| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 绪论 | 第11-15页 |
| 1. 变应性哮喘的危害及尘螨对其的影响 | 第11-12页 |
| 2. 粉尘螨变应原的研究现状 | 第12-15页 |
| 第1章 粉尘螨重组精氨酸激酶的原核表达及纯化 | 第15-24页 |
| 1.1 实验材料与方法 | 第15-21页 |
| 1.1.1 实验主要材料 | 第15页 |
| 1.1.2 实验主要仪器 | 第15-16页 |
| 1.1.3 主要实验耗材及试剂 | 第16页 |
| 1.1.4 主要实验试剂的配制 | 第16-18页 |
| 1.1.5 粉尘螨Der f 20基因的克隆、蛋白表达及纯化 | 第18-21页 |
| 1.2 实验结果 | 第21-23页 |
| 1.2.1 粉尘螨Der f 20基因的扩增 | 第21-22页 |
| 1.2.2 表达载体pET32a-Der f 20的双酶切鉴定 | 第22页 |
| 1.2.3 粉尘螨r-Der f 20的大量表达、纯化 | 第22-23页 |
| 1.3 讨论 | 第23-24页 |
| 第2章 粉尘螨Der f 20的分子生物学与免疫学研究 | 第24-34页 |
| 2.1 实验的材料与方法 | 第24-27页 |
| 2.1.1 实验主要材料 | 第24页 |
| 2.1.2 实验主要仪器 | 第24页 |
| 2.1.3 主要实验耗材及试剂 | 第24-25页 |
| 2.1.4 主要实验试剂的配制 | 第25-26页 |
| 2.1.5 重组蛋白与尘螨过敏阳性血清的酶联吸附实验 | 第26页 |
| 2.1.6 重组蛋白与尘螨过敏阳性血清的免疫印迹反应 | 第26页 |
| 2.1.7 重组蛋白的临床皮肤点刺实验 | 第26页 |
| 2.1.8 重组蛋白与DME、家蚕精氨酸激酶的交叉抑制反应 | 第26-27页 |
| 2.1.9 构建Der f 20与其他螨精氨酸激酶的分子进化树 | 第27页 |
| 2.2 实验结果 | 第27-32页 |
| 2.2.1 R-Der f 20 与尘螨过敏阳性血清能够发生特异性结合 | 第27页 |
| 2.2.2 R-Der f 20 与尘螨过敏阳性血清的免疫印迹反应 | 第27-28页 |
| 2.2.3 临床皮肤点刺实验（Skin prick test） | 第28-29页 |
| 2.2.4 R-Der f 20与家蚕精氨酸激酶的交叉抑制反应 | 第29页 |
| 2.2.5 Der f 20与其物种精氨酸激酶的序列比对 | 第29-31页 |
| 2.2.6 Der f 20与其物种精氨酸激酶的分子进化树 | 第31页 |
| 2.2.7 粉尘螨精氨酸激酶成功命名为Der f 20蛋白 | 第31-32页 |
| 2.3 讨论 | 第32-34页 |
| 第3章 小鼠Der f 20过敏性哮喘模型的建立 | 第34-41页 |
| 3.1 实验的材料与方法 | 第34-36页 |
| 3.1.1 实验主要材料 | 第34页 |
| 3.1.2 实验主要仪器 | 第34页 |
| 3.1.3 主要实验耗材及试剂 | 第34页 |
| 3.1.4 主要实验试剂的配制 | 第34-35页 |
| 3.1.5 R-Der f 20哮喘模型的构建 | 第35-36页 |
| 3.1.6 实验数据的统计学检验 | 第36页 |
| 3.2 实验结果 | 第36-39页 |
| 3.2.1 小白鼠气道高反应性检测 | 第36-37页 |
| 3.2.2 小鼠血清IgG1、IgE的测定 | 第37页 |
| 3.2.3 小白鼠脾细胞培养液上清IL-4 的测定 | 第37-38页 |
| 3.2.4 小鼠肺泡灌洗液（BALF）中嗜酸性粒细胞计数 | 第38-39页 |
| 3.2.5 小鼠肺组织苏木精-伊红染色 | 第39页 |
| 3.3 讨论 | 第39-41页 |
| 第4章 粉尘螨Der f 20致敏机理初步研究 | 第41-45页 |
| 4.1 实验的材料与方法 | 第41-43页 |
| 4.1.1 实验主要材料 | 第41页 |
| 4.1.2 实验主要仪器 | 第41页 |
| 4.1.3 主要实验耗材及试剂 | 第41-42页 |
| 4.1.4 主要实验试剂的配制 | 第42页 |
| 4.1.5 小鼠骨髓来源的原代DCs细胞体外的诱导和分化 | 第42页 |
| 4.1.6 R-Der f 20刺激原代成熟的DCs | 第42页 |
| 4.1.7 免疫印迹检测刺激后的DCs TIM4（T细胞免疫球蛋白及黏蛋白域蛋白 4）的表达情况 | 第42页 |
| 4.1.8 逆转录-PCR法检测刺激后的DCs表达TIM4的情况 | 第42-43页 |
| 4.2 实验结果 | 第43-44页 |
| 4.2.1 过敏原刺激DCs的TIM4表达 | 第43页 |
| 4.2.2 R-Der f 20刺激DCs细胞后，上调TIM4的mRNA | 第43-44页 |
| 4.3 讨论 | 第44-45页 |
| 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 附录 | 第50-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 攻读硕士学位期间研究成果 | 第56页 |
