| 摘要 | 第6-8页 |
| abstract | 第8-9页 |
| 英文缩略表 | 第16-17页 |
| 第一章 引言 | 第17-26页 |
| 1.1 鸭疫里默氏杆菌的研究进展 | 第17-20页 |
| 1.1.1 鸭疫里默氏杆菌生物学特性 | 第17页 |
| 1.1.2 鸭疫里默氏杆菌流行病学 | 第17-18页 |
| 1.1.3 鸭疫里默氏杆菌毒力因子 | 第18-19页 |
| 1.1.4 疫苗的开发 | 第19-20页 |
| 1.2 革兰氏阴性菌LPS的研究进展 | 第20-25页 |
| 1.2.1 类脂A | 第21-22页 |
| 1.2.2 核心多糖 | 第22页 |
| 1.2.3 O-抗原 | 第22-23页 |
| 1.2.4 LPS的转运机制 | 第23页 |
| 1.2.5 LPS致病机制 | 第23-24页 |
| 1.2.6 LPS的提取及鉴定方法 | 第24-25页 |
| 1.3 RA LPS研究现状和展望 | 第25-26页 |
| 第二章 鸭疫里默氏杆菌脂多糖突变株RA1067的鉴定及生物学特性分析 | 第26-46页 |
| 2.1 材料 | 第26-28页 |
| 2.1.1 菌株、实验动物及细胞系 | 第26页 |
| 2.1.2 主要仪器设备及试剂 | 第26页 |
| 2.1.3 培养基与缓冲液配制 | 第26-27页 |
| 2.1.4 抗生素的使用浓度 | 第27页 |
| 2.1.5 引物设计 | 第27-28页 |
| 2.2 方法 | 第28-36页 |
| 2.2.1 间接ELISA法筛选LPS突变株 | 第28页 |
| 2.2.2 转座子插入位点鉴定 | 第28-31页 |
| 2.2.3 鉴定Tn4351转座子插入基因 | 第31页 |
| 2.2.4 qRT-PCR检测转座子插入基因及其上下游基因转录水平 | 第31-32页 |
| 2.2.5 生长曲线的测定 | 第32-33页 |
| 2.2.6 LPS的提取、银染和western-blot | 第33页 |
| 2.2.7 细菌毒力和血液载菌量的测定 | 第33-34页 |
| 2.2.8 测定鸭疫里默氏杆菌CH3、RA1067对血清的抵抗力 | 第34页 |
| 2.2.9 细菌黏附及入侵能力的测定 | 第34-35页 |
| 2.2.10 灭活油乳剂疫苗的交叉保护试验 | 第35页 |
| 2.2.11 RNA转录组高通量测序和差异表达基因的验证分析 | 第35-36页 |
| 2.2.12 统计学分析 | 第36页 |
| 2.3 结果 | 第36-43页 |
| 2.3.1 间接ELISA筛选LPS突变株结果 | 第36页 |
| 2.3.2 Southern鉴定突变株RA1067转座子插入次数 | 第36-37页 |
| 2.3.3 反向PCR鉴定失活基因 | 第37-38页 |
| 2.3.4 qRT-PCR检测转座子插入基因及其上下游基因的转录水平 | 第38页 |
| 2.3.5 突变株的生长曲线 | 第38-39页 |
| 2.3.6 突变株LPS的表型和抗原差异 | 第39页 |
| 2.3.7 突变株毒力测定 | 第39-40页 |
| 2.3.8 血清杀菌实验结果 | 第40-41页 |
| 2.3.9 细菌黏附入侵实验 | 第41页 |
| 2.3.10 交叉免疫保护实验结果 | 第41-42页 |
| 2.3.11 转录组测序结果 | 第42-43页 |
| 2.4 讨论 | 第43-46页 |
| 2.4.1 RA1067的生物学特性研究 | 第43-44页 |
| 2.4.2 交叉免疫保护效果的评价 | 第44页 |
| 2.4.3 转录组数据结果分析 | 第44-46页 |
| 第三章 鸭疫里默氏杆菌脂多糖突变株RA1062的鉴定及生物学分析 | 第46-59页 |
| 3.1 材料 | 第46-48页 |
| 3.1.1 菌株、实验动物及细胞系 | 第46页 |
| 3.1.2 主要仪器设备及试剂 | 第46页 |
| 3.1.3 培养基与缓冲液配制 | 第46-47页 |
| 3.1.4 抗生素及使用浓度 | 第47-48页 |
| 3.2 方法 | 第48-51页 |
| 3.2.1 突变株RA1062的转座子插入次数鉴定 | 第48页 |
| 3.2.2 失活基因的确定 | 第48页 |
| 3.2.3 细菌RNA的提取和qRT-PCR检测突变基因及其上下游基因的转录水平 | 第48-49页 |
| 3.2.4 细菌表型的鉴定 | 第49页 |
| 3.2.5 Western-blot对CH3和RA1062 LPS的比较鉴定 | 第49页 |
| 3.2.6 生长曲线的测定 | 第49页 |
| 3.2.7 黏附入侵试验 | 第49-50页 |
| 3.2.8 血清杀菌试验 | 第50页 |
| 3.2.9 LD50的测定和菌血计数试验 | 第50页 |
| 3.2.10 交叉免疫保护试验 | 第50页 |
| 3.2.11 RNA转录组高通量测序和差异表达基因的验证分析 | 第50-51页 |
| 3.3 结果 | 第51-57页 |
| 3.3.1 Southern-blot检测结果 | 第51页 |
| 3.3.2 失活基因的鉴定 | 第51页 |
| 3.3.3 qRT-PCR检测结果 | 第51-52页 |
| 3.3.4 细菌形态的鉴定 | 第52页 |
| 3.3.5 Western-blot结果 | 第52-53页 |
| 3.3.6 细菌生长曲线测定的结果 | 第53页 |
| 3.3.7 黏附入侵试验 | 第53-54页 |
| 3.3.8 血清杀菌试验 | 第54页 |
| 3.3.9 突变株对樱桃谷鸭的致病力分析 | 第54-55页 |
| 3.3.10 交叉免疫保护试验的评价 | 第55-56页 |
| 3.3.11 转录组测序及qRT-PCR验证结果结果 | 第56-57页 |
| 3.4.讨论 | 第57-59页 |
| 3.4.1 突变株RA1062的鉴定及其生物学特性分析 | 第57-58页 |
| 3.4.2 RA1062灭活疫苗的交叉免疫保护效果的评价 | 第58页 |
| 3.4.3 转录组数据结果分析 | 第58-59页 |
| 第四章 全文总结 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 作者简历 | 第67页 |
