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油用牡丹类黄酮合成酶基因的克隆及表达分析

摘要第6-7页
ABSTRACT第7-8页
第一章 文献综述第12-21页
    1.1 油用牡丹的概述第12-15页
        1.1.1 油用牡丹的种类及形态特征第12-13页
        1.1.2 油用牡丹化学成分研究第13页
        1.1.3 油用牡丹的应用价值第13-14页
        1.1.4 牡丹籽油的提取现状第14-15页
        1.1.5 生产中的问题第15页
    1.2 类黄酮研究进展第15-20页
        1.2.1 牡丹类黄酮的合成过程第16-17页
        1.2.2 类黄酮的作用和价值第17页
        1.2.3 类黄酮的提取技术第17-18页
        1.2.4 类黄酮的检测方法第18页
        1.2.5 类黄酮的结构解析第18页
        1.2.6 类黄酮合成酶研究进展第18-20页
    1.3 本研究的目的和意义第20-21页
第二章 ‘凤丹’牡丹种皮素色成分分析第21-26页
    2.1 材料与试剂第21页
        2.1.1 材料第21页
        2.1.2 实验试剂与仪器第21页
    2.2 方法第21-22页
        2.2.1 提取液和标液的的配制第21-22页
        2.2.2 紫外分光光度法的使用第22页
        2.2.3 高效液相色谱法检测第22页
    2.3 结果与讨论第22-25页
        2.3.1 紫外-可见分光光度计法初步鉴定类黄酮类别第22-23页
        2.3.2 高效液相色谱检测第23-25页
    2.4 小结第25-26页
第三章 油用牡丹类黄酮合成酶基因的克隆和分析第26-41页
    3.1 实验用品第26页
        3.1.1 实验材料第26页
        3.1.2 实验试剂及仪器设备第26页
    3.2 实验方法第26-32页
        3.2.1 引物设计第26-27页
        3.2.2 提取‘凤丹’牡丹和紫斑牡丹的RNA第27-28页
        3.2.3 cDNA的获得(反转录)第28页
        3.2.4 ANS基因PCR扩增第28-29页
        3.2.5 连接T载体,测序第29-32页
    3.3 结果及分析第32-39页
        3.3.1 ANS基因序列的获得及分析第32-34页
        3.3.2 油用牡丹ANS基因生物信息学分析(王亚杰 2014)第34-38页
        3.3.3 LAR基因片段的获得第38-39页
        3.3.4 ANR基因片段的获得第39页
    3.4 小结第39-41页
第四章 ‘凤丹’牡丹ANS基因表达分析第41-47页
    4.1 实验材料、试剂及仪器第41-42页
        4.1.1 实验材料第41页
        4.1.2 实验试剂第41-42页
        4.1.3 实验仪器第42页
    4.2 实验方法第42-43页
        4.2.1 ‘凤丹’牡丹ANS基因实时定量引物的设计第42页
        4.2.2 ‘凤丹’牡丹花瓣中RNA的提取与检测第42页
        4.2.3 ‘凤丹’牡丹花瓣cDNA合成第42页
        4.2.4 ‘凤丹’牡丹ANS基因实时荧光定量PCR第42-43页
        4.2.5 ‘凤丹’牡丹 ANS 基因实时荧光定量 PCR 产物的凝胶电泳检测第43页
    4.3 结果与分析第43-46页
        4.3.1 核酸检测结果第43页
        4.3.2 实时荧光定量数据质量分析第43-45页
        4.3.3 五个花瓣中ANS基因的相对表达量分析第45-46页
    4.4 小结第46-47页
第五章 ‘凤丹’牡丹ANS基因原核表达第47-52页
    5.1 实验材料、试剂及仪器第47页
        5.1.1 材料第47页
        5.1.2 实验试剂第47页
        5.1.3 仪器第47页
    5.2 方法第47-50页
        5.2.1 设计含酶切位点的引物第47页
        5.2.2 构建ANS基因原核表达载体第47-50页
    5.3 结果与分析第50-51页
        5.3.1 含酶切位点的T-ANS载体构建第50页
        5.3.2 T-ANS载体酶切第50-51页
    5.4 小结第51-52页
第六章 结论与讨论第52-53页
参考文献第53-57页
附录 标准品标准曲线第57-58页
致谢第58-59页
作者简介第59页

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