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马尾松CAD和CCoAOMT基因的克隆与表达分析

致谢第1-4页
摘要第4-5页
Abstract第5-6页
缩略图第6-10页
第一章 绪论第10-19页
   ·马尾松简介第10页
     ·马尾松概述第10页
     ·马尾松基因工程应用研究第10页
   ·木质素概述第10-15页
     ·木质素的组成与分类第11-12页
     ·木质素的生物合成第12-14页
     ·木质素生物合成基因调控研究第14-15页
   ·CAD 和 CCoAOMT 基因的研究进展第15-17页
     ·CAD 基因的研究进展第15-16页
     ·CCoAOMT 基因的研究进展第16-17页
   ·目的及意义第17页
   ·本研究的内容和方法第17-18页
   ·技术路线第18-19页
第二章 马尾松 CAD 和 CCOAOMT 基因的克隆与分析第19-41页
   ·试验材料第19-20页
     ·植物材料第19页
     ·菌种与质粒第19页
     ·试验试剂第19页
     ·主要仪器第19-20页
   ·试验方法第20-27页
     ·总 RNA 的提取第20页
     ·马尾松 CAD 和 CCoAOMT 基因中间片段的克隆第20-23页
     ·马尾松 CAD 和 CCoAOMT 基因两端序列的扩增第23-25页
     ·马尾松 CAD 和 CCoAOMT 基因 cDNA 全长的克隆第25页
     ·序列及生物信息学分析第25-26页
     ·组织特异性表达分析第26-27页
   ·结果与分析第27-40页
     ·总 RNA 的提取第27页
     ·马尾松 CAD 和 CCoAOMT 基因全长第27-29页
     ·马尾松 CAD 和 CCoAOMT 基因 cDNA 同源序列比对第29-30页
     ·马尾松 CAD 和 CCoAOMT 基因氨基酸序列的比对第30-33页
     ·依据 CAD 和 CCoAOMT 系统发育树的构建第33-34页
     ·马尾松 CAD 和 CCoAOMT 蛋白质一级结构与理化特征分析第34-36页
     ·马尾松 CAD 和 CCoAOMT 蛋白质二级结构预测第36-37页
     ·马尾松 CAD 和 CCoAOMT 蛋白质三维结构预测第37-38页
     ·马尾松 CAD 和 CCoAOMT 蛋白质结构域分析第38-39页
     ·马尾松 CAD 和 CCoAOMT 基因组织特异性分析第39-40页
   ·讨论第40-41页
第三章 马尾松 CAD 和 CCOAOMT 基因真核表达分析第41-50页
   ·试验材料第41-42页
     ·植物材料第41页
     ·菌种与质粒第41页
     ·试剂和培养基第41-42页
   ·试验方法第42-45页
     ·马尾松 CAD 和 CCoAOMT 全长基因克隆第42-43页
     ·质粒酶切第43页
     ·表达载体的构建第43页
     ·植物表达载体的转化第43-44页
     ·利用叶盘法转化烟草第44-45页
     ·转基因烟草检测第45页
     ·转基因烟草的木质素含量分析第45页
   ·结果与分析第45-49页
     ·克隆载体 PCR 鉴定结果第45-46页
     ·酶切结果第46页
     ·表达载体 PCR 鉴定第46-47页
     ·植物表达载体农杆菌转化第47页
     ·烟草 DNA 提取第47页
     ·转基因烟草的 PCR 检测第47-48页
     ·转基因烟草的长势第48页
     ·转基因烟草木质素含量分析第48-49页
   ·讨论第49-50页
第四章 马尾松 CAD 基因原核表达分析第50-57页
   ·试验材料第50页
     ·菌种与质粒第50页
     ·试验试剂第50页
     ·主要仪器第50页
   ·试验方法第50-53页
     ·马尾松 CAD 全长基因克隆第50页
     ·质粒酶切第50-51页
     ·原核表达载体的构建第51页
     ·外源基因的诱导表达第51-52页
     ·外源基因所编码蛋白质的 SDS-PAGE 分析第52-53页
   ·结果与分析第53-56页
     ·酶切结果第53-54页
     ·外源基因的诱导表达第54页
     ·外源基因诱导条件的优化第54-56页
   ·讨论第56-57页
第五章 结论与展望第57-59页
   ·主要结论第57页
   ·展望第57-59页
攻读学位期间发表的学术论文第59-60页
参考文献第60-65页
附录第65-69页
 附录1:PmCAD 和 PmCCoAOMTcDNA 全长序列第65-66页
 附录2:马尾松 CAD 和 CCoAOMT 三维建模的参数第66-69页
 附录3:表达载体的结构示意图第69页

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