致谢 | 第1-4页 |
摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
缩略图 | 第6-10页 |
第一章 绪论 | 第10-19页 |
·马尾松简介 | 第10页 |
·马尾松概述 | 第10页 |
·马尾松基因工程应用研究 | 第10页 |
·木质素概述 | 第10-15页 |
·木质素的组成与分类 | 第11-12页 |
·木质素的生物合成 | 第12-14页 |
·木质素生物合成基因调控研究 | 第14-15页 |
·CAD 和 CCoAOMT 基因的研究进展 | 第15-17页 |
·CAD 基因的研究进展 | 第15-16页 |
·CCoAOMT 基因的研究进展 | 第16-17页 |
·目的及意义 | 第17页 |
·本研究的内容和方法 | 第17-18页 |
·技术路线 | 第18-19页 |
第二章 马尾松 CAD 和 CCOAOMT 基因的克隆与分析 | 第19-41页 |
·试验材料 | 第19-20页 |
·植物材料 | 第19页 |
·菌种与质粒 | 第19页 |
·试验试剂 | 第19页 |
·主要仪器 | 第19-20页 |
·试验方法 | 第20-27页 |
·总 RNA 的提取 | 第20页 |
·马尾松 CAD 和 CCoAOMT 基因中间片段的克隆 | 第20-23页 |
·马尾松 CAD 和 CCoAOMT 基因两端序列的扩增 | 第23-25页 |
·马尾松 CAD 和 CCoAOMT 基因 cDNA 全长的克隆 | 第25页 |
·序列及生物信息学分析 | 第25-26页 |
·组织特异性表达分析 | 第26-27页 |
·结果与分析 | 第27-40页 |
·总 RNA 的提取 | 第27页 |
·马尾松 CAD 和 CCoAOMT 基因全长 | 第27-29页 |
·马尾松 CAD 和 CCoAOMT 基因 cDNA 同源序列比对 | 第29-30页 |
·马尾松 CAD 和 CCoAOMT 基因氨基酸序列的比对 | 第30-33页 |
·依据 CAD 和 CCoAOMT 系统发育树的构建 | 第33-34页 |
·马尾松 CAD 和 CCoAOMT 蛋白质一级结构与理化特征分析 | 第34-36页 |
·马尾松 CAD 和 CCoAOMT 蛋白质二级结构预测 | 第36-37页 |
·马尾松 CAD 和 CCoAOMT 蛋白质三维结构预测 | 第37-38页 |
·马尾松 CAD 和 CCoAOMT 蛋白质结构域分析 | 第38-39页 |
·马尾松 CAD 和 CCoAOMT 基因组织特异性分析 | 第39-40页 |
·讨论 | 第40-41页 |
第三章 马尾松 CAD 和 CCOAOMT 基因真核表达分析 | 第41-50页 |
·试验材料 | 第41-42页 |
·植物材料 | 第41页 |
·菌种与质粒 | 第41页 |
·试剂和培养基 | 第41-42页 |
·试验方法 | 第42-45页 |
·马尾松 CAD 和 CCoAOMT 全长基因克隆 | 第42-43页 |
·质粒酶切 | 第43页 |
·表达载体的构建 | 第43页 |
·植物表达载体的转化 | 第43-44页 |
·利用叶盘法转化烟草 | 第44-45页 |
·转基因烟草检测 | 第45页 |
·转基因烟草的木质素含量分析 | 第45页 |
·结果与分析 | 第45-49页 |
·克隆载体 PCR 鉴定结果 | 第45-46页 |
·酶切结果 | 第46页 |
·表达载体 PCR 鉴定 | 第46-47页 |
·植物表达载体农杆菌转化 | 第47页 |
·烟草 DNA 提取 | 第47页 |
·转基因烟草的 PCR 检测 | 第47-48页 |
·转基因烟草的长势 | 第48页 |
·转基因烟草木质素含量分析 | 第48-49页 |
·讨论 | 第49-50页 |
第四章 马尾松 CAD 基因原核表达分析 | 第50-57页 |
·试验材料 | 第50页 |
·菌种与质粒 | 第50页 |
·试验试剂 | 第50页 |
·主要仪器 | 第50页 |
·试验方法 | 第50-53页 |
·马尾松 CAD 全长基因克隆 | 第50页 |
·质粒酶切 | 第50-51页 |
·原核表达载体的构建 | 第51页 |
·外源基因的诱导表达 | 第51-52页 |
·外源基因所编码蛋白质的 SDS-PAGE 分析 | 第52-53页 |
·结果与分析 | 第53-56页 |
·酶切结果 | 第53-54页 |
·外源基因的诱导表达 | 第54页 |
·外源基因诱导条件的优化 | 第54-56页 |
·讨论 | 第56-57页 |
第五章 结论与展望 | 第57-59页 |
·主要结论 | 第57页 |
·展望 | 第57-59页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-65页 |
附录 | 第65-69页 |
附录1:PmCAD 和 PmCCoAOMTcDNA 全长序列 | 第65-66页 |
附录2:马尾松 CAD 和 CCoAOMT 三维建模的参数 | 第66-69页 |
附录3:表达载体的结构示意图 | 第69页 |