| 摘要 | 第1-13页 |
| ABSTRACT | 第13-17页 |
| 第一章 SOCS3及其信号通路 | 第17-52页 |
| 1 SOCS3的结构与作用机制 | 第17-22页 |
| ·SOCS3基因的发现 | 第17-18页 |
| ·SOCS蛋白的结构 | 第18-19页 |
| ·SOCS3的表达 | 第19页 |
| ·SOCS3的作用机制 | 第19-22页 |
| 2 SOCS3的功能 | 第22-29页 |
| ·SOCS3参与了细胞因子介导的信号转导 | 第22-23页 |
| ·SOCS3参与了先天免疫应答过程中的调节 | 第23-24页 |
| ·SOCS3参与了T细胞的分化 | 第24-25页 |
| ·SOCS3与免疫炎症疾病之间的关系 | 第25-26页 |
| ·SOCS3在胚胎发育和肿瘤发生中的作用 | 第26-28页 |
| ·SOCS3和肥胖,糖尿病的关系 | 第28-29页 |
| 3 与SOCS3相关的负反馈调节机制 | 第29-52页 |
| ·信号通路中的泛素化调节 | 第31-35页 |
| ·SOCS蛋白与TLRs信号传导的负调控机制 | 第35-38页 |
| ·SOCS3参与IL-6信号途径的负反馈调控 | 第38-40页 |
| ·SOCS3蛋白在Ieptin通路中的负调控作用 | 第40-45页 |
| ·SOCS3蛋白在insulin通路中的负调控作用 | 第45-52页 |
| ·SOCS3通过与胰岛素受体相互作用抑制胰岛素信号转导 | 第47-48页 |
| ·SOCS3可能通过诱导信号蛋白降解而抑制胰岛素信号转导 | 第48-49页 |
| ·SOCS3参与其他细胞因子诱导胰岛素抵抗的发生 | 第49-52页 |
| 第二章 脂肪酸β-氧化的相关背景 | 第52-72页 |
| 1 脂肪酸β-氧化的发现和简介 | 第52-55页 |
| ·脂肪酸β-氧化的发现 | 第52-53页 |
| ·脂肪酸β-氧化简介 | 第53-55页 |
| 2 脂肪酸β-氧化的生物化学机制 | 第55-60页 |
| ·脂肪酸跨细胞膜运输和活化 | 第55-56页 |
| ·脂肪酸通过肉毒碱介导的转运 | 第56-57页 |
| ·脂肪酸β-氧化的循环过程 | 第57-60页 |
| 3 脂肪酸β-氧化的调控机制 | 第60-62页 |
| ·糖代谢对于脂肪酸β-氧化的调控 | 第60-61页 |
| ·能量底物的选择性调控机制 | 第61-62页 |
| 4 脂肪代谢过程中相关基因的缺失及诊断 | 第62-70页 |
| ·肉毒碱的缺失(PCD) | 第63-64页 |
| ·中性脂肪堆贮疾病 | 第64-65页 |
| ·肉毒碱棕榈酸转移酶Ⅱ(CPT Ⅱ)的缺失 | 第65页 |
| ·超长链脂酰辅酶A脱氢酶的缺失 | 第65-66页 |
| ·线粒体三功能蛋白的缺失 | 第66页 |
| ·磷脂酸酸性磷酸酶缺失 | 第66-67页 |
| ·中链脂酰辅酶A脱氢酶缺失 | 第67页 |
| ·短链脂酰辅酶A脱氢酶缺失 | 第67-68页 |
| ·患有肌肉脂质堆积的其他疾病 | 第68页 |
| ·肌肉脂沉积症的诊断方法 | 第68-70页 |
| 5 本论文的研究基础和目的意义 | 第70-72页 |
| 第三章 SOCS3蛋白对脂肪代谢影响的研究 | 第72-109页 |
| 摘要 | 第72页 |
| 1 前言 | 第72-74页 |
| 2 材料与方法 | 第74-92页 |
| ·菌株、质粒与细胞 | 第74-75页 |
| ·试剂与抗体 | 第75页 |
| ·重组质粒的构建 | 第75-76页 |
| ·实验方法 | 第76-92页 |
| ·质粒的小量制备 | 第76页 |
| ·限制性酶消化 | 第76页 |
| ·从琼脂糖凝胶回收DNA | 第76-77页 |
| ·DNA片段和载体的连接 | 第77页 |
| ·冷氯化钙法制备新鲜感受态细胞 | 第77页 |
| ·电转化感受态细胞的制备 | 第77-78页 |
| ·质粒DNA的常规转化法 | 第78页 |
| ·质粒的电转化法 | 第78页 |
| ·菌种保藏 | 第78-79页 |
| ·细胞培养基的配制 | 第79页 |
| ·细胞传代培养 | 第79页 |
| ·细胞的冻存与复苏 | 第79-80页 |
| ·细胞转染 | 第80-81页 |
| ·重组蛋白的原核表达 | 第81页 |
| ·N i~++亲和层析法纯化蛋白质 | 第81-83页 |
| ·Western Blot | 第83页 |
| ·噬菌体展示技术 | 第83-86页 |
| ·酵母双杂交实验 | 第86-89页 |
| ·GST-SOCS3融合蛋白表达和纯化 | 第89-90页 |
| ·GST pull-down实验 | 第90-91页 |
| ·免疫共沉淀实验 | 第91页 |
| ·动物实验 | 第91-92页 |
| 3. 研究结果 | 第92-105页 |
| ·重组质粒的构建和鉴定 | 第92-95页 |
| ·重组SOCS3蛋白的表达和纯化 | 第95-96页 |
| ·带GST标签的SOCS3融合蛋白的表达纯化 | 第96-97页 |
| ·SOCS3结合短肽的T7 Select 噬菌体文库筛选 | 第97页 |
| ·ELISA验证SOCS3蛋白与短肽的结合作用 | 第97-98页 |
| ·酵母双杂交验证SOCS3蛋白与VLCAD的相互作用 | 第98-99页 |
| ·SOCS3蛋白与VLCAD蛋白在体外的直接相互作用 | 第99-100页 |
| ·SOCS3蛋白与VLCAD蛋白在体内相互作用的验证 | 第100-102页 |
| ·LPS刺激诱导的SOCS3蛋白可以降解VLCAD的C端 | 第102-105页 |
| 4 讨论 | 第105-109页 |
| 第四章 日本脑炎病毒囊膜蛋白抑制病毒侵染 | 第109-122页 |
| 摘要 | 第109页 |
| 1 前言 | 第109-111页 |
| 2 材料与方法 | 第111-118页 |
| ·菌株、质粒与细胞 | 第111页 |
| ·试剂与抗体 | 第111页 |
| ·重组质粒的构建 | 第111页 |
| ·实验方法 | 第111-118页 |
| ·引物的设计 | 第111-112页 |
| ·乙脑病毒基因RNA的提取(TRIZOL) | 第112页 |
| ·乙脑病毒基因组RNA的RT-PCR | 第112页 |
| ·PCR获取JEV的EⅢ片段 | 第112-113页 |
| ·3’端的dA附加反应 | 第113页 |
| ·连接T载体 | 第113-114页 |
| ·感受态细胞的制备(Ca2Cl法) | 第114页 |
| ·质粒DNA的常规转化法 | 第114页 |
| ·限制性酶消化 | 第114-115页 |
| ·N i~++亲和层析法纯化EⅢ蛋白质 | 第115-116页 |
| ·EⅢ蛋白的复性 | 第116-117页 |
| ·Western Blot | 第117页 |
| ·噬菌斑实验 | 第117-118页 |
| 3 研究结果 | 第118-120页 |
| ·重组质粒的构建和鉴定 | 第118页 |
| ·JEV-EⅢ蛋白的表达和纯化 | 第118-119页 |
| ·JEV-EⅢ蛋白的western blot检测 | 第119页 |
| ·JEV-EⅢ蛋白对病毒入侵的抑制实验 | 第119-120页 |
| 4 讨论 | 第120-121页 |
| 5 本研究的特色和创新点 | 第121-122页 |
| 参考文献 | 第122-138页 |
| 博士期间所发表的相关研究论文 | 第138-139页 |
| 致谢 | 第139页 |
