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奶牛乳房炎病例中无乳链球菌保护性抗原的克隆与表达

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
英文缩略词表第9-10页
第1章 综述第10-24页
   ·无乳链球菌的感染和流行病学第10-12页
     ·无乳链球菌对奶牛的致病性第10-11页
     ·无乳链球菌对其它动物的致病性第11页
     ·无乳链球菌对人类的致病性第11-12页
   ·无乳链球菌的病原学研究第12-14页
     ·无乳链球菌的分类及生物学特性第12页
     ·无乳链球菌的主要毒力因子第12-14页
     ·无乳链球菌对乳房的致病机理第14页
   ·无乳链球菌表面蛋白的研究进展第14-18页
     ·Alp蛋白家族第15页
     ·β蛋白第15-16页
     ·C5a多肽酶第16页
     ·Lmb蛋白第16页
     ·磷酸甘油酸激酶(Phosphoglycerate kinase,Pgk)第16-17页
     ·表面免疫相关蛋白(Surface immunogenic protein,Sip)第17页
     ·3‐磷酸甘油酸脱氢酶(GAPDH)第17-18页
   ·无乳链球菌的检测技术第18-20页
     ·常规检测方法第18-19页
     ·分子生物学检测方法第19-20页
   ·无乳链球菌疫苗研究现状第20-22页
     ·灭活疫苗第20页
     ·荚膜多糖疫苗第20-21页
     ·结合(蛋白偶联)疫苗第21页
     ·基因工程亚单位疫苗第21-22页
   ·本研究的目的及意义第22-24页
第2章 奶样中无乳链球菌的分离与鉴定第24-34页
   ·材料第24-25页
     ·病料来源第24页
     ·菌株第24页
     ·培养基第24-25页
     ·主要试剂第25页
     ·试验动物第25页
     ·主要仪器设备第25页
   ·实验方法第25-28页
     ·奶样采集第25-26页
     ·乳房炎阳性奶样的检测第26页
     ·阳性奶样中无乳链球菌的分离与鉴定第26-28页
     ·药物敏感性试验第28页
     ·无乳链球菌抗血清的制备第28页
   ·结果第28-32页
     ·奶样检测与无乳链球菌的分离第28-30页
     ·分离菌株的鉴定结果第30-31页
     ·抗生素敏感性试验第31-32页
     ·无乳链球菌抗血清的制备第32页
   ·讨论第32-34页
第3章 无乳链球菌 SIP 基因的原核表达及免疫原性分析第34-58页
   ·材料第34-35页
     ·菌株与载体第34页
     ·主要试剂与培养基第34-35页
     ·实验设备第35页
   ·实验方法第35-46页
     ·无乳链球菌 Sip 基因的克隆第35-36页
     ·PCR产物的回收与纯化第36-37页
     ·重组表达载体的构建第37-40页
     ·Sip重组蛋白的诱导表达及 SDS‐PAGE 分析第40-42页
     ·表达产物的 Western blot 分析第42-43页
     ·Sip重组蛋白的纯化第43-44页
     ·动物免疫试验第44-45页
     ·间接 ELISA 法检测小鼠血清抗体效价第45页
     ·免疫保护力评价第45-46页
   ·结果第46-56页
     ·Sip基因扩增结果第46页
     ·重组质粒鉴定结果第46-47页
     ·Sip基因序列分析第47-49页
     ·SIP重组蛋白的 SDS‐PAGE 分析第49-50页
     ·重组蛋白诱导条件的优化第50-52页
     ·Sip重组蛋白的 Western blot 分析第52-53页
     ·重组蛋白纯化结果第53页
     ·间接 ELISA 检测抗体水平第53-55页
     ·小鼠免疫保护性试验结果第55-56页
   ·讨论第56-58页
第4章 结论第58-59页
参考文献第59-69页
致谢第69-70页
作者简介第70页

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