摘要 | 第8-9页 |
英文摘要 | 第9-10页 |
1 前言 | 第11-21页 |
1.1 大豆蚜与茄无网蚜概述 | 第11-13页 |
1.1.1 大豆蚜与茄无网蚜的分布概况 | 第11-12页 |
1.1.2 大豆蚜与茄无网蚜的生活习性及发生规律 | 第12-13页 |
1.2 大豆蚜与茄无网蚜天敌的种类 | 第13-14页 |
1.3 大豆蚜与茄无网蚜的危害 | 第14页 |
1.4 大豆蚜与茄无网蚜的综合防治 | 第14-17页 |
1.4.1 预报防治 | 第15页 |
1.4.2 生物防治 | 第15-16页 |
1.4.3 化学防治 | 第16-17页 |
1.5 大豆花叶病毒概况 | 第17-19页 |
1.5.1 大豆花叶病毒病史及危害 | 第17页 |
1.5.2 大豆花叶病毒的特性与寄主范围 | 第17页 |
1.5.3 大豆花叶病毒传播方式 | 第17-19页 |
1.6 昆虫传毒相关的受体蛋白 | 第19-20页 |
1.6.1 昆虫的下颚口针蛋白 | 第19页 |
1.6.2 病毒的外壳蛋白 | 第19页 |
1.6.3 病毒的辅助蛋白成分 | 第19页 |
1.6.4 蚜虫内共生菌产生的Gro EL蛋白 | 第19-20页 |
1.7 荧光定量PCR技术在蚜虫传毒中的应用 | 第20页 |
1.8 研究的目的与意义 | 第20-21页 |
2 材料与方法 | 第21-31页 |
2.1 试验材料 | 第21-23页 |
2.1.1 供试昆虫 | 第21页 |
2.1.2 试验仪器 | 第21-22页 |
2.1.3 分子生物学试剂、培养基与试剂盒 | 第22页 |
2.1.4 供试菌株与培养基 | 第22页 |
2.1.5 序列生物信息学分析软件及网址 | 第22-23页 |
2.2 研究方法 | 第23-29页 |
2.2.1 大豆蚜与茄无网蚜内共生菌Gro EL基因的克隆、测序分析 | 第23-27页 |
2.2.2 目的基因SDS-PAGE表达 | 第27-28页 |
2.2.3 目的融合蛋白的纯化 | 第28-29页 |
2.2.4 融合蛋白的western blot检测 | 第29页 |
2.3 大豆蚜与茄无网内共生菌Gro EL基因的差异性表达 | 第29-31页 |
2.3.1 大豆蚜与茄无网总DNA的提取 | 第29页 |
2.3.2 实时荧光定量q PCR引物的设计 | 第29页 |
2.3.3 常规PCR检测引物特异性 | 第29-30页 |
2.3.4 数据分析 | 第30-31页 |
3 结果与分析 | 第31-52页 |
3.1 大豆蚜与茄无网蚜内共生菌Gro EL基因的克隆、原核表达及定量分析 | 第31-44页 |
3.1.1 大豆蚜与茄无网蚜内共生菌Gro EL基因的PCR扩增结果 | 第31-32页 |
3.1.2 大豆蚜与茄无网蚜内共生菌Gro EL基因阳性克隆的分子鉴定 | 第32-37页 |
3.1.3 大豆蚜与茄无网蚜Gro EL基因序列特征及蛋白质特性分析 | 第37-44页 |
3.1.3.3 大豆蚜与茄无网蚜Gro EL氨基酸序列信号肽分析 | 第38-41页 |
3.1.3.6 大豆蚜与茄无网蚜Gro EL氨基酸序列二级结构预测 | 第41-42页 |
3.1.3.7 大豆蚜与茄无网蚜Gro EL基因序列同源性对比与分析 | 第42-44页 |
3.2 大豆蚜与茄无网蚜内共生菌Gro EL在大肠杆菌中的表达 | 第44-49页 |
3.2.1 大肠杆菌株重组表达载体的构建与鉴定 | 第44-45页 |
3.2.2 大豆蚜与茄无网蚜内共生菌Gro EL在大肠杆菌表达载体BL21中的融合表达 | 第45-46页 |
3.2.3 目的融合蛋白的纯化 | 第46-49页 |
3.3 大豆蚜与茄无网蚜内共生菌Gro EL基因荧光定量PCR引物的设计、筛选和优化条件 | 第49-52页 |
3.3.1 传统PCR特异性引物筛选 | 第49页 |
3.3.2 大豆蚜与茄无网蚜内共生菌Gro EL基因特异性定量引物扩增条件的优化 | 第49页 |
3.3.3 大豆蚜与茄无网蚜内共生菌Gro EL基因荧光定量分析 | 第49-52页 |
4 讨论 | 第52-54页 |
4.1 大豆蚜与茄无网蚜内共生菌Gro EL基因的克隆、序列分析和表达 | 第52页 |
4.2 大豆蚜与茄无网蚜内共生菌传毒相关蛋白Gro EL基因的体外表达 | 第52-53页 |
4.3 大豆蚜与茄无网蚜内共生菌传毒相关蛋白Gro EL基因的荧光定量分析 | 第53-54页 |
5 结论 | 第54-55页 |
5.1 本研究主要结论 | 第54-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-62页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第62页 |