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禽白血病病毒衣壳蛋白p27生物学功能的初步研究

摘要第3-5页
Abstract第5-7页
符号说明第11-12页
文献综述第12-22页
    1. 禽白血病第12-16页
        1.1 禽白血病病毒形态结构及理化特性第12-13页
        1.2 病毒的基因组结构与功能第13-14页
        1.3 禽白血病的免疫抑制作用及研究现状第14-15页
        1.4 诊断方法第15-16页
    2. 病毒蛋白在干扰宿主抗病毒天然免疫中的作用研究第16-20页
    3. 本研究目的与意义第20-22页
研究内容一 ALV-p27 Real-time PCR检测方法的建立与应用第22-30页
    1. 材料与方法第22-24页
        1.1 生物材料与仪器第22-23页
        1.2 引物设计与合成第23页
        1.3 阳性标准品的制备第23页
        1.4 ALV-p27基因Real-time PCR方法的建立及标准曲线的绘制第23页
        1.5 Real-time PCR方法的特异性实验第23-24页
        1.6 Real-time PCR方法重复性和稳定性实验第24页
        1.7 胚胎期感染病毒一日龄出壳雏鸡和正常雏鸡不同组织脏器中ALV-p27基因拷贝数的检测第24页
    2. 结果第24-28页
        2.1 阳性标准品的制备第24-25页
        2.2 ALV-p27 Real-time PCR绝对定量方法的建立第25-26页
        2.3 胚胎期感染病毒一日龄出壳雏鸡不同组织脏器中p27基因表达的绝对定量检测第26-28页
    3. 讨论第28-30页
研究内容二 ALV-p27蛋白抑制细胞因子的表达第30-43页
    1. 材料与方法第31-35页
        1.1 质粒、细胞第31页
        1.2 主要试剂和仪器第31页
        1.3 引物的设计与合成第31-33页
        1.4 ALV病毒衣壳蛋白P27真核表达载体的构建及鉴定第33页
        1.5 ALV-p27蛋白抑制细胞因子的表达第33-35页
        1.6 ALV-p27蛋白抑制细胞因子的表达信号途径中相关细胞因子的检测第35页
        1.7 数据分析第35页
    2. 结果第35-41页
        2.1 病毒衣壳蛋白P27基因真核表达载体的构建及鉴定第35-36页
        2.2 ALV-p27蛋白抑制细胞因子的表达第36-39页
        2.3 对LPS刺激转染ALV-p27蛋白DF-1细胞信号途径中相关细胞因子的检测结果第39-41页
    3. 分析与讨论第41-43页
研究内容三 ALV-p27与宿主细胞相互作用蛋白的初步筛选第43-55页
    1. 材料与方法第43-46页
        1.1 样品与试剂第43-44页
        1.2 HD11细胞中与p27蛋白的相互作用蛋白的筛选第44-45页
        1.3 细胞中与暂态表达的p27蛋白相互作用蛋白的筛选第45-46页
        1.4 病毒感染细胞中与ALV-p27相互作用蛋白的筛选第46页
    2. 结果第46-52页
        2.1 HD11细胞中与p27蛋白相互作用蛋白的筛选第46-47页
        2.2 暂态表达p27蛋白与DF1细胞中相互作用蛋白的筛选第47-48页
        2.3 病毒表达p27蛋白与细胞中蛋白相互作用的筛选第48-49页
        2.4 质谱鉴定和分析第49-52页
    3. 讨论第52-55页
全文小结第55-56页
参考文献第56-60页
攻读学位期间发表的学术论文第60-61页
致谢第61-62页

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