摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
第一章 绪论 | 第7-14页 |
1.1 白念珠菌简介 | 第7-8页 |
1.2 白念珠菌的二相性与毒力 | 第8-9页 |
1.2.1 白念珠菌的二相性 | 第8页 |
1.2.2 白念珠菌的毒力 | 第8-9页 |
1.3 抗真菌药物与白念珠菌的耐药性 | 第9-10页 |
1.3.1 抗真菌药物 | 第9-10页 |
1.3.2 白念珠菌的耐药性 | 第10页 |
1.4 钙信号途径 | 第10-11页 |
1.5 类anoctamin超家族简介 | 第11-13页 |
1.5.1 TMEM16家族 | 第11页 |
1.5.2 DUF221家族 | 第11-13页 |
1.5.3 白念珠菌中与AtCsc1同源的蛋白 | 第13页 |
1.6 本课题研究的内容与意义 | 第13-14页 |
第二章 实验材料与方法 | 第14-26页 |
2.1 实验材料 | 第14-20页 |
2.1.1 实验仪器 | 第14页 |
2.1.2 实验试剂与试剂盒 | 第14-15页 |
2.1.3 实验所用的菌株、质粒和引物 | 第15-17页 |
2.1.4 实验所用的溶液及其配制方法 | 第17-20页 |
2.1.5 实验所用培养基 | 第20页 |
2.2 实验方法 | 第20-26页 |
2.2.1 菌株的培养与保存 | 第20-21页 |
2.2.2 白念珠菌基因组的提取 | 第21页 |
2.2.3 白念珠菌的转化 | 第21页 |
2.2.4 大肠杆菌中质粒的提取 | 第21-22页 |
2.2.5 PCR扩增DNA片段 | 第22页 |
2.2.6 酶切体系的构建 | 第22-23页 |
2.2.7 利用同源重组的连接体系的构建 | 第23页 |
2.2.8 大肠杆菌的转化 | 第23页 |
2.2.9 菌丝发育实验 | 第23页 |
2.2.10 小鼠实验 | 第23-24页 |
2.2.11 倍比稀释点板表型筛选实验 | 第24-25页 |
2.2.12 白念珠菌的荧光定位观察 | 第25-26页 |
第三章 实验结果与讨论 | 第26-42页 |
3.1 CaRSN1和CaCSC1基因的敲除 | 第26-28页 |
3.1.1 白念珠菌基因的敲除策略 | 第26-27页 |
3.1.2 CaRSN1和CaCSC1基因敲除的结果 | 第27-28页 |
3.2 白念珠菌csc1/csc1和rsn1/rsn1缺失株表型的筛选 | 第28-31页 |
3.2.1 白念珠菌csc1/csc1缺失株表型的筛选 | 第28页 |
3.2.2 白念珠菌rsn1/rsn1缺失株表型的筛选 | 第28-31页 |
3.3 白念珠菌rsn1/rsn1缺失株的菌丝发育 | 第31-34页 |
3.4 白念珠菌rsn1/rsn1缺失株的毒力研究 | 第34-37页 |
3.4.1 整合CIp 10 质粒 | 第34-35页 |
3.4.2 小鼠感染实验 | 第35-37页 |
3.5 白念珠菌CaRsn1蛋白的亚细胞定位 | 第37-40页 |
3.5.1 表达CaRsn1-GFP融合蛋白的菌株的构建及鉴定 | 第37-38页 |
3.5.2 CaRsn1蛋白的亚细胞定位 | 第38-40页 |
3.6 CaRsn1与ScRsn1蛋白的同源性 | 第40-42页 |
3.6.1 CaRsn1互补ScRsn1蛋白的功能的探究 | 第40-41页 |
3.6.2 ScRsn1互补CaRsn1蛋白的功能的探究 | 第41-42页 |
主要结论与展望 | 第42-44页 |
主要结论 | 第42-43页 |
展望 | 第43-44页 |
致谢 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-48页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第48页 |