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酿酒酵母倍性变化对表型和基因表达的影响

致谢第8-9页
摘要第9-11页
Abstract第11-12页
前言第13-15页
材料与方法第15-31页
    1 菌株与质粒第15-16页
        1.1 菌株第15页
        1.2 质粒第15-16页
    2 培养基第16-17页
    3 主要试剂及溶液第17-18页
    4 主要仪器第18-19页
    5 实验方法第19-31页
        5.1 分子遗传操作第19-25页
            5.1.1 PCR反应第19-21页
            5.1.2 质粒及PCR产物酶切第21页
            5.1.3 质粒与目的DNA片段连接第21页
            5.1.4 大肠杆菌转化第21-22页
            5.1.5 醋酸锂法转化酵母细胞第22-23页
            5.1.6 目的条带割胶回收第23页
            5.1.7 大肠杆菌质粒提取第23-24页
            5.1.8 酵母细胞基因组提取第24-25页
            5.1.9 酵母RNA提取第25页
        5.2 不同交配型酵母细胞杂交第25-26页
        5.3 酵母DNA含量分析第26页
        5.4 菌株胁迫耐受性比较第26页
        5.5 酒精发酵测试第26-27页
        5.6 生理生化测定第27-31页
            5.6.1 海藻糖含量测定第27页
            5.6.2 麦角固醇含量测定第27-28页
            5.6.3 酵母蛋白抽提第28页
            5.6.4 酵母总蛋白含量测定BCA法第28页
            5.6.5 超氧化物歧化酶(SOD)活力测试第28-29页
            5.6.6 过氧化氢酶活力测定第29-30页
            5.6.7 谷胱甘肽测定第30页
            5.6.8 二糖酶活力测定第30-31页
结果与讨论第31-52页
    1 多倍体的构建第31-35页
        1.1 HO基因的点突变第31-32页
        1.2 质粒构建第32-34页
            1.2.1 pSK-HO质粒构建第32页
            1.2.2 pSK-HIS3质粒构建第32页
            1.2.3 pSK-HIS3-HO质粒构建第32页
            1.2.4 pSK-LEU2质粒构建第32-34页
            1.2.5 pSH47-HO质粒构建第34页
        1.3 CEN系列多倍体构建第34-35页
    2 染色体倍性变化的表型效应第35-52页
        2.1 不同倍性菌株的生长比较第35-37页
        2.2 不同倍性酵母菌株的胁迫耐受性比较第37-39页
        2.3 不同倍性菌株的发酵性能第39-41页
        2.4 不同倍性菌株细胞生理生化分析第41-44页
            2.4.1 胞内海藻糖含量分析第41-42页
            2.4.2 麦角固醇含量分析第42页
            2.4.3 总谷胱甘肽含量分析第42页
            2.4.4 蔗糖酶活力分析第42页
            2.4.5 超氧化物歧化酶活力与过氧化氢酶活力分析第42-44页
        2.5 不同倍性菌株的转录组分析第44-52页
            2.5.1 差异基因的筛选第44页
            2.5.2 差异基因的GO功能分类第44-50页
            2.5.3 基因表达与细胞生理和表型的关系第50-52页
全文总结第52-53页
创新点与展望第53-54页
文献综述 多倍体化和非整倍体化的原因及细胞表型效应第54-66页
    1 多倍体和非整倍体在真核生物中的普遍性第54-56页
        1.1 多倍体现象第54-55页
        1.2 非整倍体现象第55-56页
    2. 细胞多倍体化与非整倍体化的分子遗传机制第56-61页
        2.1 细胞保证DNA含量稳定的机制第56-58页
        2.2 多倍体产生的原因第58-59页
            2.2.1 核内周期第58页
            2.2.2 核内有丝分裂第58页
            2.2.3 细胞质分裂失败第58-59页
            2.2.4 二倍体配子的产生与多倍体合子的形成第59页
        2.3 非整倍体产生原因第59-61页
    3. 多倍体化与非整倍体化的表型生理效应第61-64页
        3.1 多倍体的表型生理效应第61页
        3.2 非整倍体的表型生理效应第61-64页
            3.2.1 非整倍体细胞的生长缺陷第61-63页
            3.2.2 非整倍体的环境压力耐受性第63-64页
    4 染色体不稳定性与适应性进化第64-65页
    5 展望第65-66页
参考文献第66-75页
攻读硕士学位期间发表的论文第75页

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