| 摘要 | 第1-3页 |
| Summary | 第3-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第7-20页 |
| ·前言 | 第7页 |
| ·植物脂肪酸的合成代谢研究 | 第7-11页 |
| ·植物脂肪酸生物合成的基本途径 | 第8-9页 |
| ·植物脂肪酸合成相关酶 | 第9-11页 |
| ·饱和脂肪酸合成相关酶 | 第9-10页 |
| ·不饱和脂肪酸合成相关酶 | 第10页 |
| ·超长链脂肪酸合成相关酶 | 第10-11页 |
| ·植物脂肪酸的生理功能 | 第11页 |
| ·脂肪酸与植物抗寒性 | 第11页 |
| ·脂肪酸与植物抗病性 | 第11页 |
| ·植物脂肪酸的营养特性及工业用途 | 第11-12页 |
| ·FAD2 基因的研究 | 第12-14页 |
| ·FAD2 基因的结构、功能 | 第12-13页 |
| ·FAD2 基因的调控机理研究 | 第13页 |
| ·FAD2 基因的生理学作用 | 第13-14页 |
| ·FAD2 基因在亚麻中的研究 | 第14页 |
| ·Gateway 技术的发展及应用 | 第14-17页 |
| ·Gateway 技术的原理 | 第14-17页 |
| ·创建 Gateway 入门克隆 | 第15-16页 |
| ·构建 Gateway 表达克隆 | 第16-17页 |
| ·Gateway 技术的应用 | 第17页 |
| ·亚麻转基因技术的研究 | 第17-18页 |
| ·本研究的目的意义 | 第18-19页 |
| ·技术路线 | 第19-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-34页 |
| ·实验材料 | 第20-22页 |
| ·植物材料 | 第20页 |
| ·主要仪器设备 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20页 |
| ·质粒和菌株 | 第20-21页 |
| ·培养基 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-34页 |
| ·总 RNA 的提取及质量检测 | 第22-23页 |
| ·实验准备及注意事项 | 第22页 |
| ·提取总 RNA | 第22-23页 |
| ·总 RNA 的检测 | 第23页 |
| ·目的基因的克隆 | 第23-25页 |
| ·引物设计 | 第23页 |
| ·反转录 cDNA 第一链 | 第23-24页 |
| ·目的基因的 PCR 扩增 | 第24-25页 |
| ·PCR 扩增产物的检测 | 第25页 |
| ·目的基因的胶回收纯化 | 第25页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第25-29页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第25-26页 |
| ·PCR 定向 TOPO 克隆获得中间载体 | 第26页 |
| ·热激法转化大肠杆菌 | 第26页 |
| ·中间载体的验证及测序 | 第26-27页 |
| ·质粒 DNA 的提取 | 第27-28页 |
| ·质粒的酶切及酶切片段胶回收纯化 | 第28页 |
| ·最终载体质粒 DNA 的制备 | 第28页 |
| ·LR 反应及热激法转化大肠杆菌 | 第28-29页 |
| ·最终载体单克隆的验证 | 第29页 |
| ·最终载体的农杆菌转化 | 第29-30页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第29页 |
| ·农杆菌感受态转化 | 第29-30页 |
| ·农杆菌单克隆的验证 | 第30页 |
| ·农杆菌介导的亚麻遗传转化 | 第30-34页 |
| ·油用亚麻再生体系的建立 | 第30页 |
| ·油用亚麻的遗传转化 | 第30-32页 |
| ·GUS 检测载体 pMDC139-LuFAD2 转化的抗性苗 | 第32页 |
| ·抗性植株的 PCR 检测 | 第32-34页 |
| 第三章 结果与分析 | 第34-49页 |
| ·LuFAD2 基因的克隆及序列分析 | 第34-42页 |
| ·总 RNA 的提取及质量检测 | 第34页 |
| ·LuFAD2 基因的克隆及胶回收纯化 | 第34-35页 |
| ·TOPO 反应及测序 | 第35页 |
| ·LuFAD2 基因序列分析 | 第35-41页 |
| ·LuFAD2 与其他植物 FAD2 编码的氨基酸序列同源性分析 | 第41-42页 |
| ·阳性克隆质粒 DNA 的提取及酶切 | 第42-43页 |
| ·载体构建 | 第43-45页 |
| ·亚麻 LuFAD2 基因过表达载体的构建 | 第43-45页 |
| ·亚麻 LuFAD2 基因 RNAi 载体的构建 | 第45页 |
| ·遗传转化结果 | 第45-49页 |
| ·筛选剂与 Cef 对亚麻转化的影响 | 第45-46页 |
| ·油用亚麻的遗传转化 | 第46页 |
| ·抗性愈伤的筛选及植株再生 | 第46-47页 |
| ·转基因植株的鉴定 | 第47-49页 |
| ·GUS 检测载体 pMDC139-LuFAD2 转化的抗性苗 | 第47页 |
| ·抗性植株的 PCR 检测结果 | 第47-49页 |
| 第四章 结论与讨论 | 第49-52页 |
| ·LuFAD2 基因的克隆 | 第49页 |
| ·亚麻的遗传转化 | 第49页 |
| ·不同载体转化结果的差异 | 第49-50页 |
| ·不定芽诱导和生根 | 第50页 |
| ·GUS 组织化学染色 | 第50页 |
| ·Gateway 技术构建载体的优点 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 作者简介 | 第59-60页 |
| 导师简介 | 第60-61页 |
