| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第1章 绪论 | 第13-25页 |
| 1.1 研究背景 | 第13-21页 |
| 1.1.1 冠心病早期诊断及技术发展 | 第13-15页 |
| 1.1.2 冠心病特异性miRNA | 第15-17页 |
| 1.1.3 miRNA检测技术进展 | 第17-21页 |
| 1.2 研究目的、内容和意义 | 第21-23页 |
| 1.3 本章小结 | 第23-25页 |
| 第2章 基于荧光-滚环扩增技术的miRNA检测原理 | 第25-36页 |
| 2.1 滚环扩增技术原理 | 第25-27页 |
| 2.1.1 线性滚环扩增技术 | 第25-26页 |
| 2.1.2 超分支滚环扩增技术 | 第26-27页 |
| 2.2 分子荧光 | 第27-31页 |
| 2.2.1 分子荧光的基本原理 | 第27-28页 |
| 2.2.2 荧光的主要参数 | 第28-30页 |
| 2.2.3 影响荧光强度的外部因素 | 第30-31页 |
| 2.3 miRNA荧光测量原理 | 第31-34页 |
| 2.3.1 核酸荧光染料 | 第31-33页 |
| 2.3.2 荧光分析法 | 第33-34页 |
| 2.4 本章小结 | 第34-36页 |
| 第3章 基于滚环扩增技术的荧光测量方法的研究 | 第36-47页 |
| 3.1 荧光检测系统的典型结构 | 第36-38页 |
| 3.2 影响滚环扩增荧光检测的主要因素 | 第38-39页 |
| 3.3 滚环扩增荧光检测系统结构选择与设计 | 第39-41页 |
| 3.3.1 共焦式荧光检测系统 | 第39-40页 |
| 3.3.2 非共焦式荧光检测系统 | 第40-41页 |
| 3.4 滚环扩增荧光信号强度的定量分析方法 | 第41-45页 |
| 3.4.1 共焦式荧光检测系统数值分析 | 第42-44页 |
| 3.4.2 非共焦式荧光检测系统数值分析 | 第44-45页 |
| 3.5 本章小结 | 第45-47页 |
| 第4章 基于滚环扩增技术的荧光检测系统分析与设计 | 第47-73页 |
| 4.1 基于滚环扩增的miRNA荧光检测系统总体设计方案 | 第47-48页 |
| 4.2 光学系统设计与实现 | 第48-57页 |
| 4.2.1 光源 | 第48-51页 |
| 4.2.2 LED光束整形 | 第51-52页 |
| 4.2.3 探测器 | 第52-54页 |
| 4.2.4 滤光片 | 第54-57页 |
| 4.3 滚环扩增反应系统设计与实现 | 第57-63页 |
| 4.3.1 样品池 | 第57-59页 |
| 4.3.2 恒温结构 | 第59-62页 |
| 4.3.3 温度传感器 | 第62-63页 |
| 4.4 机械结构总体设计 | 第63-66页 |
| 4.5 软件设计 | 第66-70页 |
| 4.5.1 软件总体架构 | 第66-67页 |
| 4.5.2 主控程序设计 | 第67-69页 |
| 4.5.3 软件界面 | 第69-70页 |
| 4.6 提高信噪比的方案选择与优化 | 第70-71页 |
| 4.6.1 遮光处理 | 第70-71页 |
| 4.6.2 电子设计 | 第71页 |
| 4.6.3 数据处理方法 | 第71页 |
| 4.7 本章小结 | 第71-73页 |
| 第5章 miRNA荧光检测系统性能分析 | 第73-93页 |
| 5.1 荧光信号的真实性分析与比较 | 第73-77页 |
| 5.1.1 miRNA荧光检测系统与Nanodrop2000对比 | 第73-75页 |
| 5.1.2 miRNA荧光检测系统与PCR对比 | 第75-77页 |
| 5.2 荧光检测系统的性能分析 | 第77-86页 |
| 5.2.1 激发光与荧光强度关系 | 第77-79页 |
| 5.2.2 荧光强度与物质浓度的关系 | 第79-80页 |
| 5.2.3 荧光强度与反应体系的关系 | 第80页 |
| 5.2.4 线性度 | 第80-82页 |
| 5.2.5 重复性 | 第82页 |
| 5.2.6 检测限 | 第82-83页 |
| 5.2.7 标准曲线绘制 | 第83-85页 |
| 5.2.8 数据归一化 | 第85-86页 |
| 5.3 荧光信号的优化处理 | 第86-88页 |
| 5.4 针对Let-7家族的荧光-滚环扩增检测分析 | 第88-91页 |
| 5.4.1 针对Let-7家族检测的反应时间分析 | 第88-89页 |
| 5.4.2 针对Let-7家族检测的敏感性分析 | 第89-90页 |
| 5.4.3 针对Let-7家族检测的特异性分析 | 第90-91页 |
| 5.5 本章小结 | 第91-93页 |
| 第6章 冠心病检测实验研究 | 第93-100页 |
| 6.1 miR-499荧光-滚环扩增检测方案设计 | 第93-95页 |
| 6.1.1 人原代心肌细胞培养 | 第93页 |
| 6.1.2 miRNA提取 | 第93页 |
| 6.1.3 miR-499锁式探针和颈环探针设计 | 第93-94页 |
| 6.1.4 滚环扩增(RCA)反应 | 第94-95页 |
| 6.2 miR-499荧光检测结果分析 | 第95-99页 |
| 6.2.1 滚环扩增定量检测设计 | 第96-98页 |
| 6.2.2 miR-499荧光检测结果 | 第98-99页 |
| 6.3 本章小结 | 第99-100页 |
| 第7章 总结与展望 | 第100-103页 |
| 7.1 总结 | 第100-101页 |
| 7.2 展望 | 第101-103页 |
| 参考文献 | 第103-110页 |
| 致谢 | 第110-111页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果 | 第111-112页 |
