中文摘要 | 第3-5页 |
英文摘要 | 第5-6页 |
英文缩写及中文对照表 | 第10-11页 |
1 绪论 | 第11-16页 |
1.1 研究背景 | 第11-14页 |
1.1.1 微重力效应下的骨质丢失 | 第11页 |
1.1.2 骨髓间充质干细胞 | 第11-12页 |
1.1.3 Hippo-TAZ信号通路 | 第12-14页 |
1.2 研究目的、意义及主要内容 | 第14-16页 |
1.2.1 研究目的和意义 | 第14-15页 |
1.2.2 主要研究内容 | 第15-16页 |
2 微重力效应模拟装置 | 第16-19页 |
2.1 引言 | 第16页 |
2.2 微重力效应模拟装置 | 第16-18页 |
2.3 讨论 | 第18页 |
2.4 本章小结 | 第18-19页 |
3 SMG对BMSCs成骨分化及TAZ表达的影响 | 第19-36页 |
3.1 引言 | 第19-20页 |
3.2 实验材料 | 第20-22页 |
3.2.1 实验动物 | 第20页 |
3.2.2 实验仪器 | 第20页 |
3.2.3 主要试剂及溶液配制 | 第20-22页 |
3.3 实验方法 | 第22-29页 |
3.3.1 全骨髓贴壁法分离培养BMSCs | 第22-23页 |
3.3.2 流式细胞仪检测细胞表面抗原 | 第23页 |
3.3.3 BMSCs向成骨细胞的诱导分化 | 第23页 |
3.3.4 SMG效应下BMSCs的培养 | 第23页 |
3.3.5 RT-PCR检测mRNA表达变化 | 第23-25页 |
3.3.6 Real-time PCR检测mRNA表达变化 | 第25-26页 |
3.3.7 碱性磷酸酶酶活检测 | 第26-27页 |
3.3.8 茜素红染色 | 第27页 |
3.3.9 Western blot检测蛋白表达变化 | 第27-29页 |
3.3.10 siRNA沉默靶基因 | 第29页 |
3.3.11 统计分析 | 第29页 |
3.4 实验结果 | 第29-34页 |
3.4.1 BMSCs鉴定结果 | 第29-30页 |
3.4.2 BMSCs成骨分化诱导 | 第30页 |
3.4.3 SMG抑制BMSCs成骨分化 | 第30-31页 |
3.4.4 SMG抑制TAZ的表达 | 第31-32页 |
3.4.5 SMG效应下LPA通过上调TAZ促进BMSCs成骨分化 | 第32-33页 |
3.4.6 SMG效应下LPA通过Rho-Rock通路上调TAZ的表达 | 第33-34页 |
3.5 讨论 | 第34-35页 |
3.6 本章小结 | 第35-36页 |
4 SMG效应下F-actin调控BMSCs成骨分化的机理 | 第36-52页 |
4.1 引言 | 第36-37页 |
4.2 实验材料 | 第37-39页 |
4.2.1 实验动物 | 第37页 |
4.2.2 实验仪器 | 第37页 |
4.2.3 主要试剂及溶液配制 | 第37-39页 |
4.3 实验方法 | 第39-41页 |
4.3.1 MTT检测细胞活性 | 第39页 |
4.3.2 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第39页 |
4.3.3 Real-time PCR检测mRNA表达变化 | 第39页 |
4.3.4 碱性磷酸酶酶活检测 | 第39页 |
4.3.5 茜素红染色 | 第39页 |
4.3.6 核蛋白的提取 | 第39-40页 |
4.3.7 Western blot检测蛋白表达变化 | 第40页 |
4.3.8 siRNA沉默靶基因 | 第40页 |
4.3.9 F-actin荧光染色及分维形数分析 | 第40-41页 |
4.3.10 统计分析 | 第41页 |
4.4 实验结果 | 第41-49页 |
4.4.1 F-actin的解聚通过阻碍TAZ核内定位抑制BMSCs成骨分化 | 第41-44页 |
4.4.2 SMG加速F-actin解聚及抑制TAZ核内定位 | 第44-45页 |
4.4.3 SMG下Jasp通过F-actin-TAZ通路维持BMSCs成骨分化 | 第45-46页 |
4.4.4 SMG下LPA通过F-actin-TAZ通路维持BMSCs成骨分化 | 第46-49页 |
4.5 讨论 | 第49-51页 |
4.6 本章小结 | 第51-52页 |
5 结论与展望 | 第52-53页 |
5.1 主要结论 | 第52页 |
5.2 论文的不足之处及后续工作的展望 | 第52-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-61页 |
附录 | 第61页 |
A 作者在攻读硕士学位期间发表的论文目录 | 第61页 |
B 作者在攻读硕士学位期间参加的学术会议 | 第61页 |