摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
主要缩略语及符号 | 第9-18页 |
第1章 绪论 | 第18-35页 |
1.1 研究背景 | 第18-19页 |
1.2 生物表面活性剂 | 第19-24页 |
1.2.1 生物表面活性剂概述 | 第19页 |
1.2.2 生物表面活性剂的应用 | 第19-21页 |
1.2.3 生物表面活性剂与微生物采油技术 | 第21-23页 |
1.2.4 厌氧产表面活性剂的微生物 | 第23-24页 |
1.2.5 油藏原位产表面活性剂研究进展 | 第24页 |
1.3 鼠李糖脂及其生物合成研究综述 | 第24-29页 |
1.3.1 鼠李糖脂的结构组成 | 第25页 |
1.3.2 鼠李糖脂的生物合成代谢途径 | 第25-26页 |
1.3.3 鼠李糖脂合成相关基因及调控模型 | 第26-28页 |
1.3.4 鼠李糖脂生物合成的影响因素 | 第28-29页 |
1.4 分子生物学在微生物采油中的应用 | 第29-32页 |
1.4.1 油藏微生物群落结构解析方法 | 第29-31页 |
1.4.2 定量PCR技术监测油藏特定功能菌群 | 第31页 |
1.4.3 分子生物学技术改造驱油功能菌种 | 第31-32页 |
1.5 研究目的与意义及主要研究内容 | 第32-35页 |
1.5.1 课题来源 | 第32-33页 |
1.5.2 研究目的和意义 | 第33页 |
1.5.3 主要研究内容 | 第33-34页 |
1.5.4 研究技术路线 | 第34-35页 |
第2章 实验材料与方法 | 第35-54页 |
2.1 实验材料 | 第35-38页 |
2.1.1 油藏水样 | 第35页 |
2.1.2 化学试剂 | 第35-36页 |
2.1.3 培养基 | 第36页 |
2.1.4 菌株与质粒以及PCR引物 | 第36-38页 |
2.1.5 实验仪器 | 第38页 |
2.2 实验方法 | 第38-54页 |
2.2.1 高通量测序方法 | 第38-40页 |
2.2.2 厌氧培养基制备方法 | 第40页 |
2.2.3 表面张力与排油圈直径测定方法 | 第40-41页 |
2.2.4 菌种筛选与鉴定方法 | 第41-43页 |
2.2.5 表面活性产物分析方法 | 第43-45页 |
2.2.6 厌氧产鼠李糖脂菌株SG的基因改造 | 第45-49页 |
2.2.7 实时定量PCR方法 | 第49-51页 |
2.2.8 物理模拟驱油潜力评价方法 | 第51-54页 |
第3章 油藏厌氧产鼠李糖脂菌株的筛选及生长代谢特性研究 | 第54-71页 |
3.1 引言 | 第54页 |
3.2 目标油藏的微生物群落结构解析 | 第54-59页 |
3.2.1 菌群多样性分析 | 第55-57页 |
3.2.2 采出井样品中细菌门水平菌群分析 | 第57页 |
3.2.3 采出井样品中细菌属水平菌群分析 | 第57-58页 |
3.2.4 表面活性剂产生菌多样性分析 | 第58-59页 |
3.3 菌种筛选与鉴定 | 第59-62页 |
3.3.1 菌种筛选 | 第59-60页 |
3.3.2 菌株的形态学描述与16S rDNA序列分析 | 第60-62页 |
3.4 厌氧表面活性产物的初步定性分析 | 第62-63页 |
3.4.1 薄层色谱分析 | 第62页 |
3.4.2 傅里叶变换红外光谱分析 | 第62-63页 |
3.5 鼠李糖脂快速定量方法的建立 | 第63-67页 |
3.5.1 常规鼠李糖脂定量方法的比较 | 第63-64页 |
3.5.2 排油圈法定量鼠李糖脂的方法建立 | 第64-65页 |
3.5.3 排油圈法定量鼠李糖脂的影响因素 | 第65-67页 |
3.6 菌株SG的鼠李糖脂厌氧合成规律 | 第67-68页 |
3.7 菌株SG厌氧产鼠李糖脂的环境适应性 | 第68-70页 |
3.8 本章小结 | 第70-71页 |
第4章 菌株SG厌氧产鼠李糖脂的培养基配方优化及其rhlAB基因改造 | 第71-89页 |
4.1 引言 | 第71-72页 |
4.2 厌氧产鼠李糖脂的碳氮磷营养物质 | 第72-76页 |
4.2.1 碳源筛选 | 第72-73页 |
4.2.2 氮源筛选 | 第73-74页 |
4.2.3 碳氮磷营养物质的用量 | 第74-76页 |
4.3 响应面法培养基优化 | 第76-81页 |
4.3.1 厌氧产鼠李糖脂的显著影响因子 | 第76-77页 |
4.3.2 爬坡实验 | 第77-78页 |
4.3.3 中心组合实验设计 | 第78-79页 |
4.3.4 优化后的培养基配方 | 第79-81页 |
4.4 菌株SG的rhlAB基因改造研究 | 第81-84页 |
4.4.1 构建rhlAB基因拷贝数增加的工程菌PrhlAB | 第81-82页 |
4.4.2 基因工程菌Pseudomonas aeruginosa PoprAB的构建 | 第82-84页 |
4.5 基因工程菌的鼠李糖脂生产能力 | 第84-87页 |
4.5.1 基因工程菌好氧产鼠李糖脂的评价 | 第84-86页 |
4.5.2 基因工程菌厌氧产鼠李糖脂的评价 | 第86页 |
4.5.3 工程菌PoprAB的鼠李糖脂厌氧合成曲线 | 第86-87页 |
4.6 本章小结 | 第87-89页 |
第5章 厌氧产鼠李糖脂菌株的产物特性及原位驱油潜力研究 | 第89-109页 |
5.1 引言 | 第89页 |
5.2 菌株SG鼠李糖脂产物的特性分析 | 第89-95页 |
5.2.1 临界胶束浓度测定分析 | 第89-91页 |
5.2.2 乳化活性分析 | 第91-92页 |
5.2.3 液相色谱-质谱联用分析 | 第92-95页 |
5.3 菌株在模拟油藏条件下的生长代谢 | 第95-98页 |
5.3.1 接种量对厌氧产鼠李糖脂的影响 | 第95-96页 |
5.3.2 在模拟油藏条件下的鼠李糖脂生产 | 第96-98页 |
5.4 菌株的定殖与微生物群落变化研究 | 第98-104页 |
5.4.1 菌株在模拟油藏环境中的定殖 | 第99-100页 |
5.4.2 细菌群落多样性动态变化 | 第100-104页 |
5.6 物理模拟驱油潜力评价 | 第104-107页 |
5.6.1 菌株在高压条件下的鼠李糖脂生产 | 第104页 |
5.6.2 岩心物理模拟驱油实验 | 第104-107页 |
5.7 本章小结 | 第107-109页 |
结论 | 第109-111页 |
参考文献 | 第111-125页 |
攻读博士学位期间发表的论文 | 第125-127页 |
致谢 | 第127-129页 |
个人简历 | 第129页 |