| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-21页 |
| ·克隆进展 | 第12-14页 |
| ·哺乳动物克隆进展 | 第12-13页 |
| ·克隆牛进展 | 第13-14页 |
| ·X染色体失活 | 第14-18页 |
| ·X染色体失活机制 | 第14-15页 |
| ·X染色体印记失活和失活染色体的决定 | 第15-16页 |
| ·牛X染色体失活研究 | 第16-17页 |
| ·X-染色体与克隆动物 | 第17-18页 |
| ·基因表达抑制调控TALER技术简介 | 第18-21页 |
| ·新型基因组编辑技术TALENs | 第18-19页 |
| ·TALER基因抑制调控技术工作机制 | 第19-21页 |
| 第二章 胎牛成纤维细胞转染及XIST基因抑制表达细胞的获取、筛选、鉴定 | 第21-37页 |
| 前言 | 第21页 |
| ·材料 | 第21-22页 |
| ·实验仪器 | 第22页 |
| ·载体 | 第22页 |
| ·药品和试剂 | 第22页 |
| ·方法 | 第22-32页 |
| ·胎牛成纤维细胞解冻与培养 | 第22页 |
| ·胎牛成纤维细胞DNA提取 | 第22-23页 |
| ·PCR引物设计与合成 | 第23-24页 |
| ·胎牛成纤维细胞性别鉴定PCR与琼脂糖凝胶电泳 | 第24-25页 |
| ·胎牛成纤维细胞电转染 | 第25-26页 |
| ·转染细胞筛选 | 第26-28页 |
| ·细胞的冻存 | 第28页 |
| ·RNA提取与反转录 | 第28-30页 |
| ·Xist引物筛选 | 第30页 |
| ·转染后胎牛成纤维细胞Xist相对表达量检测 | 第30-32页 |
| ·结果 | 第32-37页 |
| ·胎牛成纤维细胞性别鉴定 | 第32页 |
| ·牛Xist引物筛选 | 第32-33页 |
| ·胎牛成纤维细胞转染、筛选 | 第33-37页 |
| 第三章 抑制供体细胞XIST基因表达对牛早期克隆胚发育的影响 | 第37-44页 |
| ·材料 | 第37页 |
| ·实验仪器 | 第37页 |
| ·药品和试剂 | 第37页 |
| ·方法 | 第37-41页 |
| ·主要试剂配制 | 第37-39页 |
| ·显微操作针的制备 | 第39页 |
| ·体细胞核移植 | 第39-41页 |
| ·结果 | 第41-44页 |
| ·体细胞核移植获得早期胚胎效率比较 | 第41-42页 |
| ·转染后阳性细胞做供体获得早期克隆胚胎形态 | 第42-44页 |
| 第四章 讨论 | 第44-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 致谢 | 第50页 |