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猪繁殖与呼吸综合征病毒上调PGE2的机理研究

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
缩略词表第10-11页
第一章 引言第11-33页
   ·猪繁殖与呼吸综合征概述第11-12页
     ·历史与分布第11页
     ·临床症状第11-12页
   ·猪繁殖与呼吸综合征病毒概述第12-15页
     ·病原第12-13页
     ·分子生物学特征第13-14页
     ·PRRSV的感染靶细胞与机制第14-15页
   ·PRRSV的流行病学特征第15-17页
     ·感染率高第15-16页
     ·易感动物第16页
     ·传播与防治第16-17页
   ·高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒第17页
   ·发热第17-19页
     ·致热原和激活物的概念第18页
     ·致热源作用部位第18页
     ·致热原的作用方式第18-19页
   ·前列腺素E_2第19-26页
     ·PGE_2概述第19页
     ·PGE_2合成第19-24页
     ·PGE_2和发热第24-26页
   ·MAPK信号通路第26-29页
     ·MAPK第26-27页
     ·ERK1/2第27-28页
     ·p38 MAPK第28-29页
   ·Protein kinase C第29页
   ·CCAAT增强子结合蛋白β(CCAAT-enhancer-binding proteins,C/EBP-β第29-32页
     ·C/EBP第29-30页
     ·C/EBP-β第30-32页
   ·研究目的及意义第32-33页
第二章 实验材料和研究方法第33-53页
   ·实验材料第33-37页
     ·仪器第33页
     ·主要实验试剂第33-35页
     ·试剂配制第35-36页
     ·菌种及质粒第36页
     ·病毒和细胞第36页
     ·细胞培养和病毒感染第36-37页
     ·病毒TCID50的检测方法第37页
     ·实验动物第37页
   ·实验方法第37-53页
     ·繁毒第37-38页
     ·病毒紫外灭活第38页
     ·攻毒以及体温检测第38页
     ·BALF(Bronchoalveolar lavage fluid)和血清的获取第38页
     ·原核表达质粒的构建及原核表达第38-39页
     ·多克隆抗体制备第39页
     ·流式细胞术检测PAMs胞内COX-1/2蛋白表达情况第39-40页
     ·实时定量PCR第40-42页
     ·信号通路抑制试验第42-43页
     ·Western blot实验第43-44页
     ·COX-1启动子和突变质粒的构建第44页
     ·质粒小量提取第44-45页
     ·质粒转染实验第45页
     ·双荧光素酶报告检测试验第45-46页
     ·siRNA试验第46-47页
     ·激光共聚焦第47页
     ·ELISA检测PGE_2量第47页
     ·细胞组分核质分离第47-48页
     ·染色质免疫共沉淀试验(ChIP)第48-52页
     ·统计学处理第52-53页
第三章 PRRSV通过ERK1/2-C/EBP-β通路上调COX-1从而导致PGE_2上升第53-77页
   ·实验结果与分析第53-74页
     ·HP-PRRSV感染能够上调PGE_2水平第53-56页
     ·PRRSV感染PAMs上调COX-1的mRNA水平第56-57页
     ·COX-1多克隆抗体的制备第57-60页
     ·PRRSV感染PAMs能够上调COX-1蛋白水平的表达第60-61页
     ·HP-PRRSV能够通过上调COX-1引起PGE_2表达升高第61-63页
     ·PRRSV通过MEK-ERK1/2信号通路诱导COX-1表达第63-66页
     ·猪COX-1启动子的克隆和序列分析第66-70页
     ·HP-PRRSV通过诱导C/EBP-β磷酸化来激活COX-1表达第70-74页
   ·讨论第74-77页
     ·HP-PRRSV导致致热源PGE_2的分泌增加第74页
     ·HP-PRRSV上调COX-1而不是COX-2并促进PGE_2的分泌第74-75页
     ·HP-PRRSV通过ERK1/2-p-C/EBP-β途径激活COX-1第75-77页
结论第77-79页
参考文献第79-95页
致谢第95-97页
个人简介第97页

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