| 摘要 | 第5-6页 |
| abstract | 第6页 |
| 第一章 绪论 | 第10-16页 |
| 1.1 哺乳动物白介素 6（IL-6）家族成员及其受体系统 | 第10-13页 |
| 1.1.1 IL-6 家族概述 | 第10页 |
| 1.1.2 IL-6 受体（IL-6R）系统 | 第10-13页 |
| 1.2 硬骨鱼中IL-6 及IL-6R的研究现状 | 第13-15页 |
| 1.2.1 硬骨鱼IL-6 研究概述 | 第13-14页 |
| 1.2.2 硬骨鱼IL-6R研究现状 | 第14-15页 |
| 1.3 研究的内容和意义 | 第15-16页 |
| 第二章 草鱼IL-6 蛋白的重组表达 | 第16-32页 |
| 2.1 实验材料 | 第16-18页 |
| 2.1.1 实验动物、菌株和质粒 | 第16页 |
| 2.1.2 实验仪器及设备 | 第16-17页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第17页 |
| 2.1.4 主要溶液配制 | 第17-18页 |
| 2.2 实验方法与操作 | 第18-25页 |
| 2.2.1 运用毕赤酵母真核表达系统表达草鱼IL-6 蛋白 | 第18-25页 |
| 2.2.2 草鱼IL-6 抗体制备及验证 | 第25页 |
| 2.3 实验结果 | 第25-30页 |
| 2.3.1 获得草鱼IL-6 蛋白 | 第25-29页 |
| 2.3.2 草鱼IL-6 抗体具有特异性 | 第29-30页 |
| 2.4 讨论 | 第30-32页 |
| 第三章 IL-6R的分子克隆及其组织分布 | 第32-46页 |
| 3.1 实验材料 | 第32页 |
| 3.2 实验方法与操作 | 第32-39页 |
| 3.2.1 草鱼各组织RNA的提取以及其CDNA的制备 | 第32页 |
| 3.2.2 草鱼IL-6R全长CDS部分序列扩增 | 第32-35页 |
| 3.2.3 草鱼IL-6R全长CDNA末端扩增 | 第35-37页 |
| 3.2.4 草鱼IL-6R编码序列确认 | 第37-38页 |
| 3.2.5 草鱼IL-6R氨基酸序列分析 | 第38-39页 |
| 3.2.6 草鱼IL-6R氨基酸多序列比对与系统发育树的构建 | 第39页 |
| 3.2.7 IL-6R MRNA在草鱼各组织中的分布情况 | 第39页 |
| 3.3 实验结果 | 第39-45页 |
| 3.3.1 草鱼IL-6R全长CDS序列及其氨基酸序列信息 | 第39-43页 |
| 3.3.2 草鱼IL-6R系统发育树的构建 | 第43-44页 |
| 3.3.3 草鱼IL-6R的组织分布 | 第44-45页 |
| 3.4 讨论 | 第45-46页 |
| 第四章 草鱼IL-6R胞外区（sIL-6R）蛋白的重组表达 | 第46-53页 |
| 4.1 实验材料 | 第46-47页 |
| 4.2 实验方法与操作 | 第47-49页 |
| 4.2.1 运用变复性的方法获得草鱼sIL-6R蛋白 | 第47-49页 |
| 4.2.2 草鱼IL-6R抗体的制备及验证 | 第49页 |
| 4.3 实验结果 | 第49-52页 |
| 4.3.1 获得草鱼sIL-6R重组蛋白 | 第49-51页 |
| 4.3.2 验证草鱼IL-6R抗体的特异性 | 第51-52页 |
| 4.4 讨论 | 第52-53页 |
| 第五章 免疫刺激下草鱼IL-6R的基因和蛋白分析 | 第53-62页 |
| 5.1 实验材料 | 第53-54页 |
| 5.2 实验方法与操作 | 第54-56页 |
| 5.2.1 嗜水气单胞杆菌感染草鱼 | 第54页 |
| 5.2.2 嗜水气单胞杆菌感染对IL-6R蛋白表达的影响 | 第54-55页 |
| 5.2.3 草鱼头肾白细胞的分离、培养及LPS、POLY I:C进行处理 | 第55页 |
| 5.2.4 实时荧光定量PCR | 第55-56页 |
| 5.2.5 ELISA方法检测sIL-6R蛋白分泌情况 | 第56页 |
| 5.3 实验结果 | 第56-60页 |
| 5.3.1 嗜水气单胞杆菌感染后上调IL-6R蛋白的表达 | 第56-57页 |
| 5.3.2 LPS、POLY I:C对IL-6R MRNA的表达具有上调作用 | 第57-59页 |
| 5.3.3 POLY I:C对sIL-6R蛋白产生具有上调作用 | 第59-60页 |
| 5.4 讨论 | 第60-62页 |
| 第六章 草鱼s IL-6R对草鱼IL-6 免疫功能的影响 | 第62-66页 |
| 6.1 实验材料 | 第62页 |
| 6.2 实验方法与操作 | 第62-63页 |
| 6.2.1 草鱼IL-6 重组蛋白与s IL-6R重组蛋白体外结合实验 | 第62-63页 |
| 6.2.2 草鱼s IL-6R对草鱼IL-6 免疫功能的影响 | 第63页 |
| 6.3 实验结果 | 第63-65页 |
| 6.3.1 草鱼IL-6 重组蛋白与s IL-6R重组蛋白能够在体外进行结合 | 第63页 |
| 6.3.2 草鱼s IL-6R能够促进IL-6 的免疫调节功能 | 第63-65页 |
| 6.4 讨论 | 第65-66页 |
| 第七章 结论与展望 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 攻读硕士学位期间取得的成果 | 第74-75页 |
