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大豆蚜与茄无网蚜内共生菌GroEL基因克隆及表达分析

摘要第8-9页
英文摘要第9-10页
1 前言第11-21页
    1.1 大豆蚜与茄无网蚜概述第11-13页
        1.1.1 大豆蚜与茄无网蚜的分布概况第11-12页
        1.1.2 大豆蚜与茄无网蚜的生活习性及发生规律第12-13页
    1.2 大豆蚜与茄无网蚜天敌的种类第13-14页
    1.3 大豆蚜与茄无网蚜的危害第14页
    1.4 大豆蚜与茄无网蚜的综合防治第14-17页
        1.4.1 预报防治第15页
        1.4.2 生物防治第15-16页
        1.4.3 化学防治第16-17页
    1.5 大豆花叶病毒概况第17-19页
        1.5.1 大豆花叶病毒病史及危害第17页
        1.5.2 大豆花叶病毒的特性与寄主范围第17页
        1.5.3 大豆花叶病毒传播方式第17-19页
    1.6 昆虫传毒相关的受体蛋白第19-20页
        1.6.1 昆虫的下颚口针蛋白第19页
        1.6.2 病毒的外壳蛋白第19页
        1.6.3 病毒的辅助蛋白成分第19页
        1.6.4 蚜虫内共生菌产生的Gro EL蛋白第19-20页
    1.7 荧光定量PCR技术在蚜虫传毒中的应用第20页
    1.8 研究的目的与意义第20-21页
2 材料与方法第21-31页
    2.1 试验材料第21-23页
        2.1.1 供试昆虫第21页
        2.1.2 试验仪器第21-22页
        2.1.3 分子生物学试剂、培养基与试剂盒第22页
        2.1.4 供试菌株与培养基第22页
        2.1.5 序列生物信息学分析软件及网址第22-23页
    2.2 研究方法第23-29页
        2.2.1 大豆蚜与茄无网蚜内共生菌Gro EL基因的克隆、测序分析第23-27页
        2.2.2 目的基因SDS-PAGE表达第27-28页
        2.2.3 目的融合蛋白的纯化第28-29页
        2.2.4 融合蛋白的western blot检测第29页
    2.3 大豆蚜与茄无网内共生菌Gro EL基因的差异性表达第29-31页
        2.3.1 大豆蚜与茄无网总DNA的提取第29页
        2.3.2 实时荧光定量q PCR引物的设计第29页
        2.3.3 常规PCR检测引物特异性第29-30页
        2.3.4 数据分析第30-31页
3 结果与分析第31-52页
    3.1 大豆蚜与茄无网蚜内共生菌Gro EL基因的克隆、原核表达及定量分析第31-44页
        3.1.1 大豆蚜与茄无网蚜内共生菌Gro EL基因的PCR扩增结果第31-32页
        3.1.2 大豆蚜与茄无网蚜内共生菌Gro EL基因阳性克隆的分子鉴定第32-37页
        3.1.3 大豆蚜与茄无网蚜Gro EL基因序列特征及蛋白质特性分析第37-44页
            3.1.3.3 大豆蚜与茄无网蚜Gro EL氨基酸序列信号肽分析第38-41页
            3.1.3.6 大豆蚜与茄无网蚜Gro EL氨基酸序列二级结构预测第41-42页
            3.1.3.7 大豆蚜与茄无网蚜Gro EL基因序列同源性对比与分析第42-44页
    3.2 大豆蚜与茄无网蚜内共生菌Gro EL在大肠杆菌中的表达第44-49页
        3.2.1 大肠杆菌株重组表达载体的构建与鉴定第44-45页
        3.2.2 大豆蚜与茄无网蚜内共生菌Gro EL在大肠杆菌表达载体BL21中的融合表达第45-46页
        3.2.3 目的融合蛋白的纯化第46-49页
    3.3 大豆蚜与茄无网蚜内共生菌Gro EL基因荧光定量PCR引物的设计、筛选和优化条件第49-52页
        3.3.1 传统PCR特异性引物筛选第49页
        3.3.2 大豆蚜与茄无网蚜内共生菌Gro EL基因特异性定量引物扩增条件的优化第49页
        3.3.3 大豆蚜与茄无网蚜内共生菌Gro EL基因荧光定量分析第49-52页
4 讨论第52-54页
    4.1 大豆蚜与茄无网蚜内共生菌Gro EL基因的克隆、序列分析和表达第52页
    4.2 大豆蚜与茄无网蚜内共生菌传毒相关蛋白Gro EL基因的体外表达第52-53页
    4.3 大豆蚜与茄无网蚜内共生菌传毒相关蛋白Gro EL基因的荧光定量分析第53-54页
5 结论第54-55页
    5.1 本研究主要结论第54-55页
致谢第55-56页
参考文献第56-62页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第62页

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