| 英文缩词表 | 第8-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 前言 | 第14-17页 |
| 第一章 H7N9亚型流感病毒小鼠感染模型的建立及对BALB/c小鼠致病性增强的分子基础研究 | 第17-31页 |
| 1 材料 | 第17-18页 |
| 1.1 毒株、鸡胚和实验动物 | 第17-18页 |
| 1.2 实验设施 | 第18页 |
| 1.3 主要试剂 | 第18页 |
| 1.4 主要仪器 | 第18页 |
| 2 方法 | 第18-20页 |
| 2.1 毒种的准备 | 第18页 |
| 2.2 病毒EID50的测定 | 第18页 |
| 2.3 病毒适应性传代 | 第18-19页 |
| 2.4 小鼠半数致死量(MLD50)、发病率、死亡率以及体内复制动力学实验 | 第19页 |
| 2.5 组织嗜性研究 | 第19页 |
| 2.6 序列测定和分析 | 第19页 |
| 2.7 数据处理和分析 | 第19-20页 |
| 3 结果 | 第20-27页 |
| 3.1 感染小鼠的临床症状 | 第20页 |
| 3.2 小鼠感染亲本病毒和鼠适应株后的发病率 | 第20页 |
| 3.3 小鼠感染亲本病毒和鼠适应株后的死亡率 | 第20-21页 |
| 3.4 病毒体内复制动力学 | 第21-23页 |
| 3.5 感染小鼠组织嗜性 | 第23-24页 |
| 3.6 小鼠半数致死量MLD50 | 第24-25页 |
| 3.7 H7N9基因氨基酸变异位点分析 | 第25-27页 |
| 4 讨论 | 第27-30页 |
| 5 小结 | 第30-31页 |
| 第二章 H7N9亚型流感病毒样颗粒制备 | 第31-45页 |
| 1 材料 | 第31-32页 |
| 1.1 病毒和细胞 | 第31页 |
| 1.2 质粒和菌种 | 第31页 |
| 1.3 常用试剂 | 第31-32页 |
| 1.4 昆虫细胞培养基配制 | 第32页 |
| 1.5 仪器与设备 | 第32页 |
| 2 方法 | 第32-38页 |
| 2.1 构建重组杆状病毒质粒 | 第32-35页 |
| 2.2 重组杆状病毒的构建与鉴定 | 第35页 |
| 2.3 重组杆状病毒的拯救与鉴定 | 第35-36页 |
| 2.4 重组杆状病毒滴度的测定 | 第36页 |
| 2.5 H7N9亚型流感病毒样颗粒表达与纯化 | 第36-37页 |
| 2.6 间接免疫荧光法鉴定H7N9蛋白的表达 | 第37页 |
| 2.7 红细胞凝集试验测定H7N9亚型病毒样颗粒血凝滴度 | 第37页 |
| 2.8 H7N9亚型流感病毒样颗粒的电镜观察 | 第37页 |
| 2.9 H7N9亚型流感病毒样颗粒的Western blot鉴定 | 第37-38页 |
| 3 结果 | 第38-43页 |
| 3.1 重组质粒的鉴定 | 第38-39页 |
| 3.2 重组杆状病毒基因组鉴定结果 | 第39-40页 |
| 3.3 重组杆状病毒rBV-NHM滴度的测定 | 第40页 |
| 3.4 红细胞凝集试验测定H7N9亚型流感病毒样颗粒血凝滴度 | 第40-41页 |
| 3.5 间接免疫荧光法鉴定H7N9亚型流感蛋白的表达与病毒样颗粒的电镜观察 | 第41-42页 |
| 3.6 H7N9亚型流感病毒样颗粒的Western blot鉴定 | 第42-43页 |
| 4 讨论 | 第43-44页 |
| 5.小结 | 第44-45页 |
| 第三章 H7N9亚型流感病毒样颗粒实验免疫研究 | 第45-54页 |
| 1 材料 | 第45-46页 |
| 1.1 病毒和细胞 | 第45页 |
| 1.2 实验动物 | 第45页 |
| 1.3 实验设施 | 第45页 |
| 1.4 常用试剂 | 第45-46页 |
| 1.5 常用仪器 | 第46页 |
| 2 实验方法 | 第46-49页 |
| 2.1 小鼠免疫和攻毒 | 第46-47页 |
| 2.2 小鼠血清IgG特异性抗体的检测 | 第47页 |
| 2.3 血凝抑制抗体效价检测 | 第47页 |
| 2.4 小鼠脾淋巴细胞的分离 | 第47-48页 |
| 2.5 ELISpot检测细胞因子 | 第48页 |
| 2.6 免疫原性比较 | 第48-49页 |
| 2.7 统计学分析 | 第49页 |
| 3 结果 | 第49-52页 |
| 3.1 体液免疫检测结果 | 第49-50页 |
| 3.2 脾淋巴细胞ELISpot细胞因子检测结果 | 第50-51页 |
| 3.3 小鼠攻毒试验结果 | 第51-52页 |
| 3.4 免疫血清HI抗体效价的测定 | 第52页 |
| 4 讨论 | 第52-53页 |
| 5 小结 | 第53-54页 |
| 第四章 马抗H7N9亚型流感病毒高免血清的制备及其治疗效果评价 | 第54-61页 |
| 1 材料 | 第54-55页 |
| 1.1 细胞与免疫原 | 第54页 |
| 1.2 试剂与药品 | 第54页 |
| 1.3 实验动物 | 第54-55页 |
| 1.4 实验设施 | 第55页 |
| 1.5 仪器 | 第55页 |
| 2 方法 | 第55-57页 |
| 2.1 免疫原的制备 | 第55页 |
| 2.2 动物免疫及免疫程序的建立 | 第55页 |
| 2.3 高免血清的制备与检验 | 第55-56页 |
| 2.4 高免血清在小鼠体内半衰期的测定 | 第56页 |
| 2.5 高免血清预防和治疗效果评价 | 第56-57页 |
| 3 结果 | 第57-58页 |
| 3.1 高免血清HI抗体效价的测定 | 第57页 |
| 3.2 高免血清的纯净检查 | 第57页 |
| 3.3 高免血清在小鼠体内半衰期的测定结果 | 第57-58页 |
| 3.4 高免血清对小鼠的预防和治疗效果 | 第58页 |
| 4 讨论 | 第58-60页 |
| 5 小结 | 第60-61页 |
| 第五章 H7N9亚型流感精制免疫球蛋白F(ab′)2 的制备与评价 | 第61-73页 |
| 1 材料 | 第61-62页 |
| 1.1 高免血清 | 第61页 |
| 1.2 试剂 | 第61页 |
| 1.3 实验动物 | 第61页 |
| 1.4 实验设施 | 第61页 |
| 1.5 主要仪器 | 第61-62页 |
| 2 方法 | 第62-65页 |
| 2.1 精制免疫球蛋白F(ab′)2 的制备 | 第62页 |
| 2.2 免疫球蛋白F(ab′)2 的质量检验 | 第62-63页 |
| 2.3 免疫球蛋白F(ab′)2 溶血试验 | 第63页 |
| 2.4 免疫球蛋白F(ab′)2 对小鼠急性毒性试验 | 第63-64页 |
| 2.5 免疫球蛋白F(ab′)2 的预防及治疗效果评价 | 第64-65页 |
| 3 结果 | 第65-70页 |
| 3.1 免疫球蛋白F(ab′)2 的层析分离纯化 | 第65-66页 |
| 3.2 免疫球蛋白F(ab′)2 质量检验 | 第66页 |
| 3.3 免疫球蛋白F(ab′)2 溶血试验结果 | 第66-67页 |
| 3.4 免疫球蛋白F(ab′)2 对小鼠急性毒性试验结果 | 第67-69页 |
| 3.5 免疫球蛋白F(ab′)2 的预防和治疗效果评价 | 第69-70页 |
| 4 讨论 | 第70-72页 |
| 5 小结 | 第72-73页 |
| 全文结论 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-81页 |
| 个人简历 | 第81-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
