| 中文摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 缩略语 | 第14-15页 |
| 前言 | 第15-18页 |
| 研究现状、成果 | 第15-17页 |
| 研究目的、方法 | 第17-18页 |
| 一、包装GDF15 shRNA慢病毒，建立GDF15稳定低表达的胶质瘤细胞株 | 第18-37页 |
| 1.1 实验材料 | 第18-24页 |
| 1.1.1 质粒 | 第18-19页 |
| 1.1.2 实验对象 | 第19页 |
| 1.1.3 实验仪器 | 第19-20页 |
| 1.1.4 实验材料 | 第20页 |
| 1.1.5 药品与试剂 | 第20-22页 |
| 1.1.6 主要溶液的配制 | 第22-24页 |
| 1.2 实验方法 | 第24-32页 |
| 1.2.1 实验流程 | 第24-25页 |
| 1.2.2 胶质瘤U373、U87细胞和 293T细胞的培养 | 第25-26页 |
| 1.2.3 siRNA靶点设计 | 第26-27页 |
| 1.2.4 质粒构建 | 第27-29页 |
| 1.2.5 质粒提取 | 第29页 |
| 1.2.6 RNA慢病毒包装 | 第29页 |
| 1.2.7 慢病毒感染胶质瘤细胞 | 第29-30页 |
| 1.2.8 Western Blot检测GDF15蛋白的表达 | 第30-31页 |
| 1.2.9 选择干扰效果明显的慢病毒，建立GDF15稳定低表达的胶质瘤细胞株 | 第31-32页 |
| 1.2.10数据处理 | 第32页 |
| 1.3 结果 | 第32-34页 |
| 1.3.1 阳性克隆测序结果分析 | 第32页 |
| 1.3.2 两种慢病毒感染U373细胞绿色荧光蛋白表达情况 | 第32-33页 |
| 1.3.3 Western Blot检测两种病毒感染U373细胞GDF15蛋白的表达 | 第33页 |
| 1.3.4 慢病毒感染胶质瘤细胞绿色荧光蛋白表达情况 | 第33-34页 |
| 1.4 讨论 | 第34-36页 |
| 1.4.1 RNAi技术的发展及siRNA的设计 | 第34-35页 |
| 1.4.2 RNAi慢病毒的包装 | 第35-36页 |
| 1.5 小结 | 第36-37页 |
| 二、GDF15低表达胶质瘤细胞对化疗药物敏感性的影响 | 第37-57页 |
| 2.1 实验对象和材料 | 第37-38页 |
| 2.1.1 细胞 | 第37页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第37页 |
| 2.1.3 实验材料 | 第37页 |
| 2.1.4 药品与试剂 | 第37-38页 |
| 2.1.5 主要溶液的配置 | 第38页 |
| 2.2 实验方法 | 第38-40页 |
| 2.2.1 细胞的培养 | 第38页 |
| 2.2.2 MTT法检测细胞存活率 | 第38-39页 |
| 2.2.2.1 实验分组 | 第38页 |
| 2.2.2.2 实验步骤 | 第38-39页 |
| 2.2.3 Hoechst/PI染色 | 第39页 |
| 2.2.3.1 实验分组 | 第39页 |
| 2.2.3.2 实验步骤 | 第39页 |
| 2.2.4 Western Blot检测 | 第39页 |
| 2.2.4.1 实验分组 | 第39页 |
| 2.2.4.2 实验步骤 | 第39页 |
| 2.2.5 数据处理 | 第39-40页 |
| 2.3 结果 | 第40-52页 |
| 2.3.1 MTT检测细胞存活率 | 第40-44页 |
| 2.3.1.1 U373细胞化疗敏感性的改变 | 第40-42页 |
| 2.3.1.2 U87细胞耐药程度的改变 | 第42-44页 |
| 2.3.2 Hoechst/PI双染检测细胞凋亡形态改变 | 第44-48页 |
| 2.3.2.1 U373细胞Hoechst/PI双染结果 | 第44-46页 |
| 2.3.2.2 U87细胞Hoechst/PI双染结果 | 第46-48页 |
| 2.3.3 Western Blot检测凋亡相关蛋白表达 | 第48-52页 |
| 2.3.3.1 U373细胞蛋白检测结果 | 第48-50页 |
| 2.3.3.2 U87细胞蛋白检测结果 | 第50-52页 |
| 2.4 讨论 | 第52-56页 |
| 2.4.1 GDF15基因低表达对胶质瘤细胞的影响 | 第52-53页 |
| 2.4.2 MTT检测胶质瘤细胞耐药性改变 | 第53页 |
| 2.4.3 观察胶质瘤细胞形态的改变 | 第53-54页 |
| 2.4.4 Western Blot检测胶质瘤细胞凋亡相关蛋白 | 第54-55页 |
| 2.4.5 GDF15低表达胶质瘤细胞耐药机制研究 | 第55-56页 |
| 2.5 小结 | 第56-57页 |
| 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第64-65页 |
| 综述 | 第65-78页 |
| 综述参考文献 | 第72-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
