| 符号说明 | 第4-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-18页 |
| 1.1 产气荚膜梭菌简介 | 第12-13页 |
| 1.2 产气荚膜梭菌病流行状况及影响 | 第13-15页 |
| 1.3 产气荚膜梭菌病致病机理及防制 | 第15-16页 |
| 1.4 研究目的及意义 | 第16-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-31页 |
| 2.1 材料 | 第18-21页 |
| 2.1.1 实验动物、菌株及细胞 | 第18页 |
| 2.1.2 主要的试剂及溶液的配制 | 第18-20页 |
| 2.1.3 主要试验仪器 | 第20-21页 |
| 2.2 α毒素的制备及纯化 | 第21-22页 |
| 2.2.1 α毒素的制备 | 第21页 |
| 2.2.2 α毒素的纯化 | 第21-22页 |
| 2.2.2.1 A型产气荚膜梭菌外毒素的粗提 | 第21页 |
| 2.2.2.2 A型产气荚膜梭菌外毒素的精提 | 第21-22页 |
| 2.2.2.3 采用SephadexG-200 分离蛋白 | 第22页 |
| 2.3 SDS-PAGE（聚丙烯酰胺凝胶电泳）操作步骤如下： | 第22-24页 |
| 2.4 多克隆抗体的制备和纯化 | 第24-25页 |
| 2.4.1 多克隆抗体的制备 | 第24页 |
| 2.4.2 多克隆抗体的收集及纯化 | 第24-25页 |
| 2.5 间接ELISA方法检测血清抗体效价的操作步骤如下： | 第25-26页 |
| 2.6 杂交瘤细胞复苏,腹水的制备,纯化及检测 | 第26-28页 |
| 2.6.1 杂交瘤细胞F12复苏 | 第26页 |
| 2.6.2 BALB/c小鼠单克隆抗体腹水的制备 | 第26页 |
| 2.6.3 单克隆抗体腹水的纯化 | 第26-27页 |
| 2.6.4 单克隆抗体Western Blot方法的测定 | 第27-28页 |
| 2.7 捕获ELISA方法的建立 | 第28-30页 |
| 2.7.1 包被抗体及捕获抗原最佳浓度的确定 | 第28-29页 |
| 2.7.2 最佳包被液及其最佳包被时间的确定 | 第29页 |
| 2.7.3 最佳封闭条件及其时间的确定 | 第29页 |
| 2.7.4 捕获抗原最佳孵育时间的确定 | 第29页 |
| 2.7.5 被检血清最佳稀释度的确定及其最佳孵育时间的确定 | 第29页 |
| 2.7.6 酶标二抗最佳稀释倍数及其孵育时间的确定 | 第29-30页 |
| 2.7.7 最佳显色时间的确定 | 第30页 |
| 2.7.8 捕获ELISA方法步骤 | 第30页 |
| 2.8 ELISA阴阳性临界值判定标准的确定 | 第30页 |
| 2.9 捕获ELISA方法性能评价 | 第30-31页 |
| 2.9.1 特异性实验 | 第30-31页 |
| 2.9.2 敏感性实验 | 第31页 |
| 2.9.3 重复性实验 | 第31页 |
| 2.10 临床应用 | 第31页 |
| 3 结果和分析 | 第31-42页 |
| 3.1 α毒素的制备过程 | 第31-32页 |
| 3.2 α毒素的纯化 | 第32-33页 |
| 3.3 多克隆抗体的效价 | 第33页 |
| 3.4 杂交瘤细胞的复苏以及单克隆抗体的纯化和Western Blot结果 | 第33-35页 |
| 3.4.1 杂交瘤细胞的复苏结果 | 第33页 |
| 3.4.2 单克隆抗体的纯化结果 | 第33-34页 |
| 3.4.3 单克隆抗体的Western Blot结果 | 第34-35页 |
| 3.5 捕获ELISA方法的建立结果 | 第35-39页 |
| 3.5.1 包被抗体及捕获抗原最佳浓度的确定 | 第35-36页 |
| 3.5.2 最佳包被液及其最佳包被时间的确定 | 第36页 |
| 3.5.3 最佳封闭条件及其时间的确定 | 第36-37页 |
| 3.5.4 捕获抗原最佳孵育时间的确定 | 第37页 |
| 3.5.5 被检血清最佳稀释度的确定及其最佳孵育时间的确定 | 第37-38页 |
| 3.5.6 酶标二抗最佳稀释倍数及其孵育时间的确定 | 第38-39页 |
| 3.5.7 最佳显色时间的确定 | 第39页 |
| 3.6 临界值的确定 | 第39-40页 |
| 3.7 性能评价 | 第40-41页 |
| 3.7.1 特异性实验 | 第40页 |
| 3.7.2 敏感性实验 | 第40-41页 |
| 3.7.3 重复性实验 | 第41页 |
| 3.8 临床应用 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-43页 |
| 4.1 抗α毒素多克隆抗体的制备 | 第42页 |
| 4.2 抗α毒素单克隆抗体的复苏及注意问题 | 第42-43页 |
| 4.3 捕获ELISA方法的优势 | 第43页 |
| 5 结论 | 第43-45页 |
| 参考文献 | 第45-50页 |
| 致谢 | 第50页 |
