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Tβ4转基因绒山羊中目的基因拷贝数及表达量与产绒性能关系的研究

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
缩略词表第12-14页
引言第14-16页
参考文献第16-19页
第一部分 实验研究第19-64页
 第一章 TB4转基因绒山羊阳性鉴定第19-34页
  1 实验材料第19-23页
   ·实验动物第19页
   ·主要试剂第19-20页
   ·实验仪器第20页
   ·试剂配制第20-23页
  2 实验方法第23-28页
   ·原代细胞的体外培养第23-24页
   ·Southern blot第24-26页
   ·转基因结构检测第26-28页
  3 实验结果第28-32页
   ·基因组电泳检测第28页
   ·Southern blot检测结果第28-30页
   ·PCR检测结果第30-32页
  4 讨论第32-34页
 第二章 外源基因拷贝数检测第34-42页
  1 实验材料第34-35页
   ·实验动物第34页
   ·主要试剂及仪器第34-35页
  2 实验方法第35-36页
   ·引物设计与合成第35页
   ·质粒DNA提取第35页
   ·标准品的制备第35-36页
   ·实时定量PCR体系及程序设定第36页
  3 实验结果第36-38页
   ·绝对定量PCR的扩增曲线和标准曲线第36-38页
   ·外源基因拷贝数的计算第38页
  4 讨论第38-40页
  参考文献第40-42页
 第三章 TB4基因的表达量与产绒性能的分析第42-63页
  1 实验材料第42-44页
   ·实验动物第42页
   ·主要仪器第42-43页
   ·实验试剂第43页
   ·试剂配制第43-44页
  2 实验方法第44-48页
   ·在转基因绒山羊中Tβ4基因mRNA的相对表达量检测第44-46页
   ·Western blot第46-47页
   ·石蜡切片、冰冻切片及免疫组化染色第47-48页
  3 实验结果第48-56页
   ·Tβ4基因在mRNA水平的相对表达量分析第48-50页
   ·Western blot第50-51页
   ·皮肤组织的切片分析第51-55页
   ·产绒量与Tβ4基因表达量及拷贝数间的关系第55-56页
  4 讨论第56-59页
   ·关于外源基因表达和沉默的机制第56-57页
   ·关于Tβ4基因在皮肤组织中的表达量分析第57-58页
   ·关于Tβ4基因表达量与毛囊生长及产绒量的分析第58-59页
  参考文献第59-63页
 结论第63-64页
第二部分 文献综述第64-79页
 1 DNA水平的检测第64-66页
   ·PCR技术第64-65页
   ·Southern杂交技术第65-66页
 2 外源基因的整合位点检测第66-70页
   ·反向PCR第66-67页
   ·连接介导的PCR第67-68页
   ·半随机引物PCR第68-70页
 3 拷贝数分析第70-72页
   ·Southern blot分析第70页
   ·实时定量PCR第70-72页
 4 外源蛋白检测第72-74页
   ·Western blot第72页
   ·ELISA第72-74页
 参考文献第74-79页
附录第79-80页
致谢第80-81页
硕士期间论文发表第81页

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