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蜡梅亲环素基因的克隆与功能初步分析

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-9页
第一章 文献综述第9-17页
   ·亲环素的发现第9页
   ·亲环素的家族成员及结构第9-11页
   ·植物亲环素的生化性质第11-12页
     ·肽脯氨酰顺反异构酶(PPlase)活性第11-12页
     ·能够与环孢霉素A(CsA)特异性结合第12页
     ·核酸酶活性第12页
     ·是一种花粉过敏原第12页
   ·亲环素的生物学功能第12-13页
   ·植物亲环素的生物学功能第13-15页
     ·参与叶绿体的光保护和氧化还原调节第13页
     ·参与植物生长发育第13-14页
     ·参与植物逆境响应第14-15页
   ·植物亲环素基因表达调控第15-17页
     ·亲环素基因在植物中的时空表达第15-16页
     ·影响亲环素基因表达的因素第16-17页
第二章 引言第17-19页
第三章 蜡梅亲环素基因的克隆和分子特征分析第19-35页
   ·实验材料与试剂第19-20页
     ·蜡梅花cDNA文库第19页
     ·菌株与载体第19页
     ·主要试剂第19页
     ·主要设备第19-20页
     ·自配的主要试剂第20页
   ·实验方法第20-25页
     ·EST序列特征分析以及蜡梅亲环素cDNA的获得第20-21页
     ·CpCYP基因cDNA序列真实性鉴定及生物信息学分析第21-25页
   ·结果与分析第25-33页
     ·CpCYP的cDNA的全长的获得第25-26页
     ·CpCYP的cDNA的序列特征第26页
     ·CpCYP的Blast分析和的蛋白同源性分析第26-29页
     ·蜡梅亲环素的二级结构分析第29-30页
     ·蜡梅亲环素的信号肽分析第30页
     ·蜡梅亲环素的疏水性区域分析第30-31页
     ·蜡梅亲环素的卷曲螺旋分析第31页
     ·蜡梅亲环素的跨膜结构分析第31-32页
     ·蜡梅亲环素的磷酸化位点分析第32-33页
   ·讨论第33-35页
第四章 蜡梅亲环素基因的原核表达分析第35-47页
   ·试验材料与试剂第35-38页
     ·试验材料第35-36页
     ·试验主要试剂第36页
     ·主要设备第36页
     ·主要的自配试剂第36-38页
   ·试验方法第38-41页
     ·蜡梅CpCYP基因表达载体的构建第38-40页
     ·CpCYP融合蛋白的表达第40页
     ·SDS-PAGE检测表达产物第40-41页
     ·表达体系优化第41页
   ·结果与分析第41-45页
     ·蜡梅CpCYP基因原核表达载体的构建第41-42页
     ·pET32a/CpCYP融合蛋白的表达第42-43页
     ·表达体系优化第43-45页
   ·讨论第45-47页
第五章 植物表达载体的构建以及转化烟草的研究第47-59页
   ·实验材料第47-49页
     ·植物材料第47页
     ·菌株与载体第47页
     ·主要试剂第47页
     ·自配的主要试剂第47-48页
     ·基本培养基配方第48-49页
   ·实验方法第49-54页
     ·植物表达载体pCAMBIA2301-CpCYP的构建第49-51页
     ·目的基因导入烟草及转化植株的获得第51-52页
     ·转基因烟草的移栽第52页
     ·转基因烟草的检测第52-54页
   ·结果与分析第54-57页
     ·植物表达载体的构建第54页
     ·蜡梅CpCYP基因转烟草以及转化植株的获得第54-57页
   ·讨论第57-59页
第六章 总结第59-61页
   ·结论第59页
   ·下一步研究第59-61页
参考文献第61-67页
缩略词表第67-69页
致谢第69-71页
发表论文和参加的研究课题第71页

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