水稻OsBIMK2在基因组中以单拷贝形式存在 | 第77页 |
| 3.3.3 水稻OsBIMK2基因组DNA的序列结构 | 第77页 |
| 3.3.4 水稻OsBIMK2基因组内含子的序列特征分析 | 第77-78页 |
| 3.3.5 水稻OsBIMK2基因组内含子的剪切位点分析 | 第78页 |
| 3.3.6 水稻OsBIMK2基因启动子序列的克隆与顺式作用因子分析 | 第78-79页 |
| 3.3.7 烟草瞬间表达系统中OsBIMK2基因启动子的活性分析 | 第79-80页 |
| 3.4 讨论 | 第80-94页 |
| 第四章 OsBIMK2过量表达的转基因烟草能够组成型表达PR基因并提高抗病性 | 第94-116页 |
| 4.1 引言 | 第94-95页 |
| 4.2 材料与方法 | 第95-100页 |
| 4.2.1 培养基 | 第95-96页 |
| 4.2.2 水稻OsBIMK2基因植物转化双元表达载体的构建 | 第96-97页 |
| 4.2.3 烟草叶盘法感染农杆菌与潮霉素抗性植株的培育 | 第97-98页 |
| 4.2.4 转基因烟草植株的扩繁 | 第98页 |
| 4.2.5 烟草中核酸的提取及测定 | 第98页 |
| 4.2.6 转基因烟草植株的鉴定 | 第98-99页 |
| 4.2.6.1 PCR检测 | 第98页 |
| 4.2.6.2 Southern blot检测 | 第98-99页 |
| 4.2.6.3 Northern blot检测 | 第99页 |
| 4.2.7 转OsBIMK2基因烟草植株中PR-1基因的表达分析 | 第99页 |
| 4.2.8 转OsBIMK2基因烟草植株的抗病性测定 | 第99-100页 |
| 4.2.8.1 番茄花叶病毒(ToMV)的接种处理 | 第99-100页 |
| 4.2.8.2 烟草赤星病菌(Alternaria alternata)的接种处理 | 第100页 |
| 4.3 结果与分析 | 第100-103页 |
| 4.3.1 OsBIMK2转基因植物双元表达载体pCAMBIA1381-CaMV35S-OsBIMK2的构建及鉴定 | 第100-101页 |
| 4.3.2 OsBIMK2过量表达的转基因烟草植株的获得与分子鉴定 | 第101-102页 |
| 4.3.3 OsBIMK2过量表达的转基因烟草植株中PR-1基因组成型表达 | 第102页 |
| 4.3.4 OsBIMK2过量表达的转基因烟草植株提高了对不同病原的抗病性 | 第102-103页 |
| 4.3.4.1 转基因烟草植株对番茄花叶病毒(ToMV)的抗性分析 | 第102-103页 |
| 4.3.4.2 转基因烟草植株对烟草赤星病菌(Alternaria alternata)的抗性分析 | 第103页 |
| 4.4 讨论 | 第103-116页 |
| 第五章 水稻OsBISERK1基因的全长cDNA克隆及鉴定及其在水稻抗病性中的表达 | 第116-136页 |
| 5.1 引言 | 第116-117页 |
| 5.2 材料与方法 | 第117-119页 |
| 5.2.1 供试水稻、病菌菌株、诱导处理及病菌接种(见第二章) | 第117页 |
| 5.2.2 水稻OsBISERK1基因cDNA序列的克隆 | 第117-119页 |
| 5.2.2.1 水稻OsBISERK1基因cDNA5’-端缺失序列的PCR扩增 | 第118页 |
| 5.2.2.2 水稻OsBISERK1基因cDNA 3’-端缺失序列的PCR扩增 | 第118页 |
| 5.2.2.3 水稻OsBISERK1基因全长ORF序列的PCR扩增 | 第118-119页 |
| 5.2.3 水稻OsBISERK1基因cDNA序列的测序及序列分析 | 第119页 |
| 5.2.4 水稻基因组DNA的提取 | 第119页 |
| 5.2.5 Southern杂交 | 第119页 |
| 5.2.6 水稻总RNA的提取 | 第119页 |
| 5.2.7 Northern杂交 | 第119页 |
| 5.3 结果与分析 | 第119-123页 |
| 5.3.1 水稻OsBISERK1基因是LRR-RLKs中一个新SERK基因 | 第119-122页 |
| 5.3.2 水稻OsBISERK1在基因组中存在着多拷贝形式 | 第122页 |
| 5.3.3 BTH诱导处理迅速激活水稻OsBISERK1基因的表达 | 第122-123页 |
| 5.3.4 OsBISERK1基因在水稻抗病反应中差别表达 | 第123页 |
| 5.4 讨论 | 第123-136页 |
| 参考文献 | 第136-155页 |
