摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-12页 |
缩略词表 | 第12-14页 |
引言 | 第14-16页 |
参考文献 | 第16-19页 |
第一部分 实验研究 | 第19-64页 |
第一章 TB4转基因绒山羊阳性鉴定 | 第19-34页 |
1 实验材料 | 第19-23页 |
·实验动物 | 第19页 |
·主要试剂 | 第19-20页 |
·实验仪器 | 第20页 |
·试剂配制 | 第20-23页 |
2 实验方法 | 第23-28页 |
·原代细胞的体外培养 | 第23-24页 |
·Southern blot | 第24-26页 |
·转基因结构检测 | 第26-28页 |
3 实验结果 | 第28-32页 |
·基因组电泳检测 | 第28页 |
·Southern blot检测结果 | 第28-30页 |
·PCR检测结果 | 第30-32页 |
4 讨论 | 第32-34页 |
第二章 外源基因拷贝数检测 | 第34-42页 |
1 实验材料 | 第34-35页 |
·实验动物 | 第34页 |
·主要试剂及仪器 | 第34-35页 |
2 实验方法 | 第35-36页 |
·引物设计与合成 | 第35页 |
·质粒DNA提取 | 第35页 |
·标准品的制备 | 第35-36页 |
·实时定量PCR体系及程序设定 | 第36页 |
3 实验结果 | 第36-38页 |
·绝对定量PCR的扩增曲线和标准曲线 | 第36-38页 |
·外源基因拷贝数的计算 | 第38页 |
4 讨论 | 第38-40页 |
参考文献 | 第40-42页 |
第三章 TB4基因的表达量与产绒性能的分析 | 第42-63页 |
1 实验材料 | 第42-44页 |
·实验动物 | 第42页 |
·主要仪器 | 第42-43页 |
·实验试剂 | 第43页 |
·试剂配制 | 第43-44页 |
2 实验方法 | 第44-48页 |
·在转基因绒山羊中Tβ4基因mRNA的相对表达量检测 | 第44-46页 |
·Western blot | 第46-47页 |
·石蜡切片、冰冻切片及免疫组化染色 | 第47-48页 |
3 实验结果 | 第48-56页 |
·Tβ4基因在mRNA水平的相对表达量分析 | 第48-50页 |
·Western blot | 第50-51页 |
·皮肤组织的切片分析 | 第51-55页 |
·产绒量与Tβ4基因表达量及拷贝数间的关系 | 第55-56页 |
4 讨论 | 第56-59页 |
·关于外源基因表达和沉默的机制 | 第56-57页 |
·关于Tβ4基因在皮肤组织中的表达量分析 | 第57-58页 |
·关于Tβ4基因表达量与毛囊生长及产绒量的分析 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-63页 |
结论 | 第63-64页 |
第二部分 文献综述 | 第64-79页 |
1 DNA水平的检测 | 第64-66页 |
·PCR技术 | 第64-65页 |
·Southern杂交技术 | 第65-66页 |
2 外源基因的整合位点检测 | 第66-70页 |
·反向PCR | 第66-67页 |
·连接介导的PCR | 第67-68页 |
·半随机引物PCR | 第68-70页 |
3 拷贝数分析 | 第70-72页 |
·Southern blot分析 | 第70页 |
·实时定量PCR | 第70-72页 |
4 外源蛋白检测 | 第72-74页 |
·Western blot | 第72页 |
·ELISA | 第72-74页 |
参考文献 | 第74-79页 |
附录 | 第79-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
硕士期间论文发表 | 第81页 |