摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
第一章 研究背景综述 | 第11-55页 |
第一节 脂肪组织胰岛素抵抗作用机制的研究进展 | 第12-33页 |
一. 胰岛素抵抗 | 第12-16页 |
1. 胰岛素简介 | 第12-15页 |
1.1 胰岛素的结构及功能 | 第12-13页 |
1.2 胰岛素的作用机制 | 第13-15页 |
2. 胰岛素抵抗 | 第15-16页 |
2.1 胰岛素抵抗的定义 | 第15页 |
2.2 胰岛素抵抗发生原因 | 第15-16页 |
二. 肥胖与脂肪组织 | 第16-23页 |
1. 肥胖 | 第16-17页 |
2. 脂肪组织 | 第17-23页 |
2.1 脂联素 | 第18-19页 |
2.2 瘦素 | 第19页 |
2.3 抵抗素 | 第19-20页 |
2.4 肿瘤坏死因子 | 第20页 |
2.5 内脏脂肪因子 | 第20页 |
2.6 白介素-6 | 第20-21页 |
2.7 单核蛋白趋化因子 | 第21页 |
2.8 补体D | 第21页 |
2.9 纤溶酶原激活物抑制物-1 | 第21页 |
2.10 血管紧张素Ⅱ | 第21-22页 |
2.11 自由脂肪酸 | 第22-23页 |
三. 脂肪细胞、肥胖与胰岛素抵抗 | 第23-26页 |
参考文献 | 第26-33页 |
第二节 植物miRNAs在动物中的检测分析及生物学功能研究 | 第33-55页 |
一. Solexa测序技术的原理及其应用 | 第33-37页 |
1. Solexa测序技术的创立 | 第33页 |
2. Solexa测序技术的基本原理 | 第33-35页 |
3. Solexa技术的特点 | 第35页 |
4. Solexa技术的应用 | 第35-37页 |
二. miRNA研究进展概述 | 第37-50页 |
1. miRNA的定义及发现历程 | 第37-39页 |
1.1 miRNA的定义 | 第37-38页 |
1.2 miRNA的发现历程 | 第38-39页 |
2. miRNA的成熟过程 | 第39-41页 |
3. miRNA的发现方法、鉴定与检测 | 第41-44页 |
3.1 miRNA的发现方法 | 第41-42页 |
3.2 miRNA的界定 | 第42页 |
3.3 miRNA的检测 | 第42-44页 |
4. miRNA的作用机制 | 第44-47页 |
4.1 miRNA的作用机制 | 第44页 |
4.2 miRNA指导靶mRNA的切割 | 第44-45页 |
4.3 miRNA指导翻译抑制 | 第45页 |
4.4 靶分子的识别 | 第45-47页 |
5. 植物miRNA与动物miRNA的异同 | 第47-49页 |
5.1 植物中普遍存在miRNA | 第47页 |
5.2 植物miRNA的基本性质 | 第47-48页 |
5.3 植物miRNA与动物miRNA的不同 | 第48-49页 |
6. miRNA的生物学意义及前景展望 | 第49-50页 |
6.1 miRNA的生物学意义 | 第49-50页 |
6.2 前景及展望 | 第50页 |
参考文献 | 第50-55页 |
第二章 实验部分 | 第55-113页 |
第一节 FFA在脂肪组织胰岛素抵抗中的作用研究 | 第56-78页 |
一. 引言 | 第56-57页 |
二. 材料和方法 | 第57-65页 |
1. 实验材料 | 第57-58页 |
1.1 细胞株 | 第57页 |
1.2 主要试剂 | 第57-58页 |
1.3 主要仪器 | 第58页 |
2. 实验方法 | 第58-65页 |
2.1 细胞培养 | 第58-59页 |
2.2 基因组芯片实验 | 第59-61页 |
2.3 RNA分离和实时定量RT-PCR方法分析基因表达水平 | 第61-63页 |
2.4 FFA刺激实验 | 第63页 |
2.5 Elisa Kit检测蛋白水平 | 第63-64页 |
2.6 Western blotting检测蛋白表达水平 | 第64页 |
2.7 数值的统计学分析 | 第64-65页 |
三. 实验结果 | 第65-73页 |
1. 巨噬细胞促进脂肪细胞的胰岛素抵抗作用 | 第65-67页 |
2. FFA降低脂肪细胞的胰岛素敏感性,增加巨噬细胞TNF-α的分泌 | 第67-71页 |
3. 自由脂肪酸刺激巨噬细胞分泌TNF-α,进而降低脂肪细胞对胰岛素的敏感性 | 第71-73页 |
四. 讨论 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-78页 |
第二节 植物miRNAs在动物中的检测分析及生物学功能研究 | 第78-113页 |
一. 引言 | 第78-79页 |
二. 材料和方法 | 第79-95页 |
1. 实验材料 | 第79-82页 |
1.1 Solexa测序主要试剂 | 第79-80页 |
1.2 配置试剂 | 第80-81页 |
1.3 其他试剂 | 第81页 |
1.4 仪器设备 | 第81-82页 |
2. 实验方法 | 第82-95页 |
2.1 Solexa测序 | 第82-93页 |
2.2 miRNA的qRT-PCR定量检测 | 第93-94页 |
2.3 Northern blotting检测血清中植物miRNAs | 第94-95页 |
2.4 数值的统计学分析 | 第95页 |
三.实验结果 | 第95-111页 |
1. 人/动物血清中存在动物miRNAs和植物miRNAs | 第95-102页 |
1.1 人/动物血清中存在内源性动物miRNAs | 第95-98页 |
1.2 人/动物血清中存在外源性植物miRNAs | 第98-102页 |
2. 小鼠各组织中存在动物miRNAs和植物miRNAs | 第102-111页 |
2.1 小鼠各组织中存在特异高富含动物miRNAs | 第102-110页 |
2.2 小鼠组织中存在植物miRNAs | 第110-111页 |
四. 讨论 | 第111-112页 |
参考文献 | 第112-113页 |
Publications | 第113-115页 |
致谢 | 第115-116页 |