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可用于Aβ检测的双抗体夹心ELISA方法研究

致谢第5-6页
中文摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
1 引言第13-17页
    1.1 背景和意义第13页
    1.2 体液Aβ的研究现状和存在问题第13-16页
        1.2.1 脑脊液中Aβ的研究现状和存在问题第13-14页
        1.2.2 外周血中Aβ的研究现状和存在问题第14-15页
        1.2.3 可特异性识别Aβ的抗体第15-16页
    1.3 研究策略第16-17页
2 材料和方法第17-31页
    2.1 材料第17-22页
        2.1.1 细胞株第17页
        2.1.2 试剂盒与耗材第17页
        2.1.3 主要试剂和工具酶第17-18页
        2.1.4 主要实验仪器第18-19页
        2.1.5 主要溶液配制第19-22页
            2.1.5.1 细胞培养相关溶液的配制第19页
            2.1.5.2 透析相关溶液的配制第19-20页
            2.1.5.3 ELISA相关试剂的配制第20-21页
            2.1.5.4 蛋白电泳相关溶液配制第21-22页
    2.2 方法第22-31页
        2.2.1 细胞培养第22-23页
        2.2.2 Aβ标准品的制备和鉴定第23-24页
        2.2.3 单抗大量纯化第24-25页
        2.2.4 多克隆抗血清制备第25页
        2.2.5 抗体特异性鉴定第25-26页
        2.2.6 抗体浓度、滴度和灵敏度测定第26-27页
            2.2.6.1 抗体浓度测定第26页
            2.2.6.2 抗体滴度和灵敏度测定第26-27页
        2.2.7 抗体标记第27-28页
            2.2.7.1 透析第27-28页
            2.2.7.2 标记第28页
        2.2.8 双抗体夹心ELISA筛选最佳抗体配对第28-31页
            2.2.8.1 双抗体夹心ELISA包被条件优化第28-29页
            2.2.8.2 双抗体夹心ELISA第29-30页
            2.2.8.3 双抗体夹心ELISA灵敏度检测第30-31页
3 结果第31-45页
    3.1 标准品性质鉴定第31-33页
        3.1.1 SDS-PAGE检测Aβ标准品制备情况第31页
        3.1.2 负染电镜观察Aβ标准品形貌第31-32页
        3.1.3 间接ELISA鉴定Aβ标准品免疫反应性第32-33页
    3.2 候选抗体的性质鉴定第33-37页
        3.2.1 间接ELISA鉴定候选抗体的特异性第33-34页
        3.2.2 抗体滴度第34-35页
        3.2.3 抗体灵敏度第35-37页
    3.3 抗体标记及活性检测第37-39页
    3.4 抗体配对筛选结果第39-45页
        3.4.1 DAS-ELISA包被条件优化第39页
        3.4.2 可同时识别Aβ40和Aβ42的抗体配对第39-41页
        3.4.3 Aβ40特异的抗体配对第41页
        3.4.4 Aβ42特异的抗体配对第41-44页
        3.4.5 双抗体夹心ELISA的灵敏度第44-45页
4 讨论第45-48页
5 结论第48-49页
参考文献第49-52页
附录第52-55页
    附录A第52-54页
    附录B第54-55页
硕士期间发表论文情况第55-56页
作者简历第56-58页
学位论文数据集第58页

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