| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 引言 | 第8-9页 |
| 第一章 试剂及仪器 | 第9-11页 |
| ·细胞来源 | 第9页 |
| ·试剂及耗材 | 第9-10页 |
| ·仪器 | 第10-11页 |
| 第二章 方法 | 第11-20页 |
| ·实验器具的处理 | 第11页 |
| ·试剂的配置 | 第11-12页 |
| ·磷酸盐缓冲液PBS溶液的配制 | 第11页 |
| ·细胞冻存液的配制 | 第11页 |
| ·10%DMEM培养液的配制 | 第11页 |
| ·10%山羊血清配置 | 第11页 |
| ·0.3%TritionX-100溶液的配制 | 第11页 |
| ·4%多聚甲醛溶液的配制 | 第11页 |
| ·一抗稀释液的配置 | 第11页 |
| ·辣根酶标记二抗稀释液的配置 | 第11-12页 |
| ·75%乙醇配置 | 第12页 |
| ·二氧化硅(SiO_2)的配置 | 第12页 |
| ·埃克替尼溶液的配置 | 第12页 |
| ·细胞的培养 | 第12-13页 |
| ·细胞复苏 | 第12页 |
| ·细胞传代 | 第12-13页 |
| ·细胞计数法 | 第13页 |
| ·细胞冻存 | 第13页 |
| ·矽肺细胞模型制备 | 第13-15页 |
| ·AM条件培养上清液的制备 | 第14页 |
| ·肺上皮细胞染尘 | 第14-15页 |
| ·光学显微镜下观察细胞的形态学变化 | 第15页 |
| ·实时荧光定量PCR (RT-PCR)检测A549细胞E-cadherin、α-SMA、EGFR mRNA的表达 | 第15-18页 |
| ·检测染尘肺上皮细胞E-cadherin、α-SMA、EGFR mRNA的表达 | 第15页 |
| ·检测埃克替尼干预染尘肺上皮细胞后E-cadherin、α-SMA、EGFR mRNA的表达 | 第15-16页 |
| ·Trizol法提取细胞总RNA | 第16页 |
| ·RNA纯度与浓度的测定 | 第16页 |
| ·逆转录反应cDNA的合成 | 第16-17页 |
| ·PCR扩增 | 第17-18页 |
| ·细胞免疫荧光法检测E-cadherin、α-SMA、EGFR蛋白表达的影响 | 第18-19页 |
| ·实验分组 | 第18页 |
| ·细胞免疫荧光步骤 | 第18-19页 |
| ·统计学处理 | 第19-20页 |
| 第三章 实验结果 | 第20-29页 |
| ·ELISA方法检测SiO_2刺激AM培养上清液中TGF-β1表达变化 | 第20页 |
| ·倒置相差显微镜下A549细胞形态学观察 | 第20-22页 |
| ·RT-PCR检测E-cadherin、α-SMA、EGFR mRNA的表达结果 | 第22-26页 |
| ·染尘肺上皮细胞E-cadherin、α-SMA、EGFR mRNA的表达 | 第22页 |
| ·埃克替尼对染尘肺上皮细胞E-cadherin、α-SMA、EGFR mRNA的表达水平的影响 | 第22-26页 |
| ·细胞免疫荧光法检测E-cadherin、α-SMA、EGFR蛋白表达结果 | 第26-29页 |
| 第四章 讨论 | 第29-34页 |
| 第五章 结论 | 第34-35页 |
| 参考文献 | 第35-39页 |
| 综述 | 第39-58页 |
| 综述参考文献 | 第50-58页 |
| 攻读学位期间成果 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
