| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第1章 前言 | 第10-12页 |
| 第2章 材料与方法 | 第12-21页 |
| ·材料 | 第12-14页 |
| ·细胞系、菌株、质粒 | 第12页 |
| ·主要试剂 | 第12-13页 |
| ·主要仪器 | 第13-14页 |
| ·方法 | 第14-20页 |
| ·主要试剂配置方法 | 第14页 |
| ·引物的设计与合成 | 第14-15页 |
| ·细胞培养及传代 | 第15页 |
| ·干细胞的鉴定 | 第15-16页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第16页 |
| ·cDNA 的合成 | 第16-17页 |
| ·SATB1、Wnt1、β-catenin 的检测 | 第17页 |
| ·PCR 产物回收纯化 | 第17-18页 |
| ·标准品质粒的构建及荧光定量 PCR | 第18-20页 |
| ·统计学分析 | 第20-21页 |
| 第3章 结果 | 第21-30页 |
| ·MCF7 细胞及干细胞培养 | 第21页 |
| ·流式细胞术检测 CD44+CD24-/low的表达鉴定乳腺癌干细胞 | 第21-22页 |
| ·MCF-7 细胞及微球体细胞总 RNA 的提取 | 第22-23页 |
| ·PCR 产物电泳鉴定 | 第23页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第23-29页 |
| ·蓝白筛选 | 第23-24页 |
| ·重组质粒测序鉴定 | 第24-26页 |
| ·标准曲线的制作 | 第26-29页 |
| ·SATB1、Wnt1、β-catenin 在 MCF-7 细胞及乳腺癌干细胞中 mRNA 表达水平分析 | 第29-30页 |
| 第4章 讨论 | 第30-33页 |
| 第5章 结论 | 第33-34页 |
| 致谢 | 第34-35页 |
| 参考文献 | 第35-37页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第37-38页 |
| 综述 | 第38-46页 |
| 参考文献 | 第44-46页 |
