| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-23页 |
| ·课题的提出 | 第10页 |
| ·柑橘黄龙病研究进展 | 第10-14页 |
| ·柑橘黄龙病病原、寄主及传播方式 | 第10-11页 |
| ·柑橘黄龙病的诊断技术 | 第11-13页 |
| ·柑橘黄龙病的防治 | 第13-14页 |
| ·柑橘黄龙病的新进展 | 第14页 |
| ·分泌蛋白的表达纯化 | 第14-17页 |
| ·柑橘HLB中的Ⅰ型分泌系统及其分泌蛋白 | 第14-15页 |
| ·细菌Ⅰ型分泌系统及Ⅰ型分泌蛋白 | 第15-16页 |
| ·蛋白质表达纯化的研究进展 | 第16-17页 |
| ·柑橘衰退病研究进展 | 第17-22页 |
| ·柑橘衰退病病原 | 第17-18页 |
| ·柑橘衰退病的传播、株系分化及表现 | 第18-19页 |
| ·柑橘衰退病的诊断和株系鉴定技术 | 第19-20页 |
| ·柑橘衰退病的防治 | 第20-22页 |
| ·研究的目的与意义 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-37页 |
| ·实验材料 | 第23-26页 |
| ·植物材料 | 第23页 |
| ·细菌菌株和质粒 | 第23页 |
| ·主要试剂与耗材 | 第23-24页 |
| ·所用引物及其序列 | 第24页 |
| ·主要溶液的配制 | 第24-26页 |
| ·主要仪器 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-37页 |
| ·Serralysin蛋白N-端基因的克隆 | 第26-32页 |
| ·SerN蛋白质的表达及纯化 | 第32-33页 |
| ·柑橘HLB的检测 | 第33-35页 |
| ·柑橘样品的CTV检测 | 第35-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-53页 |
| ·柑橘HLB病原SerN基因的克隆 | 第37-40页 |
| ·SerN基因的扩增、检测及回收纯化 | 第37页 |
| ·重组质粒pMD19-T-SerN的构建、测序和双酶切验证 | 第37-38页 |
| ·重组质粒pET24a-SerN的构建 | 第38-39页 |
| ·重组质粒pET24a-SerN的双酶切验证 | 第39-40页 |
| ·SerN蛋白的表达及纯化 | 第40-45页 |
| ·SerN蛋白在E. coli表达菌株pLysS中小量诱导表达结果 | 第40-41页 |
| ·SerN蛋白在E. coli不同表达菌株中的表达情况 | 第41-42页 |
| ·诱导剂浓度对SerN蛋白表达的影响 | 第42-43页 |
| ·不同的Binding buffer对SerN蛋白纯化效果的影响 | 第43-44页 |
| ·PBS buffer中不同盐浓度对SerN蛋白溶解性的影响 | 第44-45页 |
| ·柑橘黄龙病的检测结果 | 第45-50页 |
| ·101个柑橘样品HLB的常规PCR检测结果 | 第45-46页 |
| ·101个柑橘样品HLB的QPCR检测结果 | 第46-50页 |
| ·柑橘衰退病的检测 | 第50-53页 |
| ·CTV病原p23蛋白基因的克隆 | 第50-51页 |
| ·81个柑橘样品的CTV检测结果 | 第51-53页 |
| 4 讨论 | 第53-57页 |
| ·柑橘HLB病原SerN基因的克隆 | 第53页 |
| ·SerN蛋白的表达纯化 | 第53-54页 |
| ·柑橘HLB的检测 | 第54-55页 |
| ·CTV病毒p23蛋白基因的克隆及样品CTV的检测 | 第55-56页 |
| ·下一步工作及展望 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
