摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
符号说明 | 第11-12页 |
文献综述 | 第12-22页 |
1. 禽白血病 | 第12-16页 |
1.1 禽白血病病毒形态结构及理化特性 | 第12-13页 |
1.2 病毒的基因组结构与功能 | 第13-14页 |
1.3 禽白血病的免疫抑制作用及研究现状 | 第14-15页 |
1.4 诊断方法 | 第15-16页 |
2. 病毒蛋白在干扰宿主抗病毒天然免疫中的作用研究 | 第16-20页 |
3. 本研究目的与意义 | 第20-22页 |
研究内容一 ALV-p27 Real-time PCR检测方法的建立与应用 | 第22-30页 |
1. 材料与方法 | 第22-24页 |
1.1 生物材料与仪器 | 第22-23页 |
1.2 引物设计与合成 | 第23页 |
1.3 阳性标准品的制备 | 第23页 |
1.4 ALV-p27基因Real-time PCR方法的建立及标准曲线的绘制 | 第23页 |
1.5 Real-time PCR方法的特异性实验 | 第23-24页 |
1.6 Real-time PCR方法重复性和稳定性实验 | 第24页 |
1.7 胚胎期感染病毒一日龄出壳雏鸡和正常雏鸡不同组织脏器中ALV-p27基因拷贝数的检测 | 第24页 |
2. 结果 | 第24-28页 |
2.1 阳性标准品的制备 | 第24-25页 |
2.2 ALV-p27 Real-time PCR绝对定量方法的建立 | 第25-26页 |
2.3 胚胎期感染病毒一日龄出壳雏鸡不同组织脏器中p27基因表达的绝对定量检测 | 第26-28页 |
3. 讨论 | 第28-30页 |
研究内容二 ALV-p27蛋白抑制细胞因子的表达 | 第30-43页 |
1. 材料与方法 | 第31-35页 |
1.1 质粒、细胞 | 第31页 |
1.2 主要试剂和仪器 | 第31页 |
1.3 引物的设计与合成 | 第31-33页 |
1.4 ALV病毒衣壳蛋白P27真核表达载体的构建及鉴定 | 第33页 |
1.5 ALV-p27蛋白抑制细胞因子的表达 | 第33-35页 |
1.6 ALV-p27蛋白抑制细胞因子的表达信号途径中相关细胞因子的检测 | 第35页 |
1.7 数据分析 | 第35页 |
2. 结果 | 第35-41页 |
2.1 病毒衣壳蛋白P27基因真核表达载体的构建及鉴定 | 第35-36页 |
2.2 ALV-p27蛋白抑制细胞因子的表达 | 第36-39页 |
2.3 对LPS刺激转染ALV-p27蛋白DF-1细胞信号途径中相关细胞因子的检测结果 | 第39-41页 |
3. 分析与讨论 | 第41-43页 |
研究内容三 ALV-p27与宿主细胞相互作用蛋白的初步筛选 | 第43-55页 |
1. 材料与方法 | 第43-46页 |
1.1 样品与试剂 | 第43-44页 |
1.2 HD11细胞中与p27蛋白的相互作用蛋白的筛选 | 第44-45页 |
1.3 细胞中与暂态表达的p27蛋白相互作用蛋白的筛选 | 第45-46页 |
1.4 病毒感染细胞中与ALV-p27相互作用蛋白的筛选 | 第46页 |
2. 结果 | 第46-52页 |
2.1 HD11细胞中与p27蛋白相互作用蛋白的筛选 | 第46-47页 |
2.2 暂态表达p27蛋白与DF1细胞中相互作用蛋白的筛选 | 第47-48页 |
2.3 病毒表达p27蛋白与细胞中蛋白相互作用的筛选 | 第48-49页 |
2.4 质谱鉴定和分析 | 第49-52页 |
3. 讨论 | 第52-55页 |
全文小结 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-60页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第60-61页 |
致谢 | 第61-62页 |