| 摘要 | 第7-8页 |
| 文献综述 | 第8-14页 |
| 1 Chicken-CD40L及其受体概述 | 第8-10页 |
| 1.1 Chicken-CD40L概述 | 第8-10页 |
| 1.2 Chicken-CD40L与其受体CD40的作用机理 | 第10页 |
| 2 Chicken-CD40L的研究进展 | 第10-12页 |
| 3 免疫增效剂的发展现状 | 第12-13页 |
| 4 真核表达系统的概述 | 第13-14页 |
| 前言 | 第14-15页 |
| 试验材料及方法 | 第15-32页 |
| 1 试剂材料 | 第15-16页 |
| 1.1 试验动物、菌株及疫苗 | 第15页 |
| 1.2 主要试剂及材料 | 第15-16页 |
| 1.3 主要试验仪器 | 第16页 |
| 2 相关试剂配制 | 第16-19页 |
| 2.1 蛋白表达所需试剂配制 | 第16-17页 |
| 2.2 蛋白纯化所需试剂配制 | 第17-18页 |
| 2.3 疫苗的准备 | 第18页 |
| 2.4 血凝试验(HI)及血凝抑制试验(HA)试剂准备 | 第18-19页 |
| 3 试验方法 | 第19-32页 |
| 3.1 目的基因的获得 | 第19页 |
| 3.2 Insert Ⅰ的获得 | 第19-21页 |
| 3.3 Insert Ⅱ的获得 | 第21-24页 |
| 3.4 合成二聚体 | 第24页 |
| 3.5 重组酵母的构建 | 第24-25页 |
| 3.6 重组酵母的筛选及鉴定 | 第25-26页 |
| 3.7 重组蛋白Chicken-CD40L在毕赤酵母中的诱导表达、鉴定及纯化 | 第26-29页 |
| 3.8 重组蛋白Chicken-CD40L的浓缩及保存 | 第29页 |
| 3.9 重组蛋白Chicken-CD40L生物学功能研究 | 第29-31页 |
| 3.10 统计学分析 | 第31-32页 |
| 试验结果 | 第32-47页 |
| 1 获取Chicken-CD40L目的基因 | 第32-34页 |
| 1.1 获得Chicken-CD40L-Insert Ⅰ目的基因 | 第32页 |
| 1.2 获取Chicken-CD40L-Insert Ⅱ目的基因 | 第32-33页 |
| 1.3 表达载体pwPICZalpha的回收鉴定 | 第33页 |
| 1.4 重组质粒pwPICZalpha-Chicken-CD40L-Insert Ⅱ的鉴定结果 | 第33页 |
| 1.5 二聚体的合成及鉴定 | 第33-34页 |
| 2 重组酵母的构建、筛选与鉴定 | 第34-35页 |
| 3 重组蛋白Chicken-CD40L的鉴定 | 第35-37页 |
| 3.1 SDS-PAGE、Western blot验证重组蛋白Chicken-CD40L | 第35页 |
| 3.2 SDS-PAGE、Western blot验证重组蛋白Chicken-CD40L多聚体 | 第35-37页 |
| 4 重组蛋白Chicken-CD40L的纯化 | 第37-38页 |
| 4.1 表达产物经Ni-NTA Resin柱分离纯化结果 | 第37-38页 |
| 4.2 表达产物经强阳离子交换柱分离纯化结果 | 第38页 |
| 5 重组蛋白Chicken-CD40L的浓缩结果 | 第38-39页 |
| 6 重组蛋白Chicken-CD40L功能验证 | 第39-47页 |
| 6.1 新城疫抗体效价检测结果 | 第39-41页 |
| 6.2 血清SOD活力测定结果 | 第41-43页 |
| 6.3 血清GSH-PX测定结果 | 第43-45页 |
| 6.4 血清MDA测定结果 | 第45-47页 |
| 分析与讨论 | 第47-51页 |
| 1 重组Chicken-CD40L蛋白的真核表达 | 第47-48页 |
| 2 重组Chicken-CD40L蛋白糖基化现象 | 第48-49页 |
| 3 重组Chicken-CD40L蛋白生物学功能验证 | 第49-51页 |
| 全文结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| Abstract | 第57页 |
| 致谢 | 第59页 |
