大青杨顶芽cDNA文库构建及ESTs分析
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 绪论 | 第10-19页 |
| ·引言 | 第10-11页 |
| ·cDNA文库构建技术 | 第11-15页 |
| ·cDNA文库的不同类型 | 第11-12页 |
| ·全长cDNA文库的不同构建方法及其优缺点 | 第12-15页 |
| ·表达序列标签 | 第15-18页 |
| ·EST信息分析的基本思路 | 第15-16页 |
| ·表达序列标签的应用 | 第16页 |
| ·植物的表达序列标签 | 第16-18页 |
| ·功能基因组学 | 第18页 |
| ·研究目的和研究意义 | 第18-19页 |
| 2 材料和方法 | 第19-26页 |
| ·实验材料 | 第19页 |
| ·植物材料 | 第19页 |
| ·试剂 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-26页 |
| ·大青杨顶芽总RNA的提取 | 第21页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第21页 |
| ·长距离PCR(LD-PCR)合成cDNA | 第21-22页 |
| ·蛋白酶K消化 | 第22页 |
| ·SfiⅠ酶切 | 第22页 |
| ·cDNA分级分离 | 第22-23页 |
| ·载体连接 | 第23-24页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌 | 第24页 |
| ·测定文库滴度 | 第24页 |
| ·文库插入片段长度及重组率检测 | 第24-25页 |
| ·大青杨顶芽cDNA文库测序及EST分析 | 第25-26页 |
| 3 结果与分析 | 第26-34页 |
| ·总RNA的提取 | 第26-27页 |
| ·双链cDNA的合成 | 第27页 |
| ·酶切和分级分离 | 第27页 |
| ·cDNA文库滴度与插入片段检测 | 第27-28页 |
| ·EST测序结果分析 | 第28-33页 |
| ·基本数据比较分析 | 第28页 |
| ·基因表达频率以及高丰度表达基因分析 | 第28-31页 |
| ·独立基因功能注释与分析 | 第31-33页 |
| ·本章小结 | 第33-34页 |
| 4 讨论 | 第34-35页 |
| 结论 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-40页 |
| 附录 | 第40-42页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第42-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
