| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-32页 |
| 1 国内外研究进展 | 第13-30页 |
| 1.1 MHC的发现与命名 | 第13页 |
| 1.2 MHCⅠ和MHCⅡ的结构和功能比较 | 第13-23页 |
| 1.3 鸡MHCⅠ分子研究进展 | 第23-28页 |
| 1.4 禽类T细胞表位疫苗的研究进展 | 第28-30页 |
| 2 研究目的与意义 | 第30页 |
| 3 研究内容与技术路线 | 第30-31页 |
| 4 研究目标 | 第31-32页 |
| 第二章 pBF2~*1201复合物晶体的制备 | 第32-55页 |
| 1 引言 | 第32页 |
| 2 材料 | 第32-41页 |
| 2.1 表达质粒 | 第32页 |
| 2.2 菌株、载体及蛋白 | 第32-34页 |
| 2.3 主要生物化学试剂及耗材 | 第34-35页 |
| 2.4 实验中主要的仪器设备 | 第35页 |
| 2.5 多肽合成与纯化 | 第35-36页 |
| 2.6 常用溶液及其配方 | 第36-41页 |
| 3 方法 | 第41-47页 |
| 3.1 含B12胞外区基因,chβ2m基因原核表达载体构建 | 第41-43页 |
| 3.2 BF2~*1201、Chβ2m蛋白表达及包涵体提取 | 第43-44页 |
| 3.3 BF2~*1201、Chβ2m蛋白与多肽体外共复性及纯化 | 第44-45页 |
| 3.4 pBF2~*1201复合物蛋白的晶体学研究 | 第45-47页 |
| 4 结果 | 第47-53页 |
| 4.1 BF2*1201胞外区及Chβ2m表达载体构建 | 第47页 |
| 4.2 PET21a-BF2~*1201与PET21a-Chβ2m蛋白的小量试表达 | 第47-48页 |
| 4.3 PET21a-BF2~*1201与PET21a-Chβ2m蛋白的大量诱导表达及包涵体纯化 | 第48页 |
| 4.4 BF2~*1201-peptide-Chβ2m体外复性结果 | 第48-51页 |
| 4.5 BF2~*1201-peptide-Chβ2m复合物蛋白晶体的制备及优化 | 第51-53页 |
| 5 讨论 | 第53-54页 |
| 6 小结 | 第54-55页 |
| 第三章 鸡MHCI类分子pBF2~*1201复合物晶体结构研究 | 第55-83页 |
| 1 引言 | 第55页 |
| 2 材料 | 第55-56页 |
| 2.1 主要试剂 | 第55页 |
| 2.2 主要仪器设备 | 第55-56页 |
| 3 方法 | 第56-57页 |
| 3.1 pBF2~*201复合物蛋白晶体X射线衍射与数据收集 | 第56页 |
| 3.2 PBF2~*1201复合物蛋白质结构解析、精修及分析 | 第56-57页 |
| 4 结果 | 第57-80页 |
| 4.1 BF2~*1201-vSRC_(LV8)-Chβ2m及BF2~*1201-A6_(AV9)-Chβ2m复合物蛋白晶体数据收集及结构解析 | 第57-58页 |
| 4.2 pBF2~*1201复合物晶体结构分析 | 第58-80页 |
| 5 讨论 | 第80-82页 |
| 6 小结 | 第82-83页 |
| 第四章 BF2~*1201及人MHCI呈递突变多肽的功能比较研究 | 第83-92页 |
| 1 引言 | 第83页 |
| 2 材料 | 第83-85页 |
| 2.1 载体、菌株及蛋白 | 第83页 |
| 2.2 主要试剂 | 第83页 |
| 2.3 主要仪器设备 | 第83页 |
| 2.4 多肽合成与纯化 | 第83-84页 |
| 2.5 相关常用溶液的配制 | 第84-85页 |
| 3 方法 | 第85-86页 |
| 3.1 HLA-A~*0201及hβ2m蛋白的表达及包涵体提取鉴定 | 第85页 |
| 3.2 BF2~*1201分子与突变多肽的体外共复性及纯化 | 第85页 |
| 3.3 HLA-A2及HLA-A11分子与多肽的体外共复性及纯化 | 第85页 |
| 3.4 复合体蛋白热稳定性分析 | 第85-86页 |
| 4 结果 | 第86-90页 |
| 4.1 HLA-A~*0201及hβ2m蛋白的表达及包涵体纯度鉴定 | 第86页 |
| 4.2 BF2~*1201分子与突变多肽的结合情况分析 | 第86-88页 |
| 4.3 C端延长多肽同MHCI分子的结合情况分析 | 第88-90页 |
| 5 讨论 | 第90-91页 |
| 6 小结 | 第91-92页 |
| 第五章 鸡群中T细胞表位对禽流感Re-6株灭活抗原的免疫辅助功能研究 | 第92-105页 |
| 1 引言 | 第92页 |
| 2 材料 | 第92-93页 |
| 2.1 实验动物 | 第92页 |
| 2.2 抗原及油相 | 第92页 |
| 2.3 候选表位肽 | 第92-93页 |
| 2.4 HA、HI及Elispot相关试剂及Real-time PCR主要试剂和溶液 | 第93页 |
| 2.5 主要仪器设备 | 第93页 |
| 3 方法 | 第93-98页 |
| 3.1 疫苗的配制及免疫方案 | 第93-95页 |
| 3.2 HI实验 | 第95-96页 |
| 3.3 M2e抗体水平检测 | 第96页 |
| 3.4 Elispot检测免疫鸡群血样中细胞因子表达量 | 第96-97页 |
| 3.5 Realtime PCR检测免疫鸡群血样中细胞因子转录水平 | 第97-98页 |
| 4 结果 | 第98-104页 |
| 4.1 血凝抑制试验结果(HI) | 第98-101页 |
| 4.2 免疫鸡群血清M2e抗体水平检测 | 第101-102页 |
| 4.3 免疫鸡群血液中IFN-γ及IL-4表达量检测 | 第102-103页 |
| 4.4 Realtime PCR检测免疫鸡群血样中细胞因子转录水平 | 第103-104页 |
| 5 讨论 | 第104页 |
| 6 小结 | 第104-105页 |
| 第六章 结论与创新点 | 第105-106页 |
| 1 结论 | 第105页 |
| 2 创新点 | 第105-106页 |
| 参考文献 | 第106-115页 |
| 致谢 | 第115-117页 |
| 作者简历 | 第117-119页 |
