| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-9页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 第一部分 引言 | 第10-18页 |
| ·WD40蛋白 | 第10-12页 |
| ·TolB蛋白 | 第12-14页 |
| ·DPP-Ⅳ蛋白 | 第14-16页 |
| ·逆境胁迫 | 第16-17页 |
| ·研究目的与意义 | 第17-18页 |
| 第二部分 实验材料与方法 | 第18-27页 |
| ·BRNO3载体构建的材料与方法 | 第18-22页 |
| ·实验材料 | 第18页 |
| ·植物材料 | 第18页 |
| ·菌株及载体 | 第18页 |
| ·引物序列 | 第18页 |
| ·实验方法 | 第18-22页 |
| ·DNA模板获取 | 第18页 |
| ·CDS序列及启动子序列的扩增 | 第18-20页 |
| ·构建入门克隆 | 第20-21页 |
| ·构建目的克隆 | 第21-22页 |
| ·转化农杆菌 | 第22页 |
| ·浸花法转染拟南芥的方法 | 第22页 |
| ·转染方法 | 第22页 |
| ·GUS染色 | 第22-24页 |
| ·试剂 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-24页 |
| ·RT-PCR分析的方法 | 第24-27页 |
| ·引物序列 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-27页 |
| ·提取总RNA | 第24-25页 |
| ·RT-PCR检测 | 第25-27页 |
| 第三部分 实验结果 | 第27-43页 |
| ·BRNO3蛋白生物信息学分析 | 第27-32页 |
| ·BRNO3的信号肽预测 | 第27-28页 |
| ·BRNO3的二级结构预测 | 第28-29页 |
| ·BRNO3的三级结构预测 | 第29-30页 |
| ·BRNO3在植物组织中的表达预测 | 第30-31页 |
| ·BRNO3及其同源基因的分析 | 第31-32页 |
| ·启动子分析载体和过表达载体构建 | 第32-37页 |
| ·BRNO3::GUS启动子分析载体的构建 | 第32-34页 |
| ·入门克隆pENTR-BRNO3-P2构建 | 第32-33页 |
| ·目的克隆PMDC163-BRNO3-P2构建 | 第33-34页 |
| ·转化农杆菌 | 第34页 |
| ·35S::BRNO3-YFP过表达载体构建(pEarlyGate101) | 第34-36页 |
| ·入门克隆pENTR-BRNO3-C2构建 | 第34-35页 |
| ·目的克隆pEarlyGate101-BRNO3-C2构建 | 第35页 |
| ·转化农杆菌 | 第35-36页 |
| ·35S::YFP-BRNO3过表达载体构建(pEarlyGate104) | 第36-37页 |
| ·入门克隆pENTR-BRNO3-C1的构建 | 第36页 |
| ·目的克隆pEarlyGate104-BRNO3-C1的构建 | 第36-37页 |
| ·转化农杆菌 | 第37页 |
| ·转基因植株筛选 | 第37-38页 |
| ·GV3101-PMDC163-BRNO3-P1转基因植株获得 | 第37页 |
| ·GV3101-PMDC163-BRNO3-P2转基因植株获得 | 第37页 |
| ·GV3101-pEarlyGate101-BRNO3-C2转基因植株获得 | 第37-38页 |
| ·启动子分析 | 第38-42页 |
| ·RT-PCR分析不同胁迫对BRNO3表达的影响 | 第42-43页 |
| 第四部分 讨论 | 第43-47页 |
| ·BRNO3的生物信息学分析 | 第43-44页 |
| ·BRNO3的启动子分析 | 第44-45页 |
| ·RT-PCR分析不同胁迫对BRNO3表达的影响 | 第45-47页 |
| 第五部分 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 致谢 | 第54页 |
