英文缩略词 | 第7-10页 |
中文摘要 | 第10-12页 |
英文摘要 | 第12-13页 |
1 前言 | 第14-15页 |
2 实验材料 | 第15-18页 |
2.1 仪器与设备 | 第15页 |
2.2 药品与试剂 | 第15-17页 |
2.3 肝脏组织、细胞株、菌株及质粒 | 第17-18页 |
3 实验方法 | 第18-34页 |
3.1 免疫组织化学SP染色 | 第18页 |
3.2 人源NLRC5重组质粒的构建 | 第18-23页 |
3.3 Lipofectamin~(TM) 2000试剂瞬时转染siRNA进入细胞 | 第23-24页 |
3.4 Lipofectamin~(TM) 2000试剂瞬时转染NLRC5重组质粒进入细胞 | 第24页 |
3.5 q RT-PCR法检测m RNA表达 | 第24-27页 |
3.6 Western blot法检测蛋白表达 | 第27-31页 |
3.7 MTT细胞增殖实验 | 第31-32页 |
3.8 流式细胞仪检测检测细胞周期 | 第32页 |
3.9 肿瘤细胞划痕实验 | 第32-33页 |
3.10 Transwell肿瘤细胞迁移与侵袭实验 | 第33页 |
3.11 数据处理 | 第33-34页 |
4. 实验结果 | 第34-59页 |
4.1 NLRC5在肝脏组织和细胞中的蛋白变化 | 第34-35页 |
4.1.1 人肝组织中NLRC5蛋白表达 | 第34页 |
4.1.2 正常肝细胞和肝癌细胞中的NLRC5蛋白表达 | 第34-35页 |
4.2 NLRC5对肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭的影响 | 第35-48页 |
4.2.1 过表达NLRC5对肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力的影响 | 第35-41页 |
4.2.2 沉默NLRC5对肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力的影响 | 第41-48页 |
4.3 NLRC5对Wnt/β-catenin信号通路的影响 | 第48-59页 |
4.3.1 正常肝细胞和肝癌细胞中Wnt/β-catenin信号通路表达情况 | 第48-50页 |
4.3.2 过表达NLRC5对 β-catenin mRNA和蛋白表达的影响 | 第50-51页 |
4.3.3 沉默NLRC5对 β-catenin m RNA和蛋白表达的影响 | 第51-53页 |
4.3.4 过表达NLRC5对Cyclin D1、C-myc和MMP-7 蛋白表达的影响 | 第53-54页 |
4.3.5 沉默NLRC5对Cyclin D1、C-myc和MMP-7 蛋白表达的影响 | 第54-56页 |
4.3.6 β-catenin 抑制剂 iCRT3 对 BEL-7402 肝癌细胞增殖的影响 | 第56页 |
4.3.7 β-catenin 抑制剂 iCRT3 对肝癌细胞 BEL-7402 迁移能力的影响 | 第56-57页 |
4.3.8 iCRT3对肝癌细胞BEL-7402中 β-catenin、Cyclin D1、C-myc和MMP-7 蛋白表达的影响 | 第57-59页 |
5.讨论 | 第59-63页 |
6.结论 | 第63-64页 |
7.参考文献 | 第64-68页 |
附录 | 第68-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
Functions of NLRC5 in immunity and inflammation | 第70-90页 |
REFERENCES | 第82-90页 |