| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 1 绪论 | 第12-25页 |
| 1.1 秦艽与龙胆苦苷 | 第13-14页 |
| 1.1.1 秦艽 | 第13页 |
| 1.1.2 龙胆苦苷 | 第13-14页 |
| 1.2 龙胆苦苷常用的分析方法 | 第14-15页 |
| 1.3 小分子人工抗原的制备及鉴定 | 第15-21页 |
| 1.3.1 半抗原的设计 | 第15-16页 |
| 1.3.2 载体和佐剂的选择 | 第16-17页 |
| 1.3.3 半抗原和载体的偶联方法 | 第17-19页 |
| 1.3.4 人工抗原的纯化 | 第19-20页 |
| 1.3.5 人工抗原的鉴定方法 | 第20-21页 |
| 1.4 中药小分子常用的免疫分析方法 | 第21-23页 |
| 1.4.1 酶联免疫分析法 | 第22页 |
| 1.4.2 免疫分析色谱柱法 | 第22-23页 |
| 1.4.3 胶体金法 | 第23页 |
| 1.5 立题目的和意义 | 第23-24页 |
| 1.5.1 立题目的 | 第23页 |
| 1.5.2 立题意义 | 第23-24页 |
| 1.6 研究内容 | 第24-25页 |
| 1.6.1 龙胆苦苷人工抗原的合成与鉴定 | 第24页 |
| 1.6.2 龙胆苦苷多克隆抗体的制备及间接GTP-ELISA方法的建立 | 第24页 |
| 1.6.3 间接竞争GTP-ELISA方法的建立 | 第24-25页 |
| 2 龙胆苦苷人工抗原的合成与鉴定 | 第25-40页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-28页 |
| 2.1.1 实验试剂 | 第25-26页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第26-27页 |
| 2.1.3 相关试剂配制 | 第27-28页 |
| 2.2 实验方法与研究内容 | 第28-32页 |
| 2.2.1 羧基化龙胆苦苷的制备 | 第28页 |
| 2.2.2 羧基化龙胆苦苷的鉴定 | 第28-29页 |
| 2.2.3 龙胆苦苷人工抗原GTP-BSA和GTP-OVA的制备与纯化 | 第29-30页 |
| 2.2.4 龙胆苦苷人工抗原GTP-BSA和GTP-OVA的鉴定 | 第30-32页 |
| 2.3 结果与分析 | 第32-38页 |
| 2.3.1 羧基化龙胆苦苷的鉴定 | 第32-34页 |
| 2.3.2 龙胆苦苷人工抗原的鉴定 | 第34-38页 |
| 2.4 讨论 | 第38-39页 |
| 2.4.1 人工抗原的设计原则 | 第38页 |
| 2.4.2 连接臂对免疫效果的影响 | 第38页 |
| 2.4.3 人工抗原鉴定方法的选择 | 第38-39页 |
| 2.5 本章小结 | 第39-40页 |
| 3 龙胆苦苷多克隆抗体的制备及鉴定 | 第40-57页 |
| 3.1 实验材料 | 第40-42页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第40页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第40-41页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第41-42页 |
| 3.1.4 相关试剂配制 | 第42页 |
| 3.2 实验方法与研究内容 | 第42-48页 |
| 3.2.1 饲料配制 | 第42-43页 |
| 3.2.2 实验动物预饲养 | 第43页 |
| 3.2.3 阴性血清的采集 | 第43页 |
| 3.2.4 实验动物免疫 | 第43-44页 |
| 3.2.5 谷胱甘肽对实验动物生长的影响 | 第44页 |
| 3.2.6 龙胆苦苷免疫血清效价监测 | 第44页 |
| 3.2.7 血清采集 | 第44页 |
| 3.2.8 抗体的纯化 | 第44-45页 |
| 3.2.9 间接GTP-ELISA工作条件的优化 | 第45-47页 |
| 3.2.10 间接GTP-ELISA方法测定抗龙胆苦苷多克隆抗体的效价 | 第47-48页 |
| 3.2.11 统计学方法 | 第48页 |
| 3.3 结果与分析 | 第48-55页 |
| 3.3.1 实验动物预饲养生长情况 | 第48页 |
| 3.3.2 谷胱甘肽对实验动物生长的影响 | 第48-50页 |
| 3.3.3 龙胆苦苷免疫血清效价动态监测 | 第50页 |
| 3.3.4 间接GTP-ELISA工作条件的优化 | 第50-53页 |
| 3.3.5 龙胆苦苷多克隆抗体的效价 | 第53-55页 |
| 3.4 讨论 | 第55-56页 |
| 3.4.1 免疫方案的设计 | 第55-56页 |
| 3.4.2 血清的分离及其保存 | 第56页 |
| 3.5 本章小结 | 第56-57页 |
| 4 间接竞争GTP-ELISA方法的建立及优化 | 第57-67页 |
| 4.1 实验材料与仪器设备 | 第57页 |
| 4.1.1 实验试剂 | 第57页 |
| 4.1.2 仪器设备 | 第57页 |
| 4.2 实验方法与研究内容 | 第57-61页 |
| 4.2.1 间接竞争GTP-ELISA方法的初步建立 | 第57-58页 |
| 4.2.2 间接竞争GTP-ELISA方法工作条件的优化 | 第58-59页 |
| 4.2.3 抗血清的间接竞争GTP-ELISA方法的建立 | 第59-60页 |
| 4.2.4 统计学方法 | 第60-61页 |
| 4.3 结果与分析 | 第61-65页 |
| 4.3.1 间接竞争GTP-ELISA方法的最适工作条件 | 第61-63页 |
| 4.3.2 抗血清的间接竞争GTP-ELISA法的测定结果 | 第63-65页 |
| 4.4 讨论 | 第65-66页 |
| 4.4.1 优化间接竞争GTP-ELISA方法的必要性 | 第65页 |
| 4.4.2 反应介质对抗原-抗体结合反应的影响 | 第65-66页 |
| 4.5 本章小结 | 第66-67页 |
| 5 总结与展望 | 第67-69页 |
| 5.1 总结 | 第67页 |
| 5.2 创新点 | 第67页 |
| 5.3 展望 | 第67-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-77页 |
| 附录 缩写表 | 第77-78页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第78-80页 |
