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BAC介导转FSHa/b基因公猪的分子鉴定和生物安全评价

摘要第1-7页
Abstract第7-8页
缩略语第8-10页
第一章 文献综述第10-31页
   ·促卵泡素第10-16页
     ·促卵泡素的结构和性质第10页
     ·促卵泡素合成分泌的调控第10-11页
     ·促卵泡素的功能第11-14页
     ·FSHb与产仔数的关系第14-15页
     ·促卵泡素的应用第15-16页
   ·细菌人工染色体第16-17页
     ·细菌人工染色体的结构特点第16页
     ·基于细菌人工染色体的转基因研究第16-17页
   ·转基因动物制备技术第17-23页
     ·原核显微注射法第17-18页
     ·精子载体法第18页
     ·逆转录病毒法第18页
     ·转座子介导的基因转移法第18-19页
     ·体细胞核移植法第19-20页
     ·锌指核酸酶基因编辑技术第20页
     ·转录激活因子样效应核酸酶基因编辑技术第20-22页
     ·规律成簇间隔短回文重复序列/Cas系统基因编辑技术第22-23页
   ·转基因动物的应用第23-25页
     ·动物品种改良与培育第23页
     ·异种器官移植第23-24页
     ·生物反应器和生物医药第24页
     ·人类疾病的动物模型第24-25页
   ·转基因动物的生物安全研究第25-29页
     ·转基因动物生物安全的定义和意义第25页
     ·转基因动物的生物安全研究原则和分子特征检测技术第25-26页
     ·转基因动物生物安全的内容第26-28页
     ·国际转基因动物生物安全的管理现状第28-29页
   ·本研究的目的和意义第29-31页
第二章 研究正文第31-66页
   ·引言第31页
   ·材料与方法第31-39页
     ·实验动物第31页
     ·DNA的提取第31-33页
       ·猪DNA及蚯蚓DNA提取第31页
       ·猪肠道微生物DNA提取第31-32页
       ·土壤微生物DNA提取第32-33页
     ·RNA的提取第33页
     ·c DNA的合成第33-34页
     ·蛋白提取及定量第34页
     ·外源基因PCR检测第34-35页
     ·拷贝数检测第35页
       ·构建GAPDH-FSHa和GAPDH-FSHb双基因同质粒载体第35页
       ·绝对定量检测FSHa和FSHb基因的拷贝数第35页
     ·基因表达分析(RT-q PCR)第35-36页
     ·Western blot第36-37页
     ·表型测定第37-38页
     ·16S r RNA菌群高通量测序第38-39页
     ·基因水平漂移检测第39页
   ·实验结果第39-61页
     ·转基因猪的PCR检测和拷贝数验证第39-41页
     ·FSH基因的表达分析第41-43页
     ·转基因公猪的繁殖性状分析第43-46页
     ·转基因公猪的健康状况分析第46-54页
     ·16S r RNA菌群高通量测序第54-58页
     ·基因水平转移分析第58-61页
   ·讨论第61-65页
     ·FSHa/b转基因猪的分子鉴定第61-63页
     ·FSHa/b转基因公猪的繁殖性能第63页
     ·FSHa/b转基因猪的生物安全评价第63-65页
   ·结论第65页
   ·后期工作展望第65-66页
参考文献第66-76页
附录第76-79页
 附录1 本研究中的引物序列第76-78页
 附录2 在读期间发表论文第78-79页
致谢第79页

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