致谢 | 第8-9页 |
摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-12页 |
前言 | 第13-15页 |
材料与方法 | 第15-31页 |
1 菌株与质粒 | 第15-16页 |
1.1 菌株 | 第15页 |
1.2 质粒 | 第15-16页 |
2 培养基 | 第16-17页 |
3 主要试剂及溶液 | 第17-18页 |
4 主要仪器 | 第18-19页 |
5 实验方法 | 第19-31页 |
5.1 分子遗传操作 | 第19-25页 |
5.1.1 PCR反应 | 第19-21页 |
5.1.2 质粒及PCR产物酶切 | 第21页 |
5.1.3 质粒与目的DNA片段连接 | 第21页 |
5.1.4 大肠杆菌转化 | 第21-22页 |
5.1.5 醋酸锂法转化酵母细胞 | 第22-23页 |
5.1.6 目的条带割胶回收 | 第23页 |
5.1.7 大肠杆菌质粒提取 | 第23-24页 |
5.1.8 酵母细胞基因组提取 | 第24-25页 |
5.1.9 酵母RNA提取 | 第25页 |
5.2 不同交配型酵母细胞杂交 | 第25-26页 |
5.3 酵母DNA含量分析 | 第26页 |
5.4 菌株胁迫耐受性比较 | 第26页 |
5.5 酒精发酵测试 | 第26-27页 |
5.6 生理生化测定 | 第27-31页 |
5.6.1 海藻糖含量测定 | 第27页 |
5.6.2 麦角固醇含量测定 | 第27-28页 |
5.6.3 酵母蛋白抽提 | 第28页 |
5.6.4 酵母总蛋白含量测定BCA法 | 第28页 |
5.6.5 超氧化物歧化酶(SOD)活力测试 | 第28-29页 |
5.6.6 过氧化氢酶活力测定 | 第29-30页 |
5.6.7 谷胱甘肽测定 | 第30页 |
5.6.8 二糖酶活力测定 | 第30-31页 |
结果与讨论 | 第31-52页 |
1 多倍体的构建 | 第31-35页 |
1.1 HO基因的点突变 | 第31-32页 |
1.2 质粒构建 | 第32-34页 |
1.2.1 pSK-HO质粒构建 | 第32页 |
1.2.2 pSK-HIS3质粒构建 | 第32页 |
1.2.3 pSK-HIS3-HO质粒构建 | 第32页 |
1.2.4 pSK-LEU2质粒构建 | 第32-34页 |
1.2.5 pSH47-HO质粒构建 | 第34页 |
1.3 CEN系列多倍体构建 | 第34-35页 |
2 染色体倍性变化的表型效应 | 第35-52页 |
2.1 不同倍性菌株的生长比较 | 第35-37页 |
2.2 不同倍性酵母菌株的胁迫耐受性比较 | 第37-39页 |
2.3 不同倍性菌株的发酵性能 | 第39-41页 |
2.4 不同倍性菌株细胞生理生化分析 | 第41-44页 |
2.4.1 胞内海藻糖含量分析 | 第41-42页 |
2.4.2 麦角固醇含量分析 | 第42页 |
2.4.3 总谷胱甘肽含量分析 | 第42页 |
2.4.4 蔗糖酶活力分析 | 第42页 |
2.4.5 超氧化物歧化酶活力与过氧化氢酶活力分析 | 第42-44页 |
2.5 不同倍性菌株的转录组分析 | 第44-52页 |
2.5.1 差异基因的筛选 | 第44页 |
2.5.2 差异基因的GO功能分类 | 第44-50页 |
2.5.3 基因表达与细胞生理和表型的关系 | 第50-52页 |
全文总结 | 第52-53页 |
创新点与展望 | 第53-54页 |
文献综述 多倍体化和非整倍体化的原因及细胞表型效应 | 第54-66页 |
1 多倍体和非整倍体在真核生物中的普遍性 | 第54-56页 |
1.1 多倍体现象 | 第54-55页 |
1.2 非整倍体现象 | 第55-56页 |
2. 细胞多倍体化与非整倍体化的分子遗传机制 | 第56-61页 |
2.1 细胞保证DNA含量稳定的机制 | 第56-58页 |
2.2 多倍体产生的原因 | 第58-59页 |
2.2.1 核内周期 | 第58页 |
2.2.2 核内有丝分裂 | 第58页 |
2.2.3 细胞质分裂失败 | 第58-59页 |
2.2.4 二倍体配子的产生与多倍体合子的形成 | 第59页 |
2.3 非整倍体产生原因 | 第59-61页 |
3. 多倍体化与非整倍体化的表型生理效应 | 第61-64页 |
3.1 多倍体的表型生理效应 | 第61页 |
3.2 非整倍体的表型生理效应 | 第61-64页 |
3.2.1 非整倍体细胞的生长缺陷 | 第61-63页 |
3.2.2 非整倍体的环境压力耐受性 | 第63-64页 |
4 染色体不稳定性与适应性进化 | 第64-65页 |
5 展望 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-75页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第75页 |