致谢 | 第5-6页 |
中文摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
1 引言 | 第13-17页 |
1.1 背景和意义 | 第13页 |
1.2 体液Aβ的研究现状和存在问题 | 第13-16页 |
1.2.1 脑脊液中Aβ的研究现状和存在问题 | 第13-14页 |
1.2.2 外周血中Aβ的研究现状和存在问题 | 第14-15页 |
1.2.3 可特异性识别Aβ的抗体 | 第15-16页 |
1.3 研究策略 | 第16-17页 |
2 材料和方法 | 第17-31页 |
2.1 材料 | 第17-22页 |
2.1.1 细胞株 | 第17页 |
2.1.2 试剂盒与耗材 | 第17页 |
2.1.3 主要试剂和工具酶 | 第17-18页 |
2.1.4 主要实验仪器 | 第18-19页 |
2.1.5 主要溶液配制 | 第19-22页 |
2.1.5.1 细胞培养相关溶液的配制 | 第19页 |
2.1.5.2 透析相关溶液的配制 | 第19-20页 |
2.1.5.3 ELISA相关试剂的配制 | 第20-21页 |
2.1.5.4 蛋白电泳相关溶液配制 | 第21-22页 |
2.2 方法 | 第22-31页 |
2.2.1 细胞培养 | 第22-23页 |
2.2.2 Aβ标准品的制备和鉴定 | 第23-24页 |
2.2.3 单抗大量纯化 | 第24-25页 |
2.2.4 多克隆抗血清制备 | 第25页 |
2.2.5 抗体特异性鉴定 | 第25-26页 |
2.2.6 抗体浓度、滴度和灵敏度测定 | 第26-27页 |
2.2.6.1 抗体浓度测定 | 第26页 |
2.2.6.2 抗体滴度和灵敏度测定 | 第26-27页 |
2.2.7 抗体标记 | 第27-28页 |
2.2.7.1 透析 | 第27-28页 |
2.2.7.2 标记 | 第28页 |
2.2.8 双抗体夹心ELISA筛选最佳抗体配对 | 第28-31页 |
2.2.8.1 双抗体夹心ELISA包被条件优化 | 第28-29页 |
2.2.8.2 双抗体夹心ELISA | 第29-30页 |
2.2.8.3 双抗体夹心ELISA灵敏度检测 | 第30-31页 |
3 结果 | 第31-45页 |
3.1 标准品性质鉴定 | 第31-33页 |
3.1.1 SDS-PAGE检测Aβ标准品制备情况 | 第31页 |
3.1.2 负染电镜观察Aβ标准品形貌 | 第31-32页 |
3.1.3 间接ELISA鉴定Aβ标准品免疫反应性 | 第32-33页 |
3.2 候选抗体的性质鉴定 | 第33-37页 |
3.2.1 间接ELISA鉴定候选抗体的特异性 | 第33-34页 |
3.2.2 抗体滴度 | 第34-35页 |
3.2.3 抗体灵敏度 | 第35-37页 |
3.3 抗体标记及活性检测 | 第37-39页 |
3.4 抗体配对筛选结果 | 第39-45页 |
3.4.1 DAS-ELISA包被条件优化 | 第39页 |
3.4.2 可同时识别Aβ40和Aβ42的抗体配对 | 第39-41页 |
3.4.3 Aβ40特异的抗体配对 | 第41页 |
3.4.4 Aβ42特异的抗体配对 | 第41-44页 |
3.4.5 双抗体夹心ELISA的灵敏度 | 第44-45页 |
4 讨论 | 第45-48页 |
5 结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-52页 |
附录 | 第52-55页 |
附录A | 第52-54页 |
附录B | 第54-55页 |
硕士期间发表论文情况 | 第55-56页 |
作者简历 | 第56-58页 |
学位论文数据集 | 第58页 |