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甘蔗应答黑穗病菌侵染的降解组分析及抗性相关miRNA靶标挖掘

摘要第1-12页
Abstract第12-15页
第一章 文献综述第15-23页
 1 甘蔗黑穗病第15-16页
   ·甘蔗黑穗病的发生与危害第15页
   ·甘蔗抗黑穗病性研究第15-16页
 2 防御酶活性与植物抗病性第16-18页
   ·活性氧代谢途径第16-17页
   ·苯丙烷代谢途径第17-18页
 3 植物miRNA第18-21页
   ·miRNA的形成和作用机制第18页
   ·植物miRNA的生物学功能研究第18-20页
     ·植物miRNA参与发育调控第18-19页
     ·植物miRNA参与非生物胁迫应答第19页
     ·植物miRNA参与生物胁迫应答第19-20页
   ·植物miRNA及其靶基因的预测及验证第20-21页
 4 本研究的目的与意义第21-22页
 5 技术路线第22-23页
第二章 黑穗病菌侵染后甘蔗活性氧代谢及苯丙烷代谢途径关键酶的活性变化第23-38页
 1 材料与方法第23-29页
   ·植物材料及处理第23页
   ·甘蔗基因组DNA提取第23-24页
   ·黑穗病菌拷贝数鉴定第24页
   ·酶活性测定第24-28页
     ·粗酶液提取第24-25页
     ·活性氧代谢途径第25-27页
       ·过氧化物酶(POD)活性测定第25页
       ·超氧化物歧化酶(SOD)活性测定第25-26页
       ·过氧化氢酶(CAT)活性测定第26-27页
     ·苯丙烷代谢途径第27-28页
       ·多酚氧化酶(PPO)活性测定第27页
       ·苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性测定第27-28页
       ·酪氨酸解氨酶(TAL)第28页
   ·数据处理第28-29页
 2 结果与分析第29-36页
   ·甘蔗基因组DNA的质量检测第29页
   ·甘蔗黑穗病菌菌量分析第29-30页
   ·黑穗病菌胁迫下甘蔗活性氧代谢途径关键酶活性变化第30-32页
     ·过氧化物酶(POD)活性变化第30-31页
     ·过氧化物歧化酶(SOD)活性变化第31页
     ·过氧化氢酶(CAT)活性变化第31-32页
   ·黑穗病菌胁迫下甘蔗苯丙烷代谢途径关键酶活性变化第32-34页
     ·多酚氧化酶(PPO)活性变化第32-33页
     ·苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性变化第33页
     ·酪氨酸解氨酶(TAL)活性变化第33-34页
   ·黑穗病菌侵染初期病原菌菌量与活性氧代谢和苯丙烷代谢途径关键酶活性变化的综合分析第34-36页
 3 讨论第36-38页
   ·甘蔗黑穗病菌的菌量分析第36页
   ·黑穗病菌侵染初期酶活性的变化分析第36-38页
     ·活性氧代谢关键酶应答甘蔗黑穗病菌侵染的调控模式第36-37页
     ·苯丙烷代谢关键酶应答甘蔗黑穗病菌侵染的调控模式第37-38页
第三章 黑穗病菌侵染初期甘蔗降解组测序分析第38-60页
 1 材料与方法第38-42页
   ·植物材料及处理第38页
   ·主要使用的数据库第38-39页
   ·总RNA提取及质量检测第39页
   ·降解组文库构建、测序及生物信息学分析第39-40页
   ·靶标基因的预测及降解位点分析第40-41页
   ·靶标基因的功能注释第41页
   ·靶标基因的表达分析第41页
   ·靶标基因的差异表达分析第41-42页
   ·抗病性相关基因鉴定第42页
 2 结果与分析第42-58页
   ·总RNA的质量检测第42页
   ·降解组测序数据的概述第42-43页
   ·靶标基因的鉴定及分类第43-44页
   ·降解位点的特异性和多样性第44-45页
   ·靶标基因的注释及功能分类第45-46页
   ·靶标基因的差异表达分析第46-56页
     ·差异表达靶标基因的筛选第46-47页
     ·COG/GO分析第47-51页
     ·KEGG分析第51-56页
   ·抗病相关靶标基因的鉴定第56-58页
     ·YC05-179和ROC22共有的连续性差异表达基因分析第56-57页
     ·YC05-179/ROC22特有的连续性差异基因表达分析第57页
     ·YC05-179连续性-ROC22非连续性差异基因表达分析第57-58页
     ·YC05-179特有的非连续性差异表达基因第58页
 3 讨论第58-60页
第四章 抗病相关靶标基因及其对应miRNA的表达分析第60-79页
 1 材料与方法第60-70页
   ·植物材料及处理第60页
   ·主要试剂第60页
   ·总RNA的提取与检测第60-61页
   ·靶标基因的qRT-PCR表达验证第61-65页
     ·引物设计第61-64页
     ·cDNA合成第64页
       ·总RNA中DNA的去除第64页
       ·反转录第64页
     ·qRT-PCR表达验证第64-65页
   ·靶标基因对应miRNA的qRT-PCR表达验证第65-70页
     ·引物设计第65-69页
     ·反转录第69页
     ·qRT-PCR表达验证第69-70页
 2 结果与分析第70-75页
   ·靶标基因和miRNA的引物特异性分析第70-72页
   ·靶标基因和相应miRNA的表达分析第72-75页
 3 讨论第75-79页
   ·木质素生物合成途径第75-76页
   ·泛素介导的蛋白降解途径第76页
   ·植物与病原菌互作途径第76-77页
   ·植物激素信号转导途径第77-78页
   ·抗性相关转录因子第78页
   ·miRNA反馈调节第78-79页
第五章 结论与展望第79-81页
参考文献第81-94页
致谢第94页

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