| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-16页 |
| 引言 | 第16-18页 |
| 第一部分 研究背景 | 第18-38页 |
| 第一章 肿瘤基因治疗概述 | 第18-23页 |
| 一、 基因沉默疗法 | 第18-19页 |
| 二、 抑癌基因疗法 | 第19-21页 |
| 三、 免疫基因疗法 | 第21-22页 |
| 四、 自杀基因治疗 | 第22页 |
| 五、 抗肿瘤血管生成基因疗法 | 第22-23页 |
| 六、 肿瘤多药耐药基因疗法 | 第23页 |
| 第二章 肿瘤自杀基因治疗研究进展 | 第23-29页 |
| 一、 自杀基因及自杀基因治疗系统 | 第23页 |
| 二、 自杀基因疗法的旁杀伤效应及机制 | 第23-26页 |
| 三、 肿瘤自杀基因疗法的增效方法 | 第26-29页 |
| 第三章 中医学对肿瘤的认识及治疗法则 | 第29-32页 |
| 第四章 木犀草素、芹菜素及槲皮素药理作用及抗肿瘤作用 | 第32-38页 |
| 一、 木犀草素与肿瘤的相关研究 | 第32-34页 |
| 二、 芹菜素与肿瘤的相关研究 | 第34-35页 |
| 三、 槲皮素与肿瘤的相关研究 | 第35-38页 |
| 第二部分 实验研究 | 第38-70页 |
| 第一章 人黑色素瘤细胞HSV1-tk/GCV肿瘤自杀基因治疗系统的构建 | 第38-53页 |
| 第一节 材料 | 第38-40页 |
| 第二节 方法 | 第40-46页 |
| 一、 RT-PCR扩增人tk读码框 | 第40-43页 |
| 二、 慢病毒载体质粒pLV-tk/GFP的构建和鉴定 | 第43-45页 |
| 三、 细胞培养、传代、冻存、复苏 | 第45页 |
| 四、 重组慢病毒的包装与感染 | 第45-46页 |
| 五、 A375细胞感染及稳定表达株的筛选 | 第46页 |
| 六、 A375-tk/GFP活性检测 | 第46页 |
| 七、 统计分析 | 第46页 |
| 第三节 结果 | 第46-51页 |
| 一、 绿色荧光蛋白示踪的HSV1-tk/GCV系统重组慢病毒载体的构建 | 第46-48页 |
| 二、 A375细胞感染及稳定表达株的筛选 | 第48-49页 |
| 三、 A375-tk/GFP活性检测 | 第49-51页 |
| 第四节 讨论 | 第51-53页 |
| 一、 绿色荧光蛋白示踪的HSV1-tk/GCV系统重组慢病毒载体的构建 | 第51页 |
| 二、 人黑色素瘤细胞A375 HSV1-tk/GCV肿瘤自杀基因治疗系统的构建 | 第51-53页 |
| 第二章 木犀草素、芹菜素及槲皮素对人黑色素瘤细胞间缝隙连接通讯的作用 | 第53-63页 |
| 第一节 材料 | 第53-54页 |
| 第二节 方法 | 第54-57页 |
| 一、 A375生长曲线绘制 | 第54页 |
| 二、 木犀草素、芹菜素及槲皮素对A375的生长的影响 | 第54页 |
| 三、 荧光示踪法和流式细胞技术观察GJIC功能 | 第54-55页 |
| 四、 Western Blot检测Cx43、Cx26表达 | 第55-56页 |
| 五、 统计方法 | 第56-57页 |
| 第三节 结果 | 第57-62页 |
| 一、 A375细胞的增殖测定 | 第57页 |
| 二、 木犀草素、芹菜素及槲皮素对A375的生长的影响 | 第57-58页 |
| 三、 荧光示踪法及流式细胞术检测药物对A375细胞GJIC功能的影响 | 第58-61页 |
| 四、 Western Blot检测Cx43、Cx26表达 | 第61-62页 |
| 第四节 讨论 | 第62-63页 |
| 第三章 木犀草素、芹菜素及槲皮素对人黑色素瘤细胞自杀基因的增效作用 | 第63-70页 |
| 第一节 材料 | 第63-64页 |
| 第二节 方法 | 第64-65页 |
| 一、 确定tk混合比例 | 第64页 |
| 二、 检测木犀草素、芹菜素及槲皮素对自杀基因治疗系统的增效作用 | 第64页 |
| 三、 PI单染法检测细胞凋亡 | 第64-65页 |
| 四、 统计分析 | 第65页 |
| 第三节 结果 | 第65-69页 |
| 一、 确定tk混合比例 | 第65页 |
| 二、 检测木犀草素、芹菜素及槲皮素对自杀基因治疗系统的增效作用 | 第65-66页 |
| 三、 PI单染法检测细胞凋亡 | 第66-69页 |
| 第四节 讨论 | 第69-70页 |
| 结论 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-85页 |
| 附录 | 第85-90页 |
| 附件Ⅰ：本论文中使用的缩略语 | 第85-86页 |
| 附件Ⅱ：pLXSN-tk质粒中tk基因测序图 | 第86-89页 |
| 附件Ⅲ：已在国内外学术期刊上发表的相关论文 | 第89-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
| 统计学审核证明 | 第91-92页 |
| 详细摘要 | 第92-101页 |
