| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 英文缩写表 | 第9-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-25页 |
| 1.1 禾谷镰刀菌简介 | 第13-14页 |
| 1.2 轮枝镰孢菌简介 | 第14页 |
| 1.3 MADS-box功能介绍 | 第14-15页 |
| 1.4 MADS-box蛋白的特征 | 第15页 |
| 1.5 酵母菌的MADS-box蛋白简介 | 第15-21页 |
| 1.5.1 酵母菌的SRF型MADS-box蛋白 | 第16-20页 |
| 1.5.2 酵母菌的MEF型MADS-box蛋白功能介绍 | 第20-21页 |
| 1.6 黑粉菌的MADS-box蛋白功能介绍 | 第21页 |
| 1.7 稻瘟菌的MADS-box蛋白功能介绍 | 第21-22页 |
| 1.7.1 稻瘟菌的Mig1（MEF型）对致病性的影响 | 第22页 |
| 1.7.2 稻瘟菌的Mcm1（SRF型）对致病性的影响 | 第22页 |
| 1.8 大孢粪壳菌的MADS-box蛋白功能介绍 | 第22-23页 |
| 1.9 曲霉菌的MADS-box蛋白功能介绍 | 第23页 |
| 1.10 禾谷镰刀菌的MADS-box蛋白 | 第23-25页 |
| 第二章FGMCM1 基因结构及敲除突变体的分析 | 第25-34页 |
| 2.1 材料、试剂与仪器 | 第25页 |
| 2.1.1 材料 | 第25页 |
| 2.1.2 试剂 | 第25页 |
| 2.1.3 仪器 | 第25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-27页 |
| 2.2.1 Split PCR方法构建MCM1 敲除突变体 | 第25页 |
| 2.2.2 野生型禾谷镰刀菌原生质体的制备和转化 | 第25-26页 |
| 2.2.3 Fgmcm1 突变体的筛选和鉴定 | 第26页 |
| 2.2.4 PH-1 及突变体基因组DNA的提取—CTAB法 | 第26-27页 |
| 2.3 结果与分析 | 第27-32页 |
| 2.3.1 FgMCM1 基因及蛋白序列分析 | 第27页 |
| 2.3.2 Fgmcm1 基因敲除突变体的构建 | 第27页 |
| 2.3.3 PCR检测所得到的转化子 | 第27-28页 |
| 2.3.4 Southern blot验证 | 第28-32页 |
| 2.4 讨论 | 第32-34页 |
| 第三章MCM1 在真菌发育过程中的调控作用 | 第34-43页 |
| 3.1 材料、试剂和仪器 | 第34页 |
| 3.1.1 材料 | 第34页 |
| 3.1.2 试剂 | 第34页 |
| 3.2 实验方法 | 第34-36页 |
| 3.2.1 菌落形态，菌落边缘及生长速度测定 | 第34页 |
| 3.2.2 Fgmcm1 突变体的孢子形态，产孢率及萌发实验 | 第34页 |
| 3.2.3 有性生殖实验 | 第34-35页 |
| 3.2.4 压力筛选实验 | 第35页 |
| 3.2.5 小麦穗与玉米杆接种实验 | 第35页 |
| 3.2.6 Mcm1 蛋白的表达亚细胞定位及功能恢复验证 | 第35-36页 |
| 3.3 结果 | 第36-42页 |
| 3.3.1 突变体的表型观察 | 第36页 |
| 3.3.2 对无性生殖的影响 | 第36-38页 |
| 3.3.3 突变体Fgmcm1 对压力筛选的缺陷 | 第38-39页 |
| 3.3.4 突变体Fgmcm1 致病性下降 | 第39-40页 |
| 3.3.5 亚细胞定位及其蛋白表达 | 第40页 |
| 3.3.6 MCM1 基因对有性生殖的影响 | 第40-42页 |
| 3.4 讨论 | 第42-43页 |
| 第四章MCM1 对真菌细胞识别调控的作用 | 第43-69页 |
| 4.1 材料、试剂和仪器 | 第43-44页 |
| 4.1.1 材料 | 第43页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第43页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第43页 |
| 4.1.4 培养基 | 第43-44页 |
| 4.2 实验方法 | 第44-46页 |
| 4.2.1 RNA提取，纯化及反转录 | 第44页 |
| 4.2.2 酵母双杂的方法验证与FgMCM1 互作基因 | 第44页 |
| 4.2.3 突变体M1M，M2M的获得 | 第44页 |
| 4.2.4 轮枝镰孢菌中所涉及到的实验方法 | 第44-45页 |
| 4.2.5 RNA-seqence测序及实时定量PCR | 第45-46页 |
| 4.3 结果 | 第46-65页 |
| 4.3.1 突变体Fgmcm1 营养生长不稳定 | 第46页 |
| 4.3.2 突变体MD的生长随机恢复 | 第46-47页 |
| 4.3.3 在异宗配合的Fvmcm1 突变体对生长发育的影响 | 第47-52页 |
| 4.3.4 酵母双杂验证蛋白的互作 | 第52-53页 |
| 4.3.5 突变体M1M、M2M的构建 | 第53-56页 |
| 4.3.6 Fgmcm1 与PH-1 比较基因表达的差异 | 第56-58页 |
| 4.3.7 qRT-PCR实验与RNA-seq分析 | 第58-59页 |
| 4.3.8 表达量变化的基因的功能验证 | 第59-65页 |
| 4.4 讨论与展望 | 第65-69页 |
| 参考文献 | 第69-80页 |
| 附录 | 第80-97页 |
| 致谢 | 第97-98页 |
| 作者简介 | 第98页 |
