摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第12-21页 |
1.1 油用牡丹的概述 | 第12-15页 |
1.1.1 油用牡丹的种类及形态特征 | 第12-13页 |
1.1.2 油用牡丹化学成分研究 | 第13页 |
1.1.3 油用牡丹的应用价值 | 第13-14页 |
1.1.4 牡丹籽油的提取现状 | 第14-15页 |
1.1.5 生产中的问题 | 第15页 |
1.2 类黄酮研究进展 | 第15-20页 |
1.2.1 牡丹类黄酮的合成过程 | 第16-17页 |
1.2.2 类黄酮的作用和价值 | 第17页 |
1.2.3 类黄酮的提取技术 | 第17-18页 |
1.2.4 类黄酮的检测方法 | 第18页 |
1.2.5 类黄酮的结构解析 | 第18页 |
1.2.6 类黄酮合成酶研究进展 | 第18-20页 |
1.3 本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
第二章 ‘凤丹’牡丹种皮素色成分分析 | 第21-26页 |
2.1 材料与试剂 | 第21页 |
2.1.1 材料 | 第21页 |
2.1.2 实验试剂与仪器 | 第21页 |
2.2 方法 | 第21-22页 |
2.2.1 提取液和标液的的配制 | 第21-22页 |
2.2.2 紫外分光光度法的使用 | 第22页 |
2.2.3 高效液相色谱法检测 | 第22页 |
2.3 结果与讨论 | 第22-25页 |
2.3.1 紫外-可见分光光度计法初步鉴定类黄酮类别 | 第22-23页 |
2.3.2 高效液相色谱检测 | 第23-25页 |
2.4 小结 | 第25-26页 |
第三章 油用牡丹类黄酮合成酶基因的克隆和分析 | 第26-41页 |
3.1 实验用品 | 第26页 |
3.1.1 实验材料 | 第26页 |
3.1.2 实验试剂及仪器设备 | 第26页 |
3.2 实验方法 | 第26-32页 |
3.2.1 引物设计 | 第26-27页 |
3.2.2 提取‘凤丹’牡丹和紫斑牡丹的RNA | 第27-28页 |
3.2.3 cDNA的获得(反转录) | 第28页 |
3.2.4 ANS基因PCR扩增 | 第28-29页 |
3.2.5 连接T载体,测序 | 第29-32页 |
3.3 结果及分析 | 第32-39页 |
3.3.1 ANS基因序列的获得及分析 | 第32-34页 |
3.3.2 油用牡丹ANS基因生物信息学分析(王亚杰 2014) | 第34-38页 |
3.3.3 LAR基因片段的获得 | 第38-39页 |
3.3.4 ANR基因片段的获得 | 第39页 |
3.4 小结 | 第39-41页 |
第四章 ‘凤丹’牡丹ANS基因表达分析 | 第41-47页 |
4.1 实验材料、试剂及仪器 | 第41-42页 |
4.1.1 实验材料 | 第41页 |
4.1.2 实验试剂 | 第41-42页 |
4.1.3 实验仪器 | 第42页 |
4.2 实验方法 | 第42-43页 |
4.2.1 ‘凤丹’牡丹ANS基因实时定量引物的设计 | 第42页 |
4.2.2 ‘凤丹’牡丹花瓣中RNA的提取与检测 | 第42页 |
4.2.3 ‘凤丹’牡丹花瓣cDNA合成 | 第42页 |
4.2.4 ‘凤丹’牡丹ANS基因实时荧光定量PCR | 第42-43页 |
4.2.5 ‘凤丹’牡丹 ANS 基因实时荧光定量 PCR 产物的凝胶电泳检测 | 第43页 |
4.3 结果与分析 | 第43-46页 |
4.3.1 核酸检测结果 | 第43页 |
4.3.2 实时荧光定量数据质量分析 | 第43-45页 |
4.3.3 五个花瓣中ANS基因的相对表达量分析 | 第45-46页 |
4.4 小结 | 第46-47页 |
第五章 ‘凤丹’牡丹ANS基因原核表达 | 第47-52页 |
5.1 实验材料、试剂及仪器 | 第47页 |
5.1.1 材料 | 第47页 |
5.1.2 实验试剂 | 第47页 |
5.1.3 仪器 | 第47页 |
5.2 方法 | 第47-50页 |
5.2.1 设计含酶切位点的引物 | 第47页 |
5.2.2 构建ANS基因原核表达载体 | 第47-50页 |
5.3 结果与分析 | 第50-51页 |
5.3.1 含酶切位点的T-ANS载体构建 | 第50页 |
5.3.2 T-ANS载体酶切 | 第50-51页 |
5.4 小结 | 第51-52页 |
第六章 结论与讨论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-57页 |
附录 标准品标准曲线 | 第57-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
作者简介 | 第59页 |