| 符号说明 | 第4-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-26页 |
| 1.1 授粉识别 | 第12-16页 |
| 1.1.1 花粉粘附和水合过程中花粉粒与柱头乳突细胞间的相互作用 | 第13-14页 |
| 1.1.2 花粉管生长时和雌蕊的相互作用 | 第14-15页 |
| 1.1.3 花粉管导向胚珠 | 第15-16页 |
| 1.2 含有CBS结构域蛋白的相关研究 | 第16-17页 |
| 1.3 Trx的相关研究 | 第17-21页 |
| 1.3.1 Trx的结构 | 第18页 |
| 1.3.2 Trx的分类和分布 | 第18-19页 |
| 1.3.3 Trx的生物学活性 | 第19-20页 |
| 1.3.4 NRX相关研究 | 第20-21页 |
| 1.3.5 拟南芥中含CBS结构域的蛋白与Trx的关系 | 第21页 |
| 1.4 ROS在植物生长发育中的作用 | 第21-25页 |
| 1.4.1 植物体内ROS的产生机制 | 第22-23页 |
| 1.4.2 植物体内ROS的清除机制 | 第23-24页 |
| 1.4.3 ROS的双重调控作用 | 第24页 |
| 1.4.4 Trx与ROS的关系 | 第24-25页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第25-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-44页 |
| 2.1 实验材料 | 第26-27页 |
| 2.1.1 植物材料和生长条件 | 第26页 |
| 2.1.2 菌株和载体 | 第26页 |
| 2.1.3 引物和序列 | 第26-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-44页 |
| 2.2.1 表达载体的构建 | 第27-33页 |
| 2.2.1.1 PCR引物设计 | 第27-28页 |
| 2.2.1.2 PCR克隆目的片段 | 第28页 |
| 2.2.1.3 PCR产物的回收 | 第28页 |
| 2.2.1.4 连接克隆载体 | 第28-29页 |
| 2.2.1.5 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第29-30页 |
| 2.2.1.6 连接产物转化大肠杆菌 | 第30页 |
| 2.2.1.7 大肠杆菌和农杆菌的菌落PCR鉴定 | 第30-31页 |
| 2.2.1.8 质粒DNA的提取 | 第31页 |
| 2.2.1.9 连接目的片段的克隆载体和表达载体的酶切回收 | 第31-32页 |
| 2.2.1.10 目的片段与表达载体的连接 | 第32-33页 |
| 2.2.1.11 表达载体的酶切验证 | 第33页 |
| 2.2.2 拟南芥的种子处理和栽培 | 第33-35页 |
| 2.2.2.1 拟南芥种子处理 | 第33页 |
| 2.2.2.2 拟南芥的栽培 | 第33-34页 |
| 2.2.2.3 拟南芥基因组DNA的提取 | 第34页 |
| 2.2.2.4 拟南芥基因组的鉴定 | 第34-35页 |
| 2.2.3 拟南芥的遗传转化（农杆菌浸染） | 第35-36页 |
| 2.2.3.1 根癌农杆菌GV3101感受态细胞的制备 | 第35-36页 |
| 2.2.3.2 根癌农杆菌GV3101感受态细胞的转化 | 第36页 |
| 2.2.3.3 农杆菌介导的拟南芥转化 | 第36页 |
| 2.2.4 GUS染色观察NRX1组织定位 | 第36-37页 |
| 2.2.5 扫描电子显微镜观察 | 第37-38页 |
| 2.2.6 激光共聚焦（Confocal）显微镜观察 | 第38页 |
| 2.2.7 拟南芥花粉的亚历山大染色分析 | 第38-39页 |
| 2.2.8 拟南芥花粉冲洗实验 | 第39页 |
| 2.2.9 拟南芥花粉体外萌发 | 第39页 |
| 2.2.10 拟南芥花粉管的苯胺蓝染色 | 第39-40页 |
| 2.2.11 ROS染色 | 第40-41页 |
| 2.2.11.1 拟南芥幼苗的DAB染色 | 第40页 |
| 2.2.11.2 拟南芥幼苗的NBT染色 | 第40-41页 |
| 2.2.11.3 ROS染色的定量统计分析（Image J） | 第41页 |
| 2.2.12 酵母双杂交 | 第41-42页 |
| 2.2.12.1 酵母感受态的制备 | 第41-42页 |
| 2.2.12.2 酵母转化 | 第42页 |
| 2.2.13 烟草瞬时转化 | 第42-43页 |
| 2.2.14 拟南芥蛋白的提取 | 第43-44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-57页 |
| 3.1 NRX1与KINβγ 相互作用 | 第44-47页 |
| 3.1.1 KINβγ 蛋白分析 | 第44页 |
| 3.1.2 NRX2与KINβγ 存在相互作用 | 第44-45页 |
| 3.1.3 NRX1与KINβγ 存在相互作用 | 第45-46页 |
| 3.1.4 KINβγ 正调控Trx的活性 | 第46-47页 |
| 3.2 nrx1的表型分析 | 第47-53页 |
| 3.2.1 nrx1突变体的分离 | 第47-49页 |
| 3.2.2 nrx1杂合体自交后代分离比异常 | 第49页 |
| 3.2.3 nrx1突变体显示出雄配子体传递效率降低 | 第49页 |
| 3.2.4 nrx1突变体花粉形态和活力没有明显异常 | 第49-50页 |
| 3.2.5 nrx1突变体花粉体外萌发没有明显异常 | 第50-51页 |
| 3.2.6 nrx1突变体花粉粘附没有明显异常 | 第51-52页 |
| 3.2.7 nrx1突变体花粉在柱头表面的萌发率显著降低 | 第52-53页 |
| 3.3 NRX1的组织表达分析 | 第53-54页 |
| 3.4 nrx1幼苗的ROS水平分析 | 第54-57页 |
| 3.4.1 nrx1幼苗过氧化氢水平显著升高 | 第54-55页 |
| 3.4.2 nrx1幼苗超氧化物水平显著升高 | 第55-57页 |
| 4 讨论 | 第57-59页 |
| 5 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
