| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第7-13页 |
| ·单宁酸 | 第7页 |
| ·单宁酸的来源 | 第7页 |
| ·单宁酸的分类 | 第7页 |
| ·单宁酶 | 第7-11页 |
| ·单宁酶概论 | 第7-8页 |
| ·单宁酶的来源 | 第8-9页 |
| ·单宁酶的生物学特性 | 第9-10页 |
| ·单宁酶的晶体结构 | 第10-11页 |
| ·单宁酶的应用 | 第11-12页 |
| ·食品工业中的应用 | 第11页 |
| ·饲料工业中的应用 | 第11页 |
| ·医药化工领域中的应用 | 第11-12页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第12-13页 |
| 第二章 Aspergillus fumigates DW8 单宁酶的基因克隆、表达及性质测定 | 第13-32页 |
| ·实验材料 | 第13-14页 |
| ·实验对象 | 第13页 |
| ·菌株、载体、工具酶和试剂 | 第13页 |
| ·主要仪器设备 | 第13页 |
| ·引物合成和核酸测序 | 第13页 |
| ·溶液 | 第13-14页 |
| ·培养基 | 第14页 |
| ·实验方法 | 第14-24页 |
| ·菌株 DW8 产单宁酶能力的验证 | 第14页 |
| ·基因组的提取及分子鉴定 | 第14-16页 |
| ·单宁酶基因全长的获得 | 第16-17页 |
| ·完整序列的生物信息学分析 | 第17页 |
| ·真核表达载体 pPIC9-tanDW8 的构建 | 第17-18页 |
| ·单宁酶基因 pPIC9-tanDW8 在毕氏酵母中的表达 | 第18-20页 |
| ·单宁酶的纯化与分析 | 第20-22页 |
| ·单宁酶 TanDW8 的性质测定 | 第22-24页 |
| ·结果与分析 | 第24-30页 |
| ·菌株的活化、产酶能力验证与分子鉴定 | 第24页 |
| ·单宁酶基因 tanDW8 的获得及序列分析 | 第24-26页 |
| ·酵母表达载体 pPIC9-tanDW8 的构建 | 第26页 |
| ·具有单宁酶活性的阳性转化子的筛选 | 第26页 |
| ·单宁酶 TanDW8 的诱导表达及纯化 | 第26-27页 |
| ·单宁酶 TanDW8 的酶学性质分析 | 第27-30页 |
| ·讨论 | 第30-31页 |
| 本章小结 | 第31-32页 |
| 第三章 Thielavia subthermophila XZ7 单宁酶的基因克隆、表达及性质测定 | 第32-45页 |
| ·实验材料 | 第32页 |
| ·实验对象 | 第32页 |
| ·菌株、载体、工具酶和试剂 | 第32页 |
| ·主要仪器设备 | 第32页 |
| ·引物合成和核酸测序 | 第32页 |
| ·溶液 | 第32页 |
| ·培养基 | 第32页 |
| ·实验方法 | 第32-38页 |
| ·菌株 XZ7 产单宁酶能力的验证 | 第32页 |
| ·CTAB 法提取 XZ7 菌基因组 | 第32页 |
| ·单宁酶基因全长 tanXZ7 的获得 | 第32-36页 |
| ·序列分析 | 第36页 |
| ·真核表达载体 pPIC9-tanXZ7 的构建 | 第36页 |
| ·单宁酶基因 tanXZ7 在毕赤酵母中的表达 | 第36-37页 |
| ·单宁酶 TanXZ7 的纯化与分析 | 第37页 |
| ·纯化的重组酶 TanXZ7 的性质测定 | 第37-38页 |
| ·结果与分析 | 第38-43页 |
| ·菌株的活化、筛选 | 第38页 |
| ·XZ7 单宁酶基因全长 tanXZ7 的获得及分析 | 第38-40页 |
| ·表达载体 pPIC9-tanXZ7 的构建 | 第40页 |
| ·单宁酶基因 tanXZ7 在毕赤酵母中的表达 | 第40页 |
| ·单宁酶 TanXZ7 的纯化 | 第40-41页 |
| ·单宁酶 TanSZ7 的酶学性质分析 | 第41-43页 |
| ·讨论 | 第43-44页 |
| 本章小结 | 第44-45页 |
| 第四章 全文结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 作者简历 | 第53页 |
